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《乙型肝炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中hbv-dna檢測(cè)的臨床意義》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、乙型肝炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中HBV-DNA檢測(cè)的臨床意義作者：張平，曹寧芬，袁迎春，張栩，李玉芳，焦運(yùn)，【摘要】：目的研究HBV感染者血清及外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）中HBV-DNA的感染情況。方法采用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)112例乙肝患者PBMC及血清中HBV-DNA的感染情況進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果PBMC內(nèi)HBV-DNA陽(yáng)性60例，陰性52例；PBMC內(nèi)HBV-DNA陽(yáng)性患者HBeAg陽(yáng)性率68.3%，較PBMC內(nèi)HBV-DNA陰性患者顯著增高（P＜0.05）；血清和PBMC檢測(cè)結(jié)果一致的患者占總檢出率的79.5%。
2、肝硬化組PBMC內(nèi)HBV-DNA陽(yáng)性率高于急性乙型肝炎組和慢性肝炎組（P＜0.05）。結(jié)論血清與PBMC內(nèi)HBV-DNA陽(yáng)性率以及HBeAg陽(yáng)性率存在明顯的相關(guān)性。PBMC中HBV-DNA的持續(xù)存在可能與乙肝易慢性化有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】乙肝病毒；肝硬化；HBV-DNA；外周血單個(gè)核細(xì)胞 Abstract：ObjectiveToexploretherelationshipbetweeninfectionratesinserumandPeripheralBlood.MononuclearCells(PBMC)inHBVp
3、atients.MethodsHBVinfectioninserumandPBMCwereMonitoredbyPCRfluorescentquantificationtechnique.ResultsIn112HBVpatients，60werefoundHBV-DNApositiveinPBMC.InthosecaseswithHBV-DNApositiveinPBMC，68.3%were8HBeAgPositive，thatwassignificantlyhigherthanthoseHBV-DNAnegat
4、iveinPBMC(P＜0.05).Thesameresultinboth.serumandPBMCoccurredin79.5%ofallcases.PBMCinfectionrateinliver.sclerosispatientswassignificantlyhigherthanthatinacuteHBVandchronicHBV(P＜0.05).ConclusionThereisahighcorrelationamongtheHBV-DNApositiveratesinserumandPBMCandth
5、epositiverateofHBeAg.ThecontinuousexistenceofHBV-DNAinPBMCofHBVpatientsmayplayasignificantroleinthediseasemechanism. Keywords:HBVvirus;PBMC;HBV-DNA;sclerosis乙型肝炎的發(fā)病是乙型肝炎病毒（HBV）與機(jī)體相互作用的結(jié)果，與HBV引起宿主細(xì)胞的免疫病理?yè)p傷有關(guān)。HBV能感染外周血中單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）并能在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。HBV侵入人體后，機(jī)體免疫系統(tǒng)有可能及時(shí)清除
6、血液中HBV，但PBMC中HBV不易被清除而持續(xù)存在，可導(dǎo)致免疫功能異常引起肝病慢性化。探討PBMC中HBV-DNA存在情況和含量變化對(duì)闡明HBV入侵PBMC及慢性化機(jī)制有重要意義。 1材料與方法 1．1病例選擇8 我院2008年1-6月收治的住院患者112例，男79例，女33例，年齡15～65歲，平均（31±22）歲。病程6～106個(gè)月。診斷符合西安會(huì)議修訂的《病毒性肝炎防治方案》診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］，其中慢性乙型肝炎（CAH）57例，乙型肝炎肝硬化（LC）36例，急性乙肝（AHB）19例，均排除甲、丙、丁、戊型
7、肝炎。采用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)上述肝病患者外周血PBMC及血清中HBV-DNA的感染情況進(jìn)行檢測(cè)?！ ?．2試劑和儀器 采用美國(guó)PE公司熒光定量PCR儀（GENEAMP5700Sequencedetectionsystem）、凈化公司超凈工作臺(tái)、北京醫(yī)用離心機(jī)廠低速離心機(jī)、日本日立公司SANYO型低溫冰箱、美國(guó)貝克曼自動(dòng)生化分析儀。TagDNA聚合酶購(gòu)自晶美生物制品公司，熒光定量試劑盒購(gòu)自深圳達(dá)安基因公司?！ ?．3外周血PBMC內(nèi)HBV-DNA檢測(cè)(單個(gè)核細(xì)胞HBV-DNA)8 無(wú)菌采集空腹靜脈全血5mL放入
8、含EDTA2Na抗凝試管中，常規(guī)Ficoll梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞。為排除血清污染、最后一次洗滌液留送PCR法檢測(cè)HBV-DNA。離心10000r/min，留取沉淀物，-20℃保存，PBMC沉淀和末次洗滌液分別加入50μLDNA提取液混勻，100℃沸水浴10min，轉(zhuǎn)至4℃靜置6～8h，離心5min，取上清液5μL做PCR反應(yīng)?！ ?.4血清HBV-
