wst341-2011 血紅蛋白測(cè)定參考方法

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1、ICs11.020C50中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)Ws/T341-ˉ2011血紅蛋白測(cè)定參考方法ReferenceⅡnethodforhaemoglobinometryinhumanblood2011-09-3o發(fā)布2012-04-015安方氈一中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布Ws/T341-ˉ2011目刂舀本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-⒛09給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會(huì)提出。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位:衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:彭明婷、谷小林、李臣賓、施麗飛、陸紅、申子瑜。標(biāo)準(zhǔn)分享網(wǎng)www.bzfxw.com免費(fèi)下載Ws/T341-ˉ2011血紅蛋白測(cè)定參

2、考方法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了血紅蛋白測(cè)定參考方法的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于建立并運(yùn)行血紅蛋白測(cè)定參考方法的實(shí)驗(yàn)室。2術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。2.1血紅蛋白hemog1oun,HGB/Hb存在于血液中所有的血紅蛋白衍生物,包括脫氧血紅蛋白、氧合血紅蛋白、硫化血紅蛋白、碳氧血紅蛋白和高鐵血紅蛋白。2.2僅化商鐵血紅蛋白haemigⅡobincyanide,HiCN血紅蛋白(除硫化血紅蛋白外)中的亞鐵離子被氧化成高鐵離子,再與氰離子結(jié)合形成的血紅蛋白衍生物,即氰化高鐵血紅蛋白。2.3參考方法referencemethodwww.bzfxw.com一種可清楚和準(zhǔn)確描述的用于

3、特定檢測(cè)的技術(shù),該技術(shù)要有依據(jù),可提供足夠準(zhǔn)確和精密的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以評(píng)價(jià)其他實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)結(jié)果的有效性。若有決定性方法,參考方法的準(zhǔn)確性必須與決定性方法進(jìn)行比較,并且應(yīng)標(biāo)示不準(zhǔn)確度和不精密度。3總則為了保證參考方法檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,建立參考方法的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)與其他參考實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行結(jié)果比對(duì)。4原理血紅蛋白分子中的亞鐵離子(Fe2+)在溶液中被高鐵氰化鉀氧化成高鐵離子(Fe3+)形成高鐵血紅蛋白(Hi),其后又與氰離子(CNˉ)反應(yīng)生成氰化高鐵血紅蛋白(HCN),HCN在波長(zhǎng)540nm處有最大吸收峰,HCN吸光度嚴(yán)格遵循朗伯-比爾定律,即HCN在波長(zhǎng)540nm的吸光度值與HCN濃度成正比,

4、血紅蛋白濃度可由分光光度計(jì)所測(cè)定的吸光度值計(jì)算得出。5-般技術(shù)要求5.1設(shè)備5.1.1玻璃器具試驗(yàn)所用的玻璃器具應(yīng)為A級(jí)。Ws/T341ˉˉ2011規(guī)格要求:正向置換式微量加樣器或吸量管100uL±0.5uL、0.5mL±0.005mL,容量瓶25mL±o,03mL、100mL±0.08mL、250mL±0.12mL、1000mL±0.3mL。5.1.2薄膜過(guò)濾器:由低蛋白結(jié)合和低釋放材料制成,過(guò)濾器半徑為25mm,薄膜孔徑為0,⒛um~o,25um。5.1.3分光光度計(jì):所用的分光光度計(jì)應(yīng)經(jīng)計(jì)量部門(mén)檢定合格,儀器的狹縫寬度≤2nm,配對(duì)比色杯的內(nèi)徑為1.000cm±0。0

5、02cm。5.2試劑(文-齊氏液,vanKampeⅡandz刂Istrareagent)5.2.1文-齊氏液的組成KCNO。o5ogK3Fe(CN)60.20ogKH2P04(無(wú)水)0.140g非離子表面活性劑0.5mL~1.0mL臨床實(shí)驗(yàn)室試劑用水,I級(jí)1000。OmL臨床實(shí)驗(yàn)室I級(jí)試劑用水應(yīng)滿足以下指標(biāo):細(xì)菌數(shù)(10αV/mL;25℃條件下電阻抗)10mΩ·cm;硅含量(Sio2)(0.05mg/L。所用化學(xué)試劑應(yīng)為不含結(jié)晶水的分析純。非離子表面活性劑可使用NonidetR40或THtonⅪ1oo。試劑中的氰化鉀為劇毒物質(zhì),應(yīng)規(guī)定相應(yīng)的生物安全防護(hù)和處理要求。5.2.2

6、試劑為清亮的淡黃色溶液,不吸收波長(zhǎng)大于480nm的光。pH為7.0~7.4,滲透壓為6mOsm/(kg·H20)~7mOsm/(kg·H2O)。試劑應(yīng)可使血紅蛋白在5min內(nèi)完全轉(zhuǎn)化成氰化高鐵血紅蛋白。www.bzfxw.com5.2.3試劑應(yīng)保存于較大且密封的棕色硼硅酸鹽玻璃瓶?jī)?nèi),室溫避光保存,不能冷凍。如有渾濁物生成,應(yīng)重新配制。至少每月重新配制一次。5.3血標(biāo)本的采集5.3.1用真空采血系統(tǒng)采集新鮮靜脈血。采血時(shí)要避免皮膚消毒物質(zhì)的污染。標(biāo)本中不得有肉眼可見(jiàn)的小凝塊或溶血。5.3.2采集標(biāo)本時(shí)使用EDTA為抗凝劑,要求加人血液后抗凝劑的終濃度為3.7umol/mL~5

7、.4umol/mL,可以使用以下幾種抗凝劑:——EDTA·K2(相對(duì)分子質(zhì)量368.4),濃度為1.4m釅mL~2。Om釅mL;——EDTA·K2·2H20(相對(duì)分子質(zhì)量404.5),濃度為1.5mg/mL~2.2mg/mL;——EDTA·K3·2H20(相對(duì)分子質(zhì)量442.5),濃度為1.6m釅mL~2.4mg/mL;——EDTA·N助·2H20(相對(duì)分子質(zhì)量372.23),濃度為1.4mg/mL~2.0m釅mL。5.3.3血液加人抗凝管后,管內(nèi)剩余空間至少占試管體積的⒛%,以利于血標(biāo)本的混勻。5.3.4標(biāo)本采集