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《酶解棕櫚粕制備甘露寡糖及其組分的結(jié)構(gòu)確定》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、酶解棕櫚粕制備甘露寡糖及其組分的結(jié)構(gòu)確定摘要:以棕櫚粕為底物,用中性B-甘露聚糖酶降解得到甘露寡糖粗品,并對其采用紙層析法分離純化其中的各組分,最終得到甘露二糖、甘露三糖和甘露四糖三種寡糖組分。通過氣相色譜(GC)檢測可知,這三種寡糖中只含有甘露糖和葡萄糖,且甘露糖和葡萄糖的比例依次為119B1、318B1和318B1。采用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)測定分離得到的三種寡糖的結(jié)構(gòu)。關(guān)鍵詞:棕櫚粕,甘露寡糖,制備,結(jié)構(gòu)Studyonmanna-oligosaccharidespreparedfrompamlmealbyenz
2、ymeandthedeterminationoftheirstructuresAbstrac:tThesampleofmanno-oligosaccharides(MOS)waspreparedfrompamlmealbyneutralB-mannanase1Thecomponentsofmanno-oligosaccharideswereseparatedandpurifiedbypaperchromatography,andthreedifferentdegreeofpolymerization(DP)ofoligosaccharideswereob
3、tained:mannobiose,mannotrioseandmannotetraose1Thestructuresofthemweredeterminedbymatrix-assistedlaserdesorption/ionization-tmie-of-flightmassspectrometry(MALDI-TOFMS)andgaschromatography(GC)1TheresultsofGCshowedthattheywereallcomposedofmannoseandglucose,andtheratioofmannoseandglu
4、cosewere119B1,318B1and318B1,respectively1WhiletheresultsofMSshowedthatthethreeoligosaccharidesDPwereDP2,DP3andDP4,respectively1Keywords:pamlmea;lmanna-oligosaccharides;preparation;structure棕櫚粕是棕櫚的果實和種子榨油后所產(chǎn)生的餅粕,主要用作反芻動物的飼料。甘露聚糖是棕櫚粕的重要組成成分之一,其含量達36%[1],是除酵母細胞壁以外制備甘露寡糖的最佳原料。甘露寡糖屬于功
5、能性低聚糖,具有一定的免疫原性,能刺激機體免疫應答,增強動物體的細胞和體液免疫反應。Kazuto[2]等人通過小鼠實驗發(fā)現(xiàn)甘露寡糖可明顯降低白細胞介素-10的產(chǎn)生,并能抑制血清中特異性卵清蛋白IgE,從而起到抑制過敏癥狀的作用。甘露寡糖還能促進有益菌增殖,改善腸道微生態(tài),提高機體免疫力。Ichiro[3]等人通過體外實驗發(fā)現(xiàn),甘露寡糖在人體消化系統(tǒng)中是無法被消化的,而是被大腸中的微生物轉(zhuǎn)化為以乙酸、丙酸和丁酸為主的短鏈脂肪酸,而這些脂肪酸被認為是可以改善腸道微生物85環(huán)境,還可被腸道微生物吸收利用以作能量來源。此外,一些研究還表明甘露寡糖具有抗氧化、降血
6、糖、降血脂及抗腫瘤的作用。王芳[4]等通過體外實驗證明甘露寡糖可以有效地清除羥自由基(#OH),給小鼠適量添加甘露寡糖有助于提高肝臟組織的抗氧化能力,保護肝臟免受各種氧化應激和損傷。Izumi[5]等人給小鼠飼喂含1%的甘露寡糖和不含甘露寡糖的高脂食物,通過對照發(fā)現(xiàn),12周后發(fā)現(xiàn)飼喂含有甘露寡糖食物的小鼠的脂肪百分含量和肝臟中甘油三酸脂水平明顯低于對照組,血清中的甘油三酸脂水平也有降低趨勢,而排泄物中的甘油三酸脂水平則有明顯增加,從而說明甘露寡糖可以有效抑制脂肪的積累和大腸對高脂食品中脂肪的吸收。本文以棕櫚粕為底物,采用中性B-甘露聚糖酶酶解,紙層析法分
7、離純化,以及氣相色譜和質(zhì)譜測定組分組成及結(jié)構(gòu),從而實現(xiàn)甘露寡糖的制備、分離純化和化學結(jié)構(gòu)測定研究,進而摸索出利用棕櫚粕制備甘露寡糖單一組分的條件和方法。1材料與方法111材料與儀器棕櫚粕馬來西亞;中性B-甘露聚糖酶酶活20萬U/g,北京博仕奧生物技術(shù)有限公司;層析用紙板20cm@20cm,Whatman,英國;甘露糖分析純,國藥集團化學試劑有限公司;葡萄糖含量9915%,Sigma公司;甘露寡糖標準品含量98%,聚合度DP2~5,本實驗室自制;對氨基苯甲醚鹽酸鹽含量99%,百靈威公司;其它試劑均為國產(chǎn)分析純。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE-3000,上海亞榮生化儀器
8、廠;AXIMACFR型基質(zhì)輔助激光解析電離質(zhì)譜儀、島津GC2010氣相色譜儀日本
