不同炮制方法對白芍中芍藥苷含量的影響

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1、不同炮制方法對白芍中芍藥苷含量的影響作者：時維靜,儲明明,譚志靜【摘要】目的考察不同炮制方法對白芍中芍藥苷含量的影響。方法應(yīng)用清炒、酒炙、醋炙3種炮制方法加工白芍飲片,采用HPLC法測定各種炮制品中的芍藥苷含量。結(jié)果各炮制品中芍藥苷含量由高到低依次為：生白芍＞炒白芍＞酒白芍＞醋白芍。結(jié)論不同炮制方法對白芍中芍藥苷含量有較大影響?！娟P(guān)鍵詞】白芍；炮制；芍藥苷；高效液相色譜法Keywords：RadixPaeoniaeAlba；processingdrugs；paeoniflorin；HPLC8白芍臨床常用的炮制品有酒炙品、醋炙品和清炒品等。生白芍強于養(yǎng)血柔肝、平肝滋陰,主

2、要用于鎮(zhèn)肝熄風(fēng)、滋陰安神,治療肝陽上亢等；炒白芍強于養(yǎng)血和絡(luò)、緩脾止痛,主要用于脾虛或肝脾不和之泄瀉腹痛者；酒白芍強于補中、行散,用于血虛兼見血瘀,或血虛兼見寒凝者；醋炒白芍主要用于緩肝、柔肝、止痛、斂血,常與養(yǎng)血補肝或止血藥同用,治婦人肝急失柔、沖任不固等證[1]。有研究報道,炮制后的白芍其中的芍藥苷含量均顯著降低[2]。本試驗采用清炒、酒炙、醋炙3種方法炮制白芍,用HPLC法測定不同炮制品及生品中芍藥苷的含量,考察不同炮制方法對芍藥苷含量的影響。　　1材料　　1.1儀器美國Waters-1525高效液相色譜儀,2487-DAD紫外檢測器,Breeze色譜工作站(美國

3、Waters)；BS21S精密電子天平(德國賽多利斯天平有限公司)；ZK-82B型電熱真空干燥箱(上海市實驗儀器總廠)。　　1.2試劑與藥物　　白芍購自安徽滬譙中藥飲片廠(生產(chǎn)許可證號：Y20050027；批號060904)；白芍苷對照品購自中國藥品生物制品檢定所(批號110736-200629)。雙蒸餾水(自制)；陳醋(金山寺,鎮(zhèn)江市陳醋廠)；黃酒(海神黃酒,安徽省海神黃酒有限公司)；乙腈為色譜純；其余試劑均為分析純。　　2方法與結(jié)果　　2.1白芍炮制品的制備[3]8　　2.1.1炒白芍　　取白芍片置鍋內(nèi),用文火加熱,炒至表面微黃色,取出放涼?！　?.1.2酒白芍　　

4、取白芍片,噴淋黃酒拌勻,稍悶后置鍋內(nèi),用文火加熱,炒干,取出放涼；每白芍100kg用黃酒10kg。　　2.1.3醋白芍　　取白芍片,用米醋拌勻,稍悶后置鍋內(nèi),用文火加熱,炒干,取出放涼；每白芍100kg用米醋20kg。　　2.2芍藥苷含量測定　　2.2.1色譜條件　　色譜柱：ZORBAXSB-C18(4.6mm×150mm,5μm)；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)；流速為1.0mL/min；檢測波長為230nm[1]；柱溫：室溫；進樣量20μL。在該色譜條件下,芍藥苷峰與其他成分有較好的分離,理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計算不低于38000。色譜圖見圖1。　　2.

5、2.2供試品溶液制備　　精密稱取各炮制品白芍粗粉50.0g,用8倍量乙醇,回流提取2次,每次提取1h,合并提取液,在常壓下回收乙醇,待成稠膏時,置真空干燥箱內(nèi)(80℃)干燥,研末,存入干燥器內(nèi)。稱取相當(dāng)于0.5g原藥材的粉末,置50mL量瓶中,用甲醇定容至刻度。取1mL置10mL容量瓶中,制成1g/L的溶液,為供試品溶液?！　?.2.3對照品溶液制備　　精密稱取芍藥苷對照品2.10mg,用甲醇定容到5mL量瓶中,即得對照品溶液?！　?.2.4線性關(guān)系考察　　取芍藥苷對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL用甲醇定容到5mL,進樣量20μL,按上述色譜

6、條件測定,記錄峰面積。以芍藥苷含量(μg)為橫坐標,峰面積為縱坐標,進行回歸處理,得回歸方程為：Y＝2×106X－74470,r＝0.9990。芍藥苷在0.17～1.68μg范圍線性關(guān)系良好?！　?.2.5精密度試驗8　　精密吸取芍藥苷對照品溶液,依次重復(fù)進樣5次,每次20μL,在上述色譜條件下測定芍藥峰面積值,RSD＝0.17%。表明本法精密度良好?！　?.2.6穩(wěn)定性試驗　　取供試品溶液,每隔1h進樣20μL,重復(fù)進樣5次,測定各峰面積值,RSD＝0.54%。表明樣品穩(wěn)定性好?！　?.2.7重復(fù)性試驗　　同一批樣品進行5次平行試驗,測定芍藥苷含量,每次進樣量為20μ

7、L,測定結(jié)果RSD＝0.67%?！　?.2.8加樣回收率試驗　　取已知含量的樣品5份,分別添加芍藥苷對照品0.1mg,依法測定含量,平均回收率RSD＝0.26%,表明本方法的加樣回收率以芍藥苷加入量計符合要求。　　2.2.9樣品含量測定8　　分別取供試品溶液20μL進樣,在上述色譜條件下測定芍藥苷的峰面積,由標準曲線計算出芍藥苷的含量。結(jié)果見表1。表1芍藥苷含量測定結(jié)果(略)　　3討論　　歷史上白芍的道地產(chǎn)區(qū)為安徽亳州(亳芍)、浙江杭州(杭芍)、四川中江一帶(川芍)。芍藥共有11個種(或變種),種質(zhì)資源非常豐富。安徽亳芍主要栽培于亳州、渦