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1、組織因子在腎癌中的表達(dá)及其臨床意義作者:魏漢平,徐仁方 王堅,談炎【摘要】目的研究組織因子(TF)在腎癌中的表達(dá)并探討其臨床意義。方法運(yùn)用免疫組織化學(xué)MaxVisionTM法分別檢測30例腎癌組織及15例癌旁正常組織中TF的表達(dá)情況。結(jié)果TF在腎癌組織中的表達(dá)率90.0%(27/30)顯著高于在癌旁正常組織中的表達(dá)率13.3%(2/15),且差異有顯著性意義。結(jié)論TF與腎癌的發(fā)生、發(fā)展可能具有密切關(guān)系,它可能在腎癌的治療方面具有一定意義。【關(guān)鍵詞】組織因子;腎癌;免疫組化;表達(dá)ABSTRACT:ObjectiveTostudythee
2、xpressionoftissuefactor(TF)inrenalcellcarcinomaandinvestigateitsclinicalsignificance.MethodsTheexpressionofTFin30casesofrenalcellcarcinomaand15casesofnormalkidneytissuewasdetectedbyMaxVisionTMimmunhistochemistrymethod.ResultsTheexpressionrateofTFinrenalcellcarcinoma(90.
3、0%,27/30)wassignificantlyhigherthanthatinnormalkidneytissue(13.3%,2/15),therewassignificantdifferencebetweenthetwogroups.ConclusionMaybethereisacloserelationshipbetweenTFandrenalcellcarcinoma.TFmaybesignificantinthetreatmentofrenalcellcarcinoma.KEYWORDS:Tissuefactor;Ren
4、alcellcarcinoma;Immunhistochemstry;Expression組織因子(tissuefactor,TF)又稱凝血因子Ⅲ,是一種相對分子質(zhì)量約為47000的單鏈跨膜糖蛋白受體,由263個氨基酸殘基構(gòu)成,可分為胞外區(qū)、跨膜區(qū)、胞內(nèi)區(qū)3個結(jié)構(gòu)域。TF是體內(nèi)外引起血液凝固強(qiáng)有力的啟動因子,在止血、組織修復(fù)、血栓形成等一系列生理、病理過程中發(fā)揮重要作用[1]。近年來有研究發(fā)現(xiàn)多種腫瘤如結(jié)直腸癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、食道癌、子宮頸癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等惡性腫瘤細(xì)胞及腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞中常異常
5、高表達(dá),參與腫瘤血管的生成,促進(jìn)腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移[2~6]。但TF在正常血管內(nèi)皮細(xì)胞表面卻不表達(dá)[7]。TF在腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)的這種特性使之成為最具吸引力的腫瘤治療的靶蛋白,成為人們研究的熱點。腎癌是泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤中發(fā)病率較高的腫瘤之一,目前對腎癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制尚未明確,國內(nèi)也未見到有關(guān)組織因子與腎癌關(guān)系的報道。為此我們設(shè)計了此實驗,以了解TF在腎癌組織中的表達(dá)情況并探討其臨床意義。1資料與方法1.1一般資料430例腎癌組織來自蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院泌尿外科2007年2月至2008年3月做腎癌根治術(shù)的30名患者。其中男16例,女
6、14例,年齡32~73歲,平均61歲,術(shù)后病理均證實為腎透明細(xì)胞癌。15例腎癌旁正常組織(病理證實無癌殘留)取自蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院泌尿外科2007年3月至2007年12月15名做腎癌根治術(shù)患者的遠(yuǎn)離癌(>4cm)的腎組織。其中男9例,女6例,年齡46~68歲,平均56歲。所有標(biāo)本均經(jīng)10%甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋切片。1.2主要試劑兔抗人TF多克隆抗體一抗購自武漢博士德生物工程有限公司;快捷型酶標(biāo)羊抗鼠/兔IgG聚合物二抗、DAB溶液、PBS溶液、3%過氧化氫溶液、二甲苯均由蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院病理科提供。1.3實驗方法運(yùn)用免疫
7、組織化學(xué)MaxVisionTM法。30例腎癌組織和15張癌旁正常組織切片共45張,每張切片厚約3μm。常規(guī)二甲苯脫蠟、梯度乙醇水化,自來水沖洗5min;100℃高溫下組織抗原修復(fù)30min,PBS液沖洗3min×3,甩去PBS液;每張切片滴加兔抗人TF多克隆抗體50μl,4℃過夜;PBS液沖洗3min×3,甩去PBS液;每張切片滴加快捷型酶標(biāo)羊抗鼠/兔IgG聚合物50μl,室溫下孵育15min;PBS液沖洗3min×3,甩去PBS液;每張切片滴加新鮮配制的DAB溶液100μl,顯微鏡下觀察3min;用自來水沖洗,蘇木素復(fù)染,自來水沖洗
8、返藍(lán),經(jīng)梯度酒精干燥脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。每例觀察10個高倍鏡視野,TF蛋白棕黃色定位于細(xì)胞膜,血管內(nèi)皮細(xì)胞表面也有表達(dá)。陽性細(xì)胞<10%為陰性,>10%為陽性。2結(jié)果30例腎癌組織中27例TF表達(dá)