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1、酸棗葉片再生和阜平大棗無(wú)芽莖段再生不定芽研究河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文酸棗葉片再生和阜平大棗無(wú)芽莖段再生不定芽的研究姓名:周小麗申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):干果種質(zhì)資源與分子輔助育種指導(dǎo)教師:彭建營(yíng)2009-06-10摘要本研究以酸棗試管苗葉片、阜平大棗無(wú)芽莖段為試材,對(duì)影響葉片離體再生不定芽的因素如基本培養(yǎng)基成分、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類及濃度配比、接種材料類型、培養(yǎng)方式以及培養(yǎng)條件等進(jìn)行了系統(tǒng)研究,成功建立了酸棗的離體葉片再生體系;還研究了在MS基本培養(yǎng)基中,滅菌時(shí)間、暗培養(yǎng)時(shí)間以及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)阜平大棗無(wú)芽莖段再生不定芽的影響。主要研究結(jié)果如下:1.獲
2、得高效的酸棗葉片再生體系:(1)通過(guò)對(duì)不同培養(yǎng)基的篩選,確定MS或WPM是適合酸棗離體葉片再生的基本培養(yǎng)基。碳源為30g/L的蔗糖。(2)不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)葉片再生影響很大。研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞分裂素6-BA和TDZ都可以誘導(dǎo)酸棗葉片再生不定芽,但6-BA誘導(dǎo)的再生率非常低,故誘導(dǎo)酸棗葉片再生的細(xì)胞分裂素宜選用TDZ,濃度為0.5mg/L;低濃度的生長(zhǎng)素可以誘導(dǎo)葉片再生不定芽,誘導(dǎo)酸棗離體葉片再生不定芽的生長(zhǎng)素為IBA0.10mg/L。(3)通過(guò)研究發(fā)現(xiàn),繼代10~15代、葉齡30~40d的葉片再生效果較好,再生植株和繼代植株的葉片再生效果無(wú)顯著性
3、差異。(4)通過(guò)對(duì)光周期的研究發(fā)現(xiàn),暗培養(yǎng)對(duì)葉片再生不定芽是必要的,經(jīng)過(guò)暗培養(yǎng)處理可顯著提高葉片再生率,隨著每天光照時(shí)間的增長(zhǎng),再生率有所下降,光照時(shí)間越長(zhǎng),愈傷組織增長(zhǎng)的越多。(5)通過(guò)在培養(yǎng)基中附加一定濃度的AgNO、胰蛋白胨、蛋白胨,發(fā)現(xiàn)附加31~2mg/LAgNO、500~1000mg/L胰蛋白胨對(duì)提高葉片不定芽的再生率有利,蛋白胨3不能促進(jìn)酸棗葉片再生。(6)本試驗(yàn)采用兩步培養(yǎng)法,首先將葉片接種在分化培養(yǎng)基上,暗培養(yǎng)21天,然后轉(zhuǎn)到MS基本培養(yǎng)基上誘導(dǎo)不定芽再生,此方法中葉片不容易變褐,不定芽伸長(zhǎng)較快,且不容易玻璃化,再生率比一步培養(yǎng)
4、法顯著提高。2.MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L+GA0.1mg/L是適合酸棗再生植株伸長(zhǎng)的培3養(yǎng)基。3.MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L是適合酸棗再生植株增殖的培養(yǎng)基。4.1/2MS+IBA1.0mg/L+NAA0.3mg/L是再生植株生根的培養(yǎng)基,暗培養(yǎng)5d,生長(zhǎng)素作用10d后轉(zhuǎn)入不含生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基中,再生率為98.85%。5.MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L是適合阜平大棗無(wú)芽莖段再生不定芽的培養(yǎng)基。關(guān)鍵詞:酸棗葉片;離體培養(yǎng);阜平大棗;無(wú)芽莖段;不定芽StudiesontheRegen
5、erationSystemfromSourJujubeLeavesandAdventitiousBudRegenerationfromVitroNon-budStemofZiziphusjujubaMill.‘Fupingdazao’Mastercandidate:ZhouXiaoliSupervisor:PengJianyingMajor:Pomology(CollegeofHorticulture,AgriculturalUniversityofHeibei,Baoding,China071001)AbstractInthisstudy,i
6、nvitrosourjujubeleafmaterialandnon-budstemofZiziphusjujubaMill.‘Fupingdazao’forthetest,theimpactofleavesinvitroadventitiousshootregenerationoffactorssuchasmediumcomposition,growthregulatortypeandconcentrationratio,thetypeofinoculationmaterialsandtrainingmethods,suchasculture
7、conditions,aswellasasystematicstudysuccessfullyestablishedinvitrosourjujubeleafregenerationsystem.Andthefactorsaffectingadventitiousbudregenerationinvitronon-budstemofZiziphusjujubaMill.‘Fupingdazao’inMSmediawerestudied,whichincludedsterilizationtime,darkincubationtimeandpla
8、ntgrowthregulatorThemainresultswereasfollowed:1.Gainingahigheffcientregener
