噬菌蛭弧菌發(fā)展現(xiàn)狀的綜述

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1、噬菌蛭弧菌研究現(xiàn)狀的綜述姓名單位摘要：我們針對噬菌蛭弧菌的噬菌斑鑒別與純化，菌種保藏方法及研究進(jìn)展這三個方面進(jìn)行綜述。從中可以了解到我國及其他國家對蛭弧菌的研究現(xiàn)狀。關(guān)鍵詞：噬菌蛭弧菌、鑒別、純化、簡易保藏蛭孤菌(Bdellovibrio)是寄生于某些細(xì)菌并能導(dǎo)致其裂解的一類細(xì)菌，為細(xì)菌的寄生菌，其在自然界分布很廣，從自然水域、污水及土壤中均可分離到。由于其能裂解多種細(xì)菌以及特殊的生活方式而使之具有生態(tài)學(xué)優(yōu)勢，故被認(rèn)為是自然凈化的生物因子之一[1]。根據(jù)GC比例，過氧化物酶、蛋白酶活性，耐藥性和寄生性將蛭弧菌分為三種。它們分別是：噬菌蛭弧菌、斯托普蛭弧菌、斯塔爾

2、蛭弧菌。噬菌蛭弧菌的GC比例較高，約為50.4±0.9mol%。過氧化酶呈陽性，對弧菌抑制劑0/129敏感，蛋白酶的活性相對較低，依賴于宿主繁殖。它在特殊條件下可轉(zhuǎn)化為兼性腐生菌[2]；斯托普蛭弧菌的GC比例（42-43mol%），過氧化酶呈陰性，對弧菌抑制劑0/129呈抗藥性，蛋白酶活性相對較高，宿主僅限于假單胞菌；斯塔爾蛭弧菌的GC比例較低，過氧化酶呈陽性，對弧菌抑菌劑0/129敏感，蛋白酶活性較高，可兼性寄生性，或可依賴宿主菌而生活[3]。1．1　噬菌蛭弧菌研究進(jìn)展（馮曉英，顧玲，莊菱.江蘇省衛(wèi)生防疫站　210009）　　近10年來歐、美等國在蛭孤菌(Bd

3、ellovibrio,以下簡稱Bd菌10)菌的基礎(chǔ)研究方面較為深入，研究重點主要在Bd菌的生物學(xué)特性、蛋白合成、DNA組合、溶菌物質(zhì)等方面。研究發(fā)現(xiàn)Bd菌在分子生物學(xué)方面具有許多獨特性,蛭弧菌不能利用碳水化合物，但分解蛋白質(zhì)的能力極強，它是利用多肽及氨基酸作為能源和碳源。蛭弧菌生長代謝過程中乙醛酸循環(huán)很弱，以不完全的三羧酸循環(huán)為主要代謝途徑，蛭弧菌蛋白質(zhì)的含量可達(dá)干重的60-65%，DNA含量為5%。蛭弧菌DNA合成的前體物質(zhì)全部來自宿主細(xì)胞，蛭弧菌可直接利用單核苷酸作為前體物質(zhì)，合成其核酸[5-6]。在Bd菌噬菌作用的機(jī)理研究方面，一般認(rèn)為Bd菌依靠鞭毛快速運

4、動，與宿主菌相遇后Bd菌高速旋轉(zhuǎn)，同時釋放一類胞壁質(zhì)酶，迅速通過宿主菌細(xì)胞壁，侵入過程幾秒鐘便可完成，侵入宿主菌胞壁和膜之間(即所謂周質(zhì))，Bd菌失去鞭毛，在宿主菌細(xì)胞周質(zhì)間生長繁殖，分裂成3-4個子代細(xì)胞，同時產(chǎn)生某種溶菌酶使宿主菌胞壁分解，子代游出進(jìn)入下一繁殖周期，完成一代需要4小時[7]。另有報道當(dāng)Bd菌穿入宿主菌胞壁時，具有改變宿主菌胞壁成份的功能，如細(xì)胞壁脂多糖(LPS)結(jié)構(gòu)的改變，使其失去毒性[7]。這將為治療內(nèi)毒素血癥提供一個可研究途徑。　　國內(nèi)對Bd菌的研究從60年代中期開始。1966-1969年司稚東教授在上海郊縣、崇明島首次分離到Bd菌，并對

5、沙門氏菌、志賀氏菌、假單胞菌、霍亂弧菌進(jìn)行噬菌試驗獲得成功。后又對植物致病菌、水稻白葉枯病菌、白菜軟腐病菌進(jìn)行了Bd菌防治的研究。1980年在司稚東10教授領(lǐng)導(dǎo)下的江蘇省衛(wèi)生防疫站弧菌噬菌體專業(yè)實驗室開展了對Bd菌的系統(tǒng)性研究(包括生物學(xué)特性、培養(yǎng)保藏方法、生態(tài)學(xué)及污水凈化)，并證實Bd菌對多種腸道革蘭氏陰性菌有噬菌、裂解作用。此項研究對國內(nèi)開展Bd菌的研究起到重要的推動作用[8-9]。80年代后期全國各地逐步開展了對Bd菌的研究,北京流研所呼蘭、劉秉陽從人類糞便中分離到Bd菌，并用Bd菌防護(hù)豚鼠角膜感染獲得成功。北京醫(yī)科大學(xué)王秀茹對Bd菌不同水體的分布及對革蘭

6、氏陰性菌的凈化作用進(jìn)行了研究。華西醫(yī)大、貴陽醫(yī)大及四川、新疆等地對Bd菌生態(tài)分布與污水污染關(guān)系進(jìn)行了研究,認(rèn)為Bd菌與污水中大腸菌群數(shù)呈正相關(guān)(r=0.7649,P<0.005),與細(xì)菌總數(shù)也呈正相關(guān)(r=0.899,P<0.005)，可以用于污水監(jiān)測指標(biāo)及水源污染的調(diào)查[10-12]。　近5年來在Bd菌的應(yīng)用開發(fā)方面，國內(nèi)開展了許多研究。江蘇省衛(wèi)生防疫站弧菌噬菌體專業(yè)實驗室在用Bd菌防治家禽、家畜腸道細(xì)菌性傳染病方面做了大量的工作。對雛雞白痢病、雞大腸桿菌病的防治現(xiàn)場實驗中獲得成功。在Bd菌對動物的毒理作用方面也進(jìn)行了初步的研究，用Bd菌8×105pfu/mL

7、給予小鼠腹腔注射，經(jīng)對照試驗證明對小鼠無毒性反應(yīng)。用Bd菌對致病菌攻擊小鼠保護(hù)性試驗中揭示Bd菌對防制病菌攻擊，減少死亡率與空白對照組比較有明顯差異(P<0.05)[13-15]。1994年農(nóng)業(yè)部文件，將Bd菌列入飼料藥物添加劑允許使用的微生物有益菌類中。1995年上海大學(xué)生物醫(yī)藥中心邵桂元等人以鯽魚出血性腹水病病原菌點狀產(chǎn)氣單胞菌(Aeromonaspunctata)為宿主菌，從自然界分離到6株Bd菌均對此病菌有溶菌性。并在實驗條件下對病原菌的自然凈化作用方面進(jìn)行了研究，為利用Bd菌控制魚塘細(xì)菌性病害的發(fā)生，10開展生物防治新技術(shù)提供了依據(jù)和途徑。1997年廈

8、門大學(xué)生物系楊淑專等人在