丹參水溶性成分的純化工藝和質(zhì)量研究

丹參水溶性成分的純化工藝和質(zhì)量研究

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1、丹參水溶性成分的純化工藝和質(zhì)量研究張秋燕、崔翰明、張春光、王階*中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院摘要目的:提取純化丹參中水溶性酚酸類有效成分,并進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量分析研究。方法:以HPLC檢測丹酚酸B的含量,采用單因素和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化丹參的提取工藝;采用大孔吸附樹脂方法純化丹參水溶性成分;并對丹參及其提取物的水溶性成分進(jìn)行HPLC指紋圖譜研究,制定相應(yīng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果:丹參中主要水溶性成分丹酚酸B的提取轉(zhuǎn)移率達(dá)85%,提取純化物中含丹酚酸B大于65%、丹參素8%,其他丹酚酸12%。相應(yīng)HPLC指紋圖譜分析方法可有效分析和鑒別主要水溶性特

2、征峰。結(jié)論:本方法能夠快速高效分離純化丹參水溶性成/組分,得到較高純度的丹參總酚酸;HPLC指紋圖譜分析方法的精密度、重現(xiàn)性良好。關(guān)鍵詞:丹酚酸;柱層析;HPLC;指紋圖譜[Abstract]Objective:Toextractandpurifytheactivecomponentsofsalviamiltiorrhiza,andtodeterminatetherelevantqualityanalysis.Methods:TheHPLCmethodofsalvianolicacidBwasestablished.Th

3、efactorsinfluencingtheextractionwereinvestedwithasingle-factorandorthogonaldesign.Thewater-solublecomponentsofsalviamiltiorrhizawerepurifiedwithmacroporousresin.TheHPLCfingerprintofSalviamiltiorrhizaanditspurifiedextractwerestudy,andthequalityspecificationwasesta

4、blished.Results:ThetransferrateofsalvianolicacidBwasupto85%,andthecontentsofsalvianolicacidBandtanshinolwererespectively65%and8%,andothersalvianolicacidabout12%.TheHPLCfingerprintanalysismethodcaneffectivelyanalyzeandidentifythemaincharacteristicpeaksofwater-solu

5、blecomponents.Conclusion:ThismethodcanquicklyandefficientlypurifiedSalviamiltiorrhizawater-solublecomponents.Thesalvianolicacidcomponentsthathadhigherpuritywereobtained.TheHPLCfingerprintmethodhasgoodprecisionandreproducibility.KeyWords:salvianolicacid;columnchro

6、matography;HPLC;fingerprint丹參為唇形科鼠尾草屬植物丹參(SalviamiltiorrhizaBunge)的干燥根及根莖。丹參性苦,微寒;歸心、肝經(jīng);具有祛瘀止痛,活血通經(jīng),清心除煩等功效。是一味普遍用于心血管疾病治療的傳統(tǒng)中藥?,F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)丹參的有效成分主要分為兩大類:丹酚酸類和丹[1]參酮類。丹酚酸類化合物以抗氧化、抗凝血和細(xì)胞保護(hù)作用為主;而丹參酮類化合物以改[2][3]善血液循環(huán)、抗菌和抗炎作用為主,具有顯著的抗菌和溫和的性激素樣作用。丹酚酸類是由不同個(gè)數(shù)的丹參素(β-3,4-二羥苯乳酸

7、,β-3,4-dihydroxybenyllacticacid)和咖啡酸縮合而成,主要有丹酚酸A、B、C、迷迭香酸(Rosmarinicacid)和丹參素、原兒茶醛等。本研究以HPLC檢測丹酚酸B的含量,采用醇提和水提相結(jié)合的方法,分別提取丹參脂溶性和水溶性成分,單因素和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化丹參的提取工藝;采用大孔吸附樹脂柱層析方法純化丹參水溶性成分,通過試驗(yàn)尋找合適的柱填料、洗脫劑,并優(yōu)化各工藝參數(shù)等;并對丹參及其提取純化物進(jìn)行HPLC指紋圖譜研究,制定相應(yīng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。1.儀器與材料1.1儀器Agilent1200型液相色譜儀;

8、AgilentTCC18(150*4.6mm,5μm)色譜柱和保護(hù)柱;Kromasil,100-5C18(250*4.6mm,5μm)色譜柱;FA2104型萬分之一級電子天平;高純水機(jī)(Millipore);SY7200DH超聲儀;DRT-TW型調(diào)溫電熱套;玻璃層析柱(30×410mm)。1.2試劑和試藥甲醇和乙腈(

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