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1、河北果樹HEBEIFRUITS2014(5)草莓葉柄再生不定芽的研究王叢聰，劉思瑤(河北省石家莊市林業(yè)局050051)摘要：試驗采用Hinonine、Tudla、豐香、全明星、明星花5個品種，比較不同品種葉柄再生的差異。11個植物生長調節(jié)劑組合，篩選出適合葉柄再生不定芽的最佳培養(yǎng)基配方，并對葉柄上、中、下不同部位的誘導率進行比較。試驗結果表明：葉柄下部的誘導率比較高。Tudla這個品種葉柄再生性相對較高。對某一特定品種來說，外植體基因型和外源激素種類及其合適濃度是決定再生的主要因子關鍵詞：草莓；葉柄；不定芽；再生中圖分類號：S668．4文獻
2、標識碼：A文章編號：1006-9402(2o14)05-0007-02草莓(FragariaananassaDuch)是薔薇科(Rosaceae)30d的組培苗，葉柄切成5mm的小段。草莓屬(Fragaria)多年生草本果樹。利用現(xiàn)代生物技1．2培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件用MS無機鹽、B5維生素、術可對草莓進行定向遺傳改良，可建立高效、穩(wěn)定的蔗糖30mg·L和瓊脂7．0g·L一，加不同組合的植物離體再生體系?。自l990年以來，關于草莓遺傳轉化生長調節(jié)~IJ(PGR)，調節(jié)pH值至5．8，分裝到100mL的研究，國內外已陸續(xù)有了一些文獻報道，草莓成為
3、的無菌廣口瓶中在l21℃條件下滅菌20min，每瓶裝繼核桃、蘋果之后第3個獲得轉基因植株的果樹幢。30-40mL制成草莓葉柄的再生培養(yǎng)基。接種葉柄后，草莓的葉片和葉柄以兩種方式形成再生芽，一部暗培養(yǎng)4d，然后轉到16／8h光暗條件下培養(yǎng)，溫度為分是由愈傷組織形成層細胞局部快速分裂形成的，一25士2℃，每兩周更換一次培養(yǎng)基。當草莓芽苗長至部分不經(jīng)過愈傷組織直接經(jīng)表皮細胞脫分化形成的。l-2cm時，置MS培養(yǎng)基上延長生長與生根約4周柯善強等B以Alkotar幼嫩的葉片為材料離體培養(yǎng)，發(fā)后，開瓶煉苗1周，洗凈根部的瓊脂，移入裝有花卉營現(xiàn)MS+BA
4、1．5-2．5mg．L+NAA0．1mg．L。的培養(yǎng)養(yǎng)土的小盆，置溫室內，用塑料薄膜覆蓋保濕1周?；峡梢灾苯诱T導不定芽，同樣可繼代培養(yǎng)叢生芽。1．3植物生長調節(jié)劑的組合植物生長調節(jié)劑分別宋國慶等H’對紅豐草莓葉盤進行不定芽誘導發(fā)現(xiàn)MS+設定BAO．5、1．0、1．5、2．0、3．0mg·L。。，IBAO．25、0．5、BA1．0mg·L-I+IAA2．0mg·L上的葉盤成芽率最高，1．0、2．0mg·。可達到7’。／?！疘BA1．薹+曼‘?．‘‘：二2結果與分析．0mg．L上的再生頻率為5O．3％，在MS培一一??養(yǎng)基上再生苗生根效果好。
5、張志宏等I’通過“弗吉尼2．1外植體基因型對芽分化的影響相同分化培養(yǎng)亞，，等品種的葉片再生研究，現(xiàn)TDZ與生長素類物基上不同基因型草莓外植體再生情況見表l。所用的質配合使用對葉片的再生效果明顯優(yōu)于6一BA。孫瑞5個品種均在芽分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)1-2d后傷I：I出現(xiàn)芳等研究表明，草莓的基因型不同再生能力不同，星黑色，7d左右均能在傷1=1處形成可見愈傷組織，Tudla都一號的葉柄再生不定芽能力最強，全明星的葉片及愈傷率達到10o％，豐香、全明星、明星花、Hinonine愈葉柄再生不定芽的能力都比較強。葉柄取3～5mm長傷率達到80％以上。全明星
6、常形成粉紅色愈傷組織，為宜，不定芽多從葉柄周緣愈傷組織處形成，少數(shù)可豐香愈傷形態(tài)較小并且多呈黑色，Hinonine、明星花愈從切口邊緣直接再生。本研究以國內主栽草莓品種傷組織形態(tài)較小，全明星和Tudla愈傷組織致密而且為研究對象，對影響草莓葉片、葉柄再生的主要組培綠。葉柄接種后2周左右，葉柄兩端傷口處可見綠色因素進行了研究，為草莓遺傳轉化奠定基礎。愈傷組織，4周左右愈傷組織中開始分化出小芽，6周材料與方法蕁蔫姜1．1試驗材料試驗用Hinonine、Tudla、豐香、全明3～5個，每個再生葉柄形成芽的數(shù)目則隨時間的推移星、明星花5個品種的組培
7、苗，用MS+BA0．5mg·L。。+增長加快。IBA0．1mg·L。’和MS+BA0．8mg·L-J+IBA0．1mg·L。?！髟鲋撑囵B(yǎng)基。葉片和葉柄取自在MS培養(yǎng)基生長收稿日期：2014-06-05／河北果樹HEBEIFRUITS2014(5)表l相同分化培養(yǎng)基上不同基因型草莓外植體再生情況MS+BA1．5mg·L。+IBA1．0mg·L中，上、中、下部位的出芽率可達到30％，在MS+BA1．5mg·L。+IBA0．5mg．L中再生效果也比較好，平均出芽率均能達到1．10?？偟膩碚f，Tudla的出芽情況在5個品種中是最好的，培養(yǎng)30d
8、左右葉柄愈傷形態(tài)最大，顏色深綠色。明星花在MS+BA1．5mg·L一+IBA0,25mg·L注：每個處理3個重復，每個重復含有10個外植體中，葉柄下部出芽率達到25％，在MS+B
