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《血液制品去除滅活病毒技術(shù)方法及驗證指導(dǎo)原則》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、血液制品去除/滅活病毒技術(shù)方法及驗證指導(dǎo)原則目前已知經(jīng)血液制品傳染的病毒主要有HBV、HCV、HIV-1、HIV-2、HTLV和細小病毒B19。尚未發(fā)現(xiàn)經(jīng)血液制品傳染CJD。但有少數(shù)研究報告發(fā)現(xiàn)有實驗性傳染現(xiàn)象，因此要密切關(guān)注CJD，特別是vCJD的發(fā)展動向。??為了提高血液制品安全性，生產(chǎn)工藝要具有一定的去除/滅活部分病毒能力，生產(chǎn)過程中應(yīng)有特定的去除/滅活病毒方法。本技術(shù)指導(dǎo)原則是對血液制品（指以人血漿為原料制備的制品）生產(chǎn)過程以及特定的去除/滅活病毒方法驗證的指導(dǎo)原則，包括指示病毒和病毒去除/滅活方法
2、的選擇、驗證方案的設(shè)計、結(jié)果判定以及附錄所列技術(shù)驗證申報的程序。??一、去除/滅活病毒方法的選擇??由于不同類血液制品潛在的污染病毒的可能性不同，為此選擇病毒去除/滅活方法的側(cè)重點也應(yīng)有所不同：??（一）凝血因子類制品??生產(chǎn)過程中應(yīng)有特定的能去除/滅活脂包膜和非脂包膜病毒的方法，可采用一種或多種方法聯(lián)合去除/滅活病毒。??（二）免疫球蛋白類制品??對于免疫球蛋白類制品（包括靜脈注射用人免疫球蛋白、人免疫球蛋白和特異性人免疫球蛋白）生產(chǎn)過程中應(yīng)有特定的滅活脂包膜病毒方法。但從進一步提高這類制品安全性考慮，提
3、倡生產(chǎn)過程中加入特定的針對非脂包膜病毒的去除/滅活方法。??（三）白蛋白??采用低溫乙醇生產(chǎn)工藝和特定的去除/滅活病毒方法，如巴斯德消毒法等。??二、常用的去除/滅活病毒方法評價??（一）巴斯德消毒法（巴氏消毒法）??1．人血白蛋白制品??幾十年臨床應(yīng)用結(jié)果表明，白蛋白的巴氏消毒法對HIV和肝炎病毒是安全的。其病毒滅活條件已很完善，可不要求進行病毒滅活驗證。但是必須對巴氏消毒法所用設(shè)施進行驗證，使巴氏消毒各參數(shù)符合要求（包括制品內(nèi)溫度分布的均一性和滅活時間）。??2．其它血液制品（液體制劑）??由于制品的組
4、成、穩(wěn)定劑（如：氨基酸、糖、枸櫞酸鹽等）及其濃度的不同，均會對滅活病毒效果有一定的影響。因此在采用巴氏消毒滅活病毒方法時必須進行病毒滅活效果驗證。??（二）干熱法（凍干制品）??80℃加熱72小時，可以滅活HBV、HCV、HIV和AV等病毒。但應(yīng)考慮制品的水分含量、制品組成（如：蛋白質(zhì)、糖、鹽和氨基酸）對病毒滅活效果的影響。應(yīng)確定允許的制品瓶間各參數(shù)的差異。病毒滅活用的干熱箱至少每半年驗證一次。驗證時干燥箱內(nèi)應(yīng)設(shè)多個測溫點（包括制品內(nèi)、箱內(nèi)最高和最低溫度點）。??（三）有機溶劑/去污劑（S/D）處理法??有
5、機溶劑，如：磷酸三丁脂（TNBP）和非離子化的去污劑，如：ritonX-100或吐溫-80結(jié)合可以滅活脂包膜病毒，但對非脂包膜病毒無效。常用的滅活條件是0.3%TNBP和1%吐溫-80，在24℃處理至少6小時；0.3%TNBP和1%ritonX-100，在24℃處理至少4小時。S/D處理前應(yīng)先用1μm濾器除去蛋白溶液中可能存在的顆粒（顆?？赡懿啬洳《緩亩绊懖《緶缁钚Ч＜尤隨/D后應(yīng)確保是均一的混合物。在滅活病毒全過程中應(yīng)將溫度控制在規(guī)定的范圍內(nèi)。如果在加入S/D后過濾，則須檢測過濾后S/D的濃度是否發(fā)
6、生變化，如有變化應(yīng)進行適當(dāng)調(diào)整。吐溫-80應(yīng)采用植物源性，并應(yīng)采用稱量法量取。??（四）膜過濾法??膜過濾技術(shù)只有在濾膜的孔徑比病毒有效直徑小時才能有效除去病毒。該方法不能單獨使用，應(yīng)與其它方法聯(lián)合使用。??驗證研究時應(yīng)考慮蛋白溶液的濃度、濾速、壓力和過濾量等重要參數(shù)。在過濾前及過濾后應(yīng)測試濾膜的完整性。??（五）低pH孵放法??研究表明，免疫球蛋白生產(chǎn)工藝中的低pH（如pH=4）處理（有時加胃酶）能滅活幾種脂包膜病毒。滅活條件（如：pH值、孵放時間和溫度、胃酶含量、蛋白質(zhì)濃度、溶質(zhì)含量等因素）可能影響病毒
7、滅活效果，驗證試驗應(yīng)該研究這些參數(shù)允許變化的幅度。??三、特定的去除/滅活病毒方法驗證??（一）指示病毒的選擇??首先，應(yīng)該選擇經(jīng)血液傳播的相關(guān)病毒（如：HIV），不能用相關(guān)病毒的，要選擇與其理化性質(zhì)盡可能相似的指示病毒；第二，所選擇的病毒理化性質(zhì)應(yīng)有代表性（病毒大小、核酸類型以及有無包膜），其中至少應(yīng)包括一種對物理和/或化學(xué)處理有明顯抗性的病毒。在進行去除/滅活病毒驗證時，應(yīng)根據(jù)制品的特性及所采用的病毒去除/滅活工藝，參照下表列舉的病毒選擇適宜的指示病毒。所選擇的指示病毒至少應(yīng)包括HIV-1、HBV和HC
8、V模擬病毒以及非脂包膜病毒。水皰性口炎病毒（VSV）耐受的p范圍比較廣，驗證低p孵放法滅活病毒效果時可選用此指示病毒。經(jīng)血液傳播疾病的相關(guān)病毒及驗證可選用的指示病毒（舉例）病毒????基因組????脂包膜????大?。╪m）????指示病毒舉例HIV????RNA????有????80-100????HBV????DNA????有????45????鴨乙型肝炎病毒、偽狂犬病毒HCV????RNA????有????
