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《水產(chǎn)品中孔雀石綠的測定》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、XXX實驗室檢測中心管理體系文件作業(yè)指導書（第A版第0次修改）文件編號：編寫：審核：批準：批準日期：受控狀態(tài)：□受控□非受控正副版本：□正本□副本持有者：發(fā)布日期：實施日期：HightideagainstCCPbloodyanTomb,CommunistPartymembersandpartoftheexposedTombareavacatedbyprogressiveyouth.IvisitedinBeijingin1985whenitwasoldundergroundcomrade,sisterofYaoZhiyingYaoMuzheng(t
2、henDeputyDirectoroftheexternaltrademagazineforthepromotionofinternationaltrade,deshengmenWai,theReed作業(yè)指導書文件編號：第頁共頁標題：水產(chǎn)品中孔雀石綠的測定第A版第0次修改頒布日期：2014年月日1.目的使孔雀石綠的測定處于受控狀態(tài)，保證孔雀石綠檢測結果的準確性與一致性；規(guī)范參加本項目檢測工作人員的操作規(guī)程。2.適用范圍本作業(yè)指導書規(guī)定了水產(chǎn)品中孔雀石綠及其代謝物隱色孔雀石綠殘留量的酶聯(lián)免疫測定方法。本作業(yè)指導書適用于魚、蝦以及魚池或者魚缸水樣中的
3、總的孔雀石綠殘留量的檢測。3.引用依據(jù)孔雀石綠酶聯(lián)免疫檢測試劑盒使用說明書。水產(chǎn)品中孔雀石綠及其代謝物殘留量的快速篩選測定酶聯(lián)免疫法DB34/T1421-2011水產(chǎn)品中孔雀石綠和結品紫及其代謝產(chǎn)物的快速測定方法SN/T1768-2006水產(chǎn)品中孔雀石綠和結晶紫殘留量的測定高效液相色譜熒光檢測法GB/T20361-20064.概述孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結晶體，既是殺真菌劑，又是染料。長期以來，漁民都用它來預防魚的水霉病、鰓霉病、小瓜蟲病等，而且為了使鱗受損的魚延長生命，在運輸過程中和存放池內(nèi)，也常使用孔雀石綠。研究顯示，孔雀石綠在魚體內(nèi)
4、殘留時間長，且具有高毒性、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用。5.酶聯(lián)免疫吸附法5.1.原理本孔雀石綠類酶聯(lián)免疫檢驗試劑，主要是利用還原劑將樣品中的孔雀石綠還原成隱性孔雀石綠后，利用抗原與抗體之特異性免疫化學反應的基本原理來進行的，換句話說，就是利用酶標記物與樣品中之隱性孔雀石綠對微孔中之抗體來進行競爭反應。在整個反應當中，如果樣品中之隱性孔雀石綠殘留的越多，相對地就會競爭掉越多的抗體，使得結合了與微孔盤上包被的抗原結合抗體的二次抗體相對地就會減少。因此，反應中之酶標記物結合體-底物溶液之呈色就會很淡，甚至幾乎沒有顏色，此即為陽性反應。反之，若樣
5、品中沒有含隱性孔雀石綠，則呈色會比較深，與陰性標準品呈色幾乎是一樣的，此即為陰性反應。5.2.試劑和材料5.2.1.實驗室用試劑：所用試劑除另有規(guī)定外，均為分析純。水為符合GB/T6682規(guī)定的二級水。HightideagainstCCPbloodyanTomb,CommunistPartymembersandpartoftheexposedTombareavacatedbyprogressiveyouth.IvisitedinBeijingin1985whenitwasoldundergroundcomrade,sisterofYaoZhiyi
6、ngYaoMuzheng(thenDeputyDirectoroftheexternaltrademagazineforthepromotionofinternationaltrade,deshengmenWai,theReed作業(yè)指導書文件編號：第頁共頁標題：水產(chǎn)品中孔雀石綠的測定第A版第0次修改頒布日期：2014年月日1.1.1.乙酸乙酯。1.1.2.正己烷。1.1.3.12N鹽酸溶液1.1.4.孔雀石綠酶聯(lián)免疫試劑盒1.2.儀器和設備1.2.1.酶標儀：配備450nm濾光片。1.2.2.分析天平：感量0.001g，感量0.0001g。1.2
7、.3.恒溫培養(yǎng)箱。1.2.4.均質(zhì)器。1.2.5.旋渦振蕩器。1.2.6.離心機：離心力≥4000g。1.2.7.氮吹儀1.2.8.微量單道/多道移液器：10μL～100μL；100μL～1000μL；50μL～300μL。1.2.9.水浴鍋。1.2.10.聚四氟乙烯離心管：5mL，50mL，具塞。1.3.樣品處理1.3.1.將2克已均質(zhì)之樣品放入15mL離心管中，加入0.4%還原劑3mL后立刻震蕩1分鐘使成肉漿狀。1.3.2.靜置30分鐘。1.3.3.再加入6mL0.002N鹽酸-乙酸乙酯，震蕩1分鐘。1.3.4.以離心機離心1700×g(約3
8、500rpm)10分鐘。1.3.5.離心后若于上層有機層內(nèi)觀察到白色膠狀物時，用竹棒或移液槍頭攪拌上層有機層后再次以1700×g(約35
