資源描述：
《WST341-2011血紅蛋白測定參考方法.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、ICs11.020C50中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準Ws/T341-ˉ2011血紅蛋白測定參考方法ReferenceⅡnethodforhaemoglobinometryinhumanblood2011-09-3o發(fā)布2012-04-015安方氈一中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布Ws/T341-ˉ2011目刂舀本標準按照GB/T1.1-⒛09給出的規(guī)則起草。本標準由衛(wèi)生部臨床檢驗標準專業(yè)委員會提出。本標準主要起草單位:衛(wèi)生部臨床檢驗中心。本標準主要起草人:彭明婷、谷小林、李臣賓、施麗飛、陸紅、申子瑜。標準分享網(wǎng)www.bzfxw.com免費下載Ws/T341-ˉ2011血
2、紅蛋白測定參考方法1范圍本標準規(guī)定了血紅蛋白測定參考方法的技術要求。本標準適用于建立并運行血紅蛋白測定參考方法的實驗室。2術語和定義下列術語和定義適用于本文件。2.1血紅蛋白hemog1oun,HGB/Hb存在于血液中所有的血紅蛋白衍生物,包括脫氧血紅蛋白、氧合血紅蛋白、硫化血紅蛋白、碳氧血紅蛋白和高鐵血紅蛋白。2.2僅化商鐵血紅蛋白haemigⅡobincyanide,HiCN血紅蛋白(除硫化血紅蛋白外)中的亞鐵離子被氧化成高鐵離子,再與氰離子結合形成的血紅蛋白衍生物,即氰化高鐵血紅蛋白。2.3參考方法referencemethodwww.bzfxw.com一
3、種可清楚和準確描述的用于特定檢測的技術,該技術要有依據(jù),可提供足夠準確和精密的實驗數(shù)據(jù)以評價其他實驗方法檢測結果的有效性。若有決定性方法,參考方法的準確性必須與決定性方法進行比較,并且應標示不準確度和不精密度。3總則為了保證參考方法檢測結果的準確性,建立參考方法的實驗室應與其他參考實驗室進行結果比對。4原理血紅蛋白分子中的亞鐵離子(Fe2+)在溶液中被高鐵氰化鉀氧化成高鐵離子(Fe3+)形成高鐵血紅蛋白(Hi),其后又與氰離子(CNˉ)反應生成氰化高鐵血紅蛋白(HCN),HCN在波長540nm處有最大吸收峰,HCN吸光度嚴格遵循朗伯-比爾定律,即HCN在波長54
4、0nm的吸光度值與HCN濃度成正比,血紅蛋白濃度可由分光光度計所測定的吸光度值計算得出。5-般技術要求5.1設備5.1.1玻璃器具試驗所用的玻璃器具應為A級。Ws/T341ˉˉ2011規(guī)格要求:正向置換式微量加樣器或吸量管100uL±0.5uL、0.5mL±0.005mL,容量瓶25mL±o,03mL、100mL±0.08mL、250mL±0.12mL、1000mL±0.3mL。5.1.2薄膜過濾器:由低蛋白結合和低釋放材料制成,過濾器半徑為25mm,薄膜孔徑為0,⒛um~o,25um。5.1.3分光光度計:所用的分光光度計應經計量部門檢定合格,儀器的狹縫寬度≤
5、2nm,配對比色杯的內徑為1.000cm±0。002cm。5.2試劑(文-齊氏液,vanKampeⅡandz刂Istrareagent)5.2.1文-齊氏液的組成KCNO。o5ogK3Fe(CN)60.20ogKH2P04(無水)0.140g非離子表面活性劑0.5mL~1.0mL臨床實驗室試劑用水,I級1000。OmL臨床實驗室I級試劑用水應滿足以下指標:細菌數(shù)(10αV/mL;25℃條件下電阻抗)10mΩ·cm;硅含量(Sio2)(0.05mg/L。所用化學試劑應為不含結晶水的分析純。非離子表面活性劑可使用NonidetR40或THtonⅪ1oo。試劑中的氰化
6、鉀為劇毒物質,應規(guī)定相應的生物安全防護和處理要求。5.2.2試劑為清亮的淡黃色溶液,不吸收波長大于480nm的光。pH為7.0~7.4,滲透壓為6mOsm/(kg·H20)~7mOsm/(kg·H2O)。試劑應可使血紅蛋白在5min內完全轉化成氰化高鐵血紅蛋白。www.bzfxw.com5.2.3試劑應保存于較大且密封的棕色硼硅酸鹽玻璃瓶內,室溫避光保存,不能冷凍。如有渾濁物生成,應重新配制。至少每月重新配制一次。5.3血標本的采集5.3.1用真空采血系統(tǒng)采集新鮮靜脈血。采血時要避免皮膚消毒物質的污染。標本中不得有肉眼可見的小凝塊或溶血。5.3.2采集標本時使用
7、EDTA為抗凝劑,要求加人血液后抗凝劑的終濃度為3.7umol/mL~5.4umol/mL,可以使用以下幾種抗凝劑:——EDTA·K2(相對分子質量368.4),濃度為1.4m釅mL~2。Om釅mL;——EDTA·K2·2H20(相對分子質量404.5),濃度為1.5mg/mL~2.2mg/mL;——EDTA·K3·2H20(相對分子質量442.5),濃度為1.6m釅mL~2.4mg/mL;——EDTA·N助·2H20(相對分子質量372.23),濃度為1.4mg/mL~2.0m釅mL。5.3.3血液加人抗凝管后,管內剩余空間至少占試管體積的⒛%,以利于血標本的
8、混勻。5.3.4標本采集
