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《三氧化二砷誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡和bcl-2表型變化的意義》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、三氧化二砷誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡和Bcl-2表型變化的意義作者：鄭亦胡，周蒙滔，單云峰，張啟瑜【摘要】 目的：探討三氧化二砷(As2O3)是否能夠誘導(dǎo)SGC7901胃癌細(xì)胞凋亡，以及Bcl-2的表型變化是否在其中發(fā)揮了作用。方法：將不同濃度的三氧化二砷作用于SGC7901細(xì)胞，采用CCK-8進(jìn)行細(xì)胞毒檢測；采用DAPI染色進(jìn)行細(xì)胞核形態(tài)分析；采用免疫熒光顯微鏡觀察不同表型的Bcl-2表達(dá)的變化；采用WesternBlot蛋白印跡法檢測Bcl-2的表達(dá)。結(jié)果：三氧化二砷可以誘導(dǎo)SGC7901細(xì)胞凋亡。三氧化
2、二砷誘導(dǎo)SGC7901細(xì)胞的凋亡伴隨著Bcl-2表型的變化，且Bcl-2的表達(dá)無改變。結(jié)論：三氧化二砷可能通過Bcl-2表型的變化誘導(dǎo)SGC7901胃癌細(xì)胞凋亡，而不是通過下調(diào)Bcl-2的表達(dá)?！娟P(guān)鍵詞】三氧化二砷胃腫瘤細(xì)胞凋亡Bcl-2 Abstract:Objective:Toexplonetheeffectsofarsenictrioxide(As2O3)oninductionofapoptosisinSGC7901humangastriccancercellsandthephenotypec
3、hangeofBcl-2.Methods:SGC7901humangastriccancercellsweretreatedwithdifferentconcentrationsofarsenictrioxide.CytotoxicitywasmeasuredbyusingtheCellCountingAssayKit-8.Analysisofnuclear10morphologywasobservedwithDAPIstainingandthephenotypechangeofBcl-2wasobs
4、ervedundertheimmunofluorescencemicroscopy.TheexpressionofBcl-2wasexaminedwithWesternBlotanalysis.Results:ArsenictrioxidecouldinduceapoptosisinSGC7901humangastriccancercells，andtheapoptosiswasaccompaniedwithphenotypechangeofBcl-2，butarsenictrioxidedidnot
5、affectexpressionofBcl-2.Conclusion:ArsenicinSGC7901cellsinducedbyarsenictrioxidemaybeexpressedthroughtheinductionofBcl-2phenotpechangeratherthandown-regulationofBcl-2. Keywords:arsenictrioxide；stomachneoplams；apoptosis；Bcl-210 近年來，大量研究證實(shí)三氧化二砷在體外對(duì)于多種惡性
6、腫瘤細(xì)胞具有誘導(dǎo)凋亡作用，包括胃癌、肺癌、乳腺癌、肝細(xì)胞癌、鼻咽癌、膽囊癌、宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌[1-2]，但是對(duì)于三氧化二砷誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制卻仍然存在爭議。下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)是一種重要的作用機(jī)制[2-4]。最新的研究卻發(fā)現(xiàn)，Bcl-2具有細(xì)胞保護(hù)和破壞兩種表型，其不同的表型被其蛋白構(gòu)象所調(diào)控[5]，這種構(gòu)象的改變可以使Bcl-2從一個(gè)細(xì)胞保護(hù)作用變成破壞作用。本實(shí)驗(yàn)擬研究三氧化二砷是否能夠誘導(dǎo)SGC7901胃癌細(xì)胞凋亡并觀察Bcl-2的表達(dá)量和表型的變化，探討其誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制。
7、 1材料和方法 1.1主要試劑 三氧化二砷購自哈爾濱伊達(dá)藥業(yè)公司，濃度：10mg/10mL。RPMI1640培養(yǎng)液和胎牛血清購自美國Invitrogen公司?？笲cl-2N端兔多抗IgG、抗Bcl-2鼠單抗IgG、抗β-actin鼠單抗IgG1購自美國SantaCruz公司?？笲cl-2BH3結(jié)構(gòu)域抗體購自美國Abgent公司。辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的兔抗鼠二抗、Cy3標(biāo)記的抗兔IgG、DAPI染料購自碧云天生物研究所。CCK-8試劑盒購自日本同仁化學(xué)研究所。哺乳動(dòng)物蛋白抽提試劑購自美國Th
8、ermoScientific公司。聚偏二氟乙烯(PVDF)膜購自美國Millipore公司。ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒購自美國Pierce公司。 1.2細(xì)胞培養(yǎng) 人胃癌細(xì)胞株SGC7901購自中科院上海細(xì)胞研究所，予含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液，在5%CO2飽和濕度的37℃孵箱中培養(yǎng)，細(xì)胞長滿后經(jīng)胰酶消化法傳代。10 1.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 首先使用細(xì)胞毒檢測求得三氧化二砷作用SGC7901胃癌細(xì)胞24h的50%細(xì)胞死亡的濃度（IC50），再用
