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1、不同基本培養(yǎng)基及激素對(duì)秈稻成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)影響摘要:以川香29B、中9B、金23B和Ⅱ-32B4種秈稻的成熟胚為外植體,研究MS、N6、NB和NMB4種基本培養(yǎng)基,2,4-D與KT或6-BA聯(lián)合使用對(duì)秈稻愈傷組織誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明,4種秈稻在NMB基本培養(yǎng)基中愈傷組織的誘導(dǎo)率最高,平均誘導(dǎo)率為77.00%~96.00%,其中在NMB中的誘導(dǎo)效果最好,在4種不同基本培養(yǎng)基中愈傷組織總平均誘導(dǎo)率的高低順序依次為川香29B、中9B、Ⅱ-32B、金23B。當(dāng)3.0mg/L2,4-D與不同濃度的KT或6-BA聯(lián)合使用時(shí),KT濃度為0.1mg/L時(shí),川香29B和中9B愈傷組織誘導(dǎo)率高;對(duì)于Ⅱ-32
2、B,KT濃度為0.6mg/L愈傷組織誘導(dǎo)率較高;6-BA濃度為0.4mg/L時(shí),川香29B愈傷組織誘導(dǎo)率最高;對(duì)于中9B和Ⅱ-32B,添加0.1mg/L的6-BA最有利于愈傷組織的誘導(dǎo);而對(duì)于金23B,無(wú)論是添加KT或6-BA都會(huì)抑制愈傷組織的誘導(dǎo)。關(guān)鍵詞:秈稻;愈傷組織誘導(dǎo);培養(yǎng)基;激素中圖分類號(hào):S511.2+1;Q813.1+2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A5文章編號(hào):0439-8114(2012)18-4121-04EffectsofDifferentBasalMediumandPhytokininonCallusInductionofIndicaRiceMatureEmbryosLIAOPeng
3、-fei1,2,ZHAOJun-xing1,LEIFa-yang1,YUChao1,2,LIShao-bo2(1.TeachingCenterforExperimentalBiology/SchoolofLifeScienceandFoodEngineering,NanchangUniversity,Nanchang330031,China;2.KeyLaboratoryofMolecularBiologyandGeneEngineeringinJiangxiProvince,NanchangUniversity,Nanchang330031,China)Abstract:Effectso
4、ffourbasalmedium(MS,N6,NBandNMB)andtwokindsofphytokinin(KT,6-BA)oncallusinductionfrommatureembryosoffourindicaricevarieties(Chuanxiang29B,Zhong9B,Jin23B,Ⅱ-32B)wereinvestigated.The5resultsshowedthatthemostefficientbasalmediumwasNMBastheaveragecallusinductionratesrangedfrom77.00%to96.00%.Theorderofa
5、verageratefromhightolowwasChuanxiang29B,Zhong9B,Ⅱ-32B,Jin23B.When3mg/L2,4-Dwasappliedwith0.1mg/LKTor0.4mg/L6-BA,theinductionrateofChuangxiang29Bwasthehighest.ForZhong9B,thecombinationof3mg/L2,4-Dwith0.1mg/LKTor0.1mg/L6-BAwasoptimum.ForⅡ-32B,thecombinationof3mg/L2,4-Dwith0.6mg/LKTor0.1mg/L6-BAwasop
6、timum.However,thecallusformationofJin23Bwouldbeinhibitedbyaddingeither6-BAorKT.Keywords:indicarice;5callusinduction;basalmedium;phytokinin農(nóng)桿菌介導(dǎo)的高效遺傳轉(zhuǎn)化體系已經(jīng)在水稻外源基因轉(zhuǎn)化中取得了很大的成功[1-3],利用該技術(shù)不僅可以把感興趣的基因?qū)氲剿净蚪M中,進(jìn)而培育優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、多抗的水稻新品種[4,5],而且也為水稻基因功能研究提供重要手段,如通過T-DNA插入構(gòu)建突變體庫(kù)、基因打靶等[6,7]。水稻胚性愈傷組織是農(nóng)桿菌介導(dǎo)外源基因進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)
7、化的良好受體,因此水稻愈傷組織的形成和狀態(tài)是直接影響著水稻遺傳轉(zhuǎn)化效率的重要因素。秈稻和粳稻是栽培稻的兩個(gè)主要亞種,粳稻的組織培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成熟,愈傷組織誘導(dǎo)容易,誘導(dǎo)出來(lái)的愈傷組織是胚性愈傷組織,生長(zhǎng)速度快,再生率高,并且許多粳稻品種已建立了基于愈傷組織的重復(fù)性好、轉(zhuǎn)化頻率高的遺傳轉(zhuǎn)化體系[8,9]。而栽培面積占全球水稻80%的秈稻卻具有不良的組織培養(yǎng)特性,其誘導(dǎo)率和再生率都比粳稻低得多,后續(xù)繼代過程中容易褐化,且不同品