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《蜂膠提取物對eds76v的滅活作用效果研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、2004學術年會囝899蜂膠提取物對EDS_76V的滅活作用效果研究王艷,沈志強’,李峰,劉吉山,昊信明,趙蕾,苗立中山東省畜禽用蜂膠疫苗研究開發(fā)推廣中心,山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究所,濱州256600摘要:本文通過鴨胚接種的方法就蜂膠乙醇浸出物對EDS_76V的滅活作用進行了試驗觀察。結果表明,常溫下3分鐘含蜂膠乙醇浸出物lmg/ml的95%乙醇稀釋液,常溫下30分鐘含蜂膠乙醇浸出物0.1mg/ml的95%乙醇稀釋液,37℃3分鐘、30分鐘,含蜂膠乙醇浸出物0lmg/ml的95%乙醇稀釋液,37℃3分鐘,含蜂膠乙醇浸出物25mffml的47.5%乙醇稀釋液
2、,37℃30分鐘,含蜂膠乙醇浸出物12.5mg/ml的475%乙醇稀釋液均對EDs一76株具有完全的滅活作用。常溫下3分鐘含蜂膠乙醇浸出物01mg/ml的95%乙醇稀釋液,常溫下3分鐘含蜂膠乙醇浸出物12.5mg/ml的47.5%乙醇稀釋液,常溫下30分鐘含蜂膠乙醇浸出物5mg/m147.5%乙醇稀釋液,37℃3分鐘,含蜂膠乙醇浸出物125m∥ml的47.5%乙醇稀釋液,37℃30分鐘,含蜂膠乙醇浸出物5m∥ml的47.5%乙醇稀釋液對EDS-76V株有部分滅活作用。關鍵詞:蜂膠;EDS-76v;滅活作用蜂膠(Propels)是蜜蜂從植物的樹芽、樹皮等部
3、位采集的樹脂,再混以蜜蜂舌腺,蠟腺等腺體的分泌物,經(jīng)蜜蜂加工轉化而成的一種膠狀物質。蜂膠內含有多種酸類、醇類、酚類、酮類、醚類、酯類、烯烴和萜類化合物以及20多種黃酮類化合物,還有多種氨基酸、酶和多糖、脂肪酸以及vA、v。、vc等多種維生素。蜂膠中有效成分之復雜,使其成為一種具有廣譜生物學活性的天然物質,可以提高機體的免疫功能,具有抗病菌、霉菌、病毒與原蟲等作用。本文通過鴨胚接種的方法就蜂膠乙醇浸出物對EDS的滅活作用進行了試驗觀察。1材料與方法1.1試驗材料天然蜂膠由山東某蜜蜂養(yǎng)殖場提供,試驗毒株ESD--76(半數(shù)感染量為:10。65,o.1m1)由
4、本所傳代保存,10日齡鴨胚由山東某養(yǎng)殖場提供,95%乙醇購自山東某酒廠,生理鹽水由本所按常規(guī)配制,1%紅細胞由本所按常規(guī)配置。1.2試驗方法1.2.1蜂膠乙醇漫出物的提取按沈志強方法進行1.2.2蜂膠乙醇浸出物對EDS---76株的滅活作用將蜂膠乙醇浸出物分別用95%7,醇、47.5%乙醇與生理鹽水稀釋,使蜂膠含量(m譬,m1)分別為25、125、10、6.25、5、2.5、1、0.1。將EDS--76株用生理鹽水做50倍稀釋,分別與上述含蜂膠乙醇浸出物稀釋液等量混合,根據(jù)作用溫度不同分為兩個試驗組,一組常溫下分別作用3分鐘、30分鐘,另一組37℃分別作
5、用3分鐘、30分鐘。然后各接種10枚10日齡健康鴨胚,接種量為O.2ml/枚。另分別取95%乙醇、47.5%乙醇、生理鹽水與50倍稀釋的EDS病毒液等量混勻,連同50倍稀通訊作者900囝2004學術年會釋的EDS病毒液作為對照組,各接種10枚10日齡健康鴨胚,接種量為o.2mff枚。將上述接種后的鴨胚置孵化器中孵化。1.2.3HA測定將24小時內死亡的鴨胚棄去,48小時后死亡的鴨胚連同孵化至120小時的活胚按試驗組別,分別收取各稀釋度全部鴨胚尿囊液,B微量法測定其HA。1.2.4胚體觀察分別取生理鹽水、12.5%蜂膠乙醇浸出物接種10日齡健康鴨胚各10枚
6、,—㈣—0.2mU枚。將接種后的鴨胚置孵化器內孵化120小時,觀察胚體變化。2結果2.1HA測定B微量法測定試驗各組別鴨胚尿囊液HA,具體結果見表1,同時測定對照組各組別鴨胚尿囊液HA,具體結果見表2。2.2胚體觀察分別取接種生理鹽水、12.5%蜂膠乙醇浸出物鴨胚胚體觀察,兩者均生長良好,無任何差異性變化。蜂膠乙醇浸出物濃度(m∥m1)組別251251062552510.13A0O0O0O04分B89101l鐘C10ll1l1230AO0O0O常溫分B5810鐘C9101l123AO0O0O分BO8101112鐘C9t0111230A0O0O037℃分B
7、0781011鐘C9101112組別95%乙醇+種毒475%乙醇+種毒生理鹽水+種毒種毒稀釋液3分鐘812常溫30分鐘95103分鐘101237℃30分鐘10912說明:“A”組以95%乙醇為稀釋劑,?B組以475%乙醇為稀釋劑,?C’組以生理鹽水為稀釋劑2004學術年會囝9013小結與討論3.1試驗結果表明,常溫下3分鐘含蜂膠乙醇浸出物lmg/ml的95%乙醇稀釋液,常溫下30分鐘含蜂膠乙醇浸出物0.1mg/ml的95%乙醇稀釋液,37℃3分鐘、30分鐘,含蜂膠乙醇浸出物o.1mg/ml的95%乙醇稀釋液,37℃3分鐘,含蜂膠乙醇浸出物25mg/ml的
8、47.5%乙醇稀釋液,37。C30分鐘,含蜂膠乙醇浸出物12.5mg/ml的47