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1、Helenna電泳儀操作程序1.準(zhǔn)備1.2試劑的準(zhǔn)備：脫染色液：取500ml冰醋酸于脫染色液桶中再加入9500ml蒸餾水混勻。有效期6個(gè)月。1.2染色液：取濃縮酸蘭染劑一瓶于染色桶中再加入5%的冰醋酸1000ML混勻。在室溫下有效期為6個(gè)月。2.操作步驟2.1樣品準(zhǔn)備：2.1.1.SPIFE樣品盤(pán)準(zhǔn)備：將樣品插條放入樣品盤(pán)中的正確位置。2.1.2加樣：將準(zhǔn)備好的供試品排好順序；在樣品盤(pán)中按順序每孔加入17ul準(zhǔn)備好的供試品品。每次試驗(yàn)需做一份血清蛋白電泳正常質(zhì)控。2.2開(kāi)機(jī)打開(kāi)“SPIFE3000”電
2、源開(kāi)關(guān)。儀器自檢，自動(dòng)清洗并排空殘留的液體。電泳顯示屏上顯示：“SERUMPROTEIN21℃.COOL”。打開(kāi)電泳倉(cāng)蓋，電泳顯示屏上顯示：INFILING。自動(dòng)點(diǎn)樣器自動(dòng)移動(dòng)到最左端。電泳顯示屏上顯示：“TOMOVEAPLLICATORLEFTPRESS（START）TOMOVEAPLLICATORRIGHTPRESS（CONTINUE）”2.3電泳按照電泳顯示屏上提示，按CONTINUE鍵，自動(dòng)點(diǎn)樣器將移動(dòng)到電泳倉(cāng)最右端。將加好樣品的樣品盤(pán)放置于樣品槽中。按START鍵,自動(dòng)點(diǎn)樣器移動(dòng)回樣品槽中。
3、2.3.1刀鋒放置使用100人份/盒的試劑：刀鋒放置在自動(dòng)點(diǎn)樣器上所標(biāo)識(shí)的2，A，9，13，16號(hào)位置上。使用60、30、18人份/盒的試劑：刀鋒放置在自動(dòng)點(diǎn)樣器上所標(biāo)識(shí)的2，8，14號(hào)位置上。將刀鋒加重塊放在刀鋒上面，每個(gè)刀鋒上面放一個(gè)。2.3.2放置凝膠片取1.0ML界面液置到電泳槽中，注意避免產(chǎn)生氣泡。將凝膠片從保護(hù)包裝中取出，揭掉凝膠片上的保護(hù)膜，放到電泳槽中，放置時(shí)，凝膠片下面不能有氣泡。小心的用BlotterC吸水紙吸干多余的緩沖液，用吸水紙將凝膠片和電極周圍多余的界面液擦除。2.3.3將
4、兩個(gè)碳電極棒分別放于凝膠片外側(cè)的鹽橋上，使碳棒的兩極緊靠有磁性的電極。關(guān)上電泳倉(cāng)蓋按下Start/stop鍵啟動(dòng)程序，電泳顯示屏上顯示：LOADSAMPLE1(START)RUN(CONTINUE)NEXTOPERATION2.3.4一般情況下,按“START”鍵電泳儀將開(kāi)始自動(dòng)蘸樣、點(diǎn)樣、電泳和烘干凝膠片。但如果要從其他步驟開(kāi)始操作,就要按TESESELECT/CONTINUE鍵直到你需要的操作程序出現(xiàn),再按START/STOP鍵。蘸樣和點(diǎn)樣時(shí)，可打開(kāi)電泳倉(cāng)蓋觀察刀鋒蘸樣和點(diǎn)樣的位置,如不正確，按“
5、start/stop”停止操作，仔細(xì)檢查刀鋒放置位置是否正確，樣品盤(pán)上的加樣槽是否插緊,檢查完畢,再按START/STOP鍵,儀器開(kāi)始運(yùn)行。2.3.5烘干程序結(jié)束后，儀器將自動(dòng)報(bào)警，電泳顯示屏上顯示：FINISHEDPRESS（ＣＯＮＴＩＮＵＥ）TOCONTINUE，按“CONTINUE”鍵結(jié)束程序。打開(kāi)電泳倉(cāng)蓋，根據(jù)電泳顯示屏上提示：“TOMOVEAPLLICATORLEFTPRESS（START）TOMOVEAPLLICATORRIGHTPRESS（CONTINUE）”2.3.6按TEST/CON
6、TINUE鍵自動(dòng)點(diǎn)樣器將移動(dòng)到最右端，可以取出樣品盤(pán)洗凈，以備下次實(shí)驗(yàn)使用。2.3.7染色、脫色將烘干的凝膠片從電泳槽中取出，用鹽橋去除器鏟除凝膠片上的鹽橋。再將凝膠片上的圓孔掛在支架的左邊，將凝膠片的橢圓孔掛在支架的右邊。放入染色槽中。按下Start/stop鍵啟動(dòng)程序，染色顯示屏上顯示：SERUMPROTEINDRAWINGPUMP10秒后，顯示：STAIN1(START)RUN(CONTINUE)NEXTOPERATTION一般情況下，按“START”電泳儀將開(kāi)始自動(dòng)染色、脫色和烘干凝膠。但如果
7、要從其他步驟開(kāi)始操作，就要按TESTSELECT/CONTINUE鍵直到你需要的操作程序出現(xiàn)，再按START/STOP鍵。烘干程序結(jié)束后，儀器自動(dòng)報(bào)警，染色顯示屏上顯示：FINISHEDPLATEOUT,GELHOLDERIN,PRESS（ＣＯＮＴＩＮＵＥ）按“CONTINUE”鍵結(jié)束程序.將染色支架從染色槽中取出，把凝膠片從染色支架上取下來(lái)，再把染色支架放回儀器。2.3.8掃描打印結(jié)果3.臨床意義3.1正常血清蛋白電泳分析正常血清經(jīng)電泳后可分為Alb、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白及γ-球蛋
8、白五個(gè)區(qū)帶，β包括β1和β2，β2主要是C3成分。3.2急性感染患者血清蛋白電泳分析急性感染患者血清蛋白電泳主要特征是Alb明顯降低，α2-球蛋白增加，TP、α1、β、γ-球蛋白基本正常。3.3肝硬化患者血清蛋白電泳分析肝硬化患者血清蛋白電泳主要特征是TP、Alb降低，γ-球蛋白明顯增加，使得β和γ球蛋白連接在一起不易分開(kāi)，可出現(xiàn)β—γ橋，即肝硬化血清蛋白電泳圖譜的特征。3.4多發(fā)性骨髓瘤（單克隆免疫球蛋白血癥）患者血清蛋白分析患者血清和尿液中可出現(xiàn)結(jié)構(gòu)
