肺結(jié)核痰涂片檢查工作規(guī)范

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1、肺結(jié)核痰涂片檢查工作規(guī)范　--------------------------------------------------------------------------------痰涂片檢查是肺結(jié)核病人診斷與鑒別診斷、制定化療方案、療效考核的主要方法或手段。為貫徹落實(shí)市衛(wèi)生局《關(guān)于在全市一級以上醫(yī)療單位中開展傳染性肺結(jié)核篩查工作的通知》的精神，加強(qiáng)傳染性肺結(jié)核病人發(fā)現(xiàn)力度，特制定本規(guī)范。一、痰檢的對象和要求（一）對象1．咳嗽、咳痰≥3周或有咯血或血痰癥狀以及胸片異常者。2．進(jìn)行療效考核的病人：凡已確診、登記、治療的肺結(jié)核病人，在化療期間應(yīng)按規(guī)定定期作痰菌復(fù)查。1）初治涂陽病人

2、（含重癥涂陰病人）在療程滿2、5、6個月時，復(fù)治涂陽病人在療程滿2、5、8個月時，各查痰一次。2）初、復(fù)治涂陽病人在療程滿2個月時，痰菌仍為陽性者，應(yīng)在治療滿3個月時增加查痰一次。3）確診、登記的涂陰肺結(jié)核病人，即使病人因故未接受治療，也應(yīng)在登記后滿2和6個月時進(jìn)行痰菌檢查。（二）要求1．初診病人應(yīng)送3份痰標(biāo)本（夜間痰、清晨痰和即時痰）。如無夜間痰，在留清晨痰后2～3小時再留取一份痰標(biāo)本；或在送痰時，留取兩份即時痰。治療中或復(fù)診隨訪病人按期每次送檢兩份痰（清晨痰和夜間痰）。2．痰標(biāo)本采集：即時痰為病人就診時咳出的痰液。清晨痰為清晨深咳出的痰液。夜間痰為就診前一天晚睡前咳出的痰液。痰

3、標(biāo)本應(yīng)以膿樣、干酪樣或膿性粘液樣性質(zhì)的痰液為合格標(biāo)本，痰量應(yīng)為3～5毫升。應(yīng)由檢驗(yàn)人員或?qū)Ｈ蓑?yàn)收痰標(biāo)本，痰液不合格者，要求重新送檢。難以獲得合格標(biāo)本時，也應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查，但應(yīng)注明標(biāo)本性狀以供分析結(jié)果時參考。痰標(biāo)本的容器，應(yīng)采用國家參比實(shí)驗(yàn)室推薦的國際通用痰瓶或采用直徑4厘米、高2厘米的塑料或涂蠟紙密閉盒。留痰容器上應(yīng)注明病人姓名、編號（門診序號或病人登記號）及日期。43．痰標(biāo)本的保存和輸送：痰標(biāo)本容器密封，勿倒置，嚴(yán)防痰液外溢。不能立即作涂片檢查的痰標(biāo)本，須置4℃冰箱保存，防止痰液干涸或污染。需送上一級細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的痰標(biāo)本，外送前應(yīng)認(rèn)真核對痰標(biāo)本容器上標(biāo)注，是否正確和清晰，是否

4、與化驗(yàn)單一致。痰容器應(yīng)采用專用的結(jié)核桿菌和痰標(biāo)本冰盒運(yùn)送，或以紙張和塑料袋封裝、扎牢順序放置于包裝袋內(nèi)。盒外注明勿倒置標(biāo)志。4．送檢時，縣（市、區(qū)）結(jié)防所（科）醫(yī)師應(yīng)填寫檢驗(yàn)單。填寫項(xiàng)目包括：病人姓名、地址、登記號（或門診序號）、送檢日期（或初診日期）、送檢原因（初診病人或隨訪病人）。檢驗(yàn)單應(yīng)與痰標(biāo)本分別放置在不同容器中，一齊送交上級實(shí)驗(yàn)室。5．收到痰標(biāo)本后，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員仔細(xì)核對標(biāo)本和檢驗(yàn)單各項(xiàng)內(nèi)容，查看痰標(biāo)本是否合格。隨后按順序編號，及時檢查和登記。6．廢棄標(biāo)本和污染物的處理：1）痰盒和廢棄標(biāo)本等污染物，均須經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能丟棄或清洗，嚴(yán)禁不經(jīng)滅菌隨意處理。2）痰盒等污染物

5、如采用焚燒處理，須置于焚燒爐內(nèi)徹底焚化。焚化不徹底，或暴露焚燒是有害的。3）痰檢工作臺面的消毒：可將痰標(biāo)本置于一搪瓷盤中，在操作廚中進(jìn)行痰涂片操作。涂片操作完成后，將盤與廢棄物等一并進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，或與操作臺面同時以3％石碳酸或其它可靠的消毒液擦拭后，再以紫外線滅菌燈（距離1米）照射30分鐘。二、痰直接涂片檢查法（一）涂片取經(jīng)95％乙醇擦拭脫脂過的干燥、清潔、無油污、無劃痕的新玻璃片，于玻片背面的左端1／3處以藍(lán)色或黑色記號筆（玻璃鉛筆）編號。用接種環(huán)或折斷的竹簽茬端，挑取痰標(biāo)本的膿樣、干酪樣部分約0．05～0．1ml，于玻片正面的右側(cè)三分之二處均勻涂抹成2×2．5厘米卵圓形痰膜

6、。自然干燥后待檢。一張玻片只可涂抹一份標(biāo)本。玻片只應(yīng)使用一次，不得清洗后再次使用。（二）萋爾—尼爾遜氏染色法（Ziehl—Neelsen）簡稱萋尼氏染色法：1．試劑：41）堿性復(fù)紅乙醇染色儲存液：堿性復(fù)紅液：8克堿性復(fù)紅溶于95％乙醇100毫升中。5％石碳酸水溶液：5克石碳酸溶于100毫升蒸餾水中。2）堿性復(fù)紅乙醇染色液：10毫升堿性復(fù)紅儲存液與90毫升5％石碳酸水溶液混合。3）5％鹽酸乙醇脫色液：5毫升濃鹽酸與95毫升95％乙醇混合。4）0。3％亞甲蘭復(fù)染儲存液：0．3克亞甲蘭溶于50毫升95％乙醇中，完全溶解后加蒸餾水至終體積100毫升。5）亞甲蘭復(fù)染液：以蒸餾水10倍稀釋0．

7、3％亞甲蘭復(fù)染儲存液即得亞甲蘭復(fù)染液。2．染色步驟：1）火焰固定涂片。2）滴加堿性復(fù)紅乙醇染色液，蓋滿痰膜。小心火焰加熱至出現(xiàn)蒸汽后，脫離火焰，保持染色三分鐘。染色期間應(yīng)始終保持痰膜被染色液覆蓋，必要時可續(xù)加染色液。切勿使染色液沸騰。3）流水自玻片背面上端輕洗，洗清染色液。4）自痰膜上端外緣滴加脫色液，流過痰膜。需脫至痰膜無可視紅色為止。脫色應(yīng)單片進(jìn)行。5）流水自玻片背面上端輕洗，去脫色液。6）滴加亞甲蘭復(fù)染液，染色30秒鐘。7）流水自玻片背面上端輕洗，去復(fù)染液。8）