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《枯草芽孢桿菌（bacillus+subtilis）wy45產(chǎn)β甘露聚糖酶的純化與性質(zhì)研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）WY45產(chǎn)β-甘露聚糖酶的純化與性質(zhì)研究姓名：柴萍萍申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：食品科學(xué)與工程指導(dǎo)教師：李里特;江正強20050601中田農(nóng)業(yè)大學(xué)碗士論文中文摘要摘要本文研究了通過篩選得到的枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)WY45產(chǎn)甘露聚糖酶的發(fā)酵條件，并對其所產(chǎn)甘露聚糖酶進行了分離純化．同時對純酶的酶學(xué)性質(zhì)進行了研究。主要結(jié)果有：1．枯草芽孢桿菌(Bacillussubdlis)WY45液體發(fā)酵產(chǎn)生甘露聚糖酶。發(fā)酵培養(yǎng)基經(jīng)優(yōu)化后，在4％的魔芋稽粉為碳源．1．33％1的大豆蛋白胨為氮源，初始pI-1
2、5．5。50℃培養(yǎng)96h的條件下．該菌產(chǎn)酶韻酶活從初始的204u／rat提高到2800u／ml，優(yōu)化提高了13．7倍．優(yōu)化效果明顯，且該酶活水平為現(xiàn)在已報道的同類酶中的最高水平。2．枯草芽孢桿菌(Bacillussub膿)WY45產(chǎn)甘露聚糖酶經(jīng)60-90％硫酸銨沉淀，S-100凝膠過濾層析，QSFF離子交換層析等分離純化步驟后得到電泳純的純酶，最終純化倍數(shù)為6．鵂，酶活回收率為19．80％，經(jīng)SDS．PAGE電泳測定該酶的分子量為44．47kDa。3．pll對該甘露聚糖酶活力的影響很大。該酶的最適反應(yīng)pH為6．o，在5．5-6．5的范圍內(nèi)，酶的相對活力都在∞％以上；當(dāng)pH低于5．0
3、和高于9．0對，活力顯著下降。在40℃下，酶在所采用的p[45．o-11．0的范圍內(nèi)都根穩(wěn)定。該酶的最適反應(yīng)溫度為65℃，大于65"C酶活力即迅速下降，70℃時酶活力水平已低于l礬．大多數(shù)金屬陽離子對該酶活力有提高的作用，特別是C02．和Ni+．關(guān)鍵詞：甘露聚糖酶，枯草芽孢桿菌WY45，發(fā)酵條件，純化與性質(zhì)，魔芋粉中國農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文英文摘要Abstract6-manannaseisallenzymecapableofhydrolyzingB-1,4-D-manno-pyanosyllinkagesofglucomannans,yieldingmanno-oligosacchari
4、desthathavethemarkedeffectontheproliferationofBifidobacte—a．BacillussubtilisWY45wasisolatedfromsoilsamples，whichcanproducehighactivityofextraceellularB-manannase．Themaineesearchcontentsofthisthesisincludethefollowing：optimizingthecuRureconditionsofthefermentation，purifyingtheB-manannaseproduce
5、dbyBacillussubtilisWY45andfindingoutthemaincharacterizationsofthepurifiedenzyme．Theresultsshowedthat：1．BacillussubtilisWY45grewbestwhenculturedat50℃withthemediumcomposedof4％konjacpowderaScar-bonsoarr=c，1．33％soyapeptoneasnitrogenSOUrCO，andadjustingpHto5．5．After96hoursculturing，theenzymecouldsho
6、wthehighestactivityas2800u／mlanditisthehighestvalueasfarasnow．2．TheB-manannasewaspurifiedtohomogeneRybyammoniumsulfatc(60-90％)precipitation，SephacrylS·100gclfiltrationchromatographyandtheQ-sepharoseionexchangecbdomatogramphy．InSDS-PAGEasingleproteinstrip啪beseen．Themolecularweightofthepurifiede
7、nzymeWas44．47kDa．；．TheenzymeWassensitivetothetemperatureandpH,andthemaximumenzyme。activityexistedat65"C，andtheoptimizedpHWas6．0．ItWaSstableatpH5．5·6．5，below50"(2．Mostmemalionscouldenhancetheenzymeactivity,espeeianyC02．a(chǎn)ndNi+。Keywords：ma
