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1、課題結題報告結題報告腎早期損傷定位標志物研究重慶三峽中心醫(yī)院杜紅心立項依據研究內容研究結果項目完成情況預實驗結果經費來源一、立項依據研究背景妊娠期糖代謝異常：包括妊娠期糖耐量受損（GIGT）和妊娠期糖尿?。℅DM）。GIGT：一組已有糖代謝異常并可能向糖尿病發(fā)展的病理生理過程的中間階段。GDM：妊娠期首次發(fā)生或發(fā)現的不同程度的糖代謝異常。近年的研究表明,GDM與GIGT的總體發(fā)病率逐年升高,達7.61%。追蹤研究顯示30%-50%的GDM患者可在遠期發(fā)生糖尿病，且有糖尿病家族史者，GDM患病機率增加，提示其有一定的免疫遺傳學背景。
2、研究背景妊娠期糖代謝異常對妊娠的影響最常見的是導致巨大兒、胎兒窘迫和新生兒低血糖的發(fā)生；以及并發(fā)血管病變，增加妊娠期高血壓和手術產的發(fā)生率。國內外的數據表明：未治療的GDM孕婦并發(fā)癥明顯增加，且圍生兒患病率主要與治療早晚有關，證明早期篩查、診斷、干預可以降低孕產婦的并發(fā)癥及圍生兒患病率。研究背景妊娠期糖代謝異常的發(fā)生與遺傳、環(huán)境及生活習慣密切相關,近年來國內外的研究表明,某些基因的多態(tài)性對妊娠期糖代謝異常的發(fā)生可能具有重要作用。如：葡萄糖轉運蛋白基因、葡萄糖激酶基因、磺脲類藥物受體基因、胰島素受體底物基因、人類主要組織相容性基因復
3、合體以及鈣蛋白酶-10基因、尾加壓素Ⅱ基因、腫瘤壞死因子-α基因等均與妊娠期糖代謝異常發(fā)病有一定關聯。立項依據但是目前已有的研究成果還存在爭議,引起疾病的責任基因及其作用機理尚未明確。因此對致病基因的研究已日益成為臨床診療的迫切需要。探究及篩選與妊娠期糖代謝異常相關的基因多態(tài)性,將會對妊娠合并糖尿病、GDM及GIGT的預防、治療、改善預后及提高廣大妊娠婦女圍產期的生命質量起到十分積極而重要的作用。同時,對節(jié)約醫(yī)療資源、提高出生人口質量也將有十分重要的意義。立項依據二、研究內容對葡萄糖轉運蛋白基因、磺脲類藥物受體基因、人類主要組織相
4、容性復合體基因、鈣蛋白酶-10基因、尾加壓素Ⅱ基因等五個可能的糖代謝異常相關基因及其相關位點的多態(tài)性進行研究，以明晰它們與妊娠期糖代謝異常的發(fā)生發(fā)展的關系。觀察可能與GIGT、GDM及T2DM的發(fā)生有關的危險因素。研究內容關鍵技術或方法1采用酚-氯仿法提取基因組DNA23PCR技術擴增目的基因片段PCR-RFLP方法檢測基因型4logistic回歸進行數據分析研究對象NGT組GIGT組GDM組T2DM組100例,貴陽醫(yī)學院附屬醫(yī)院內分泌科100例,貴陽市婦幼保 健院門診健康體檢者各100例,貴陽市婦幼保 健院門診患者實驗方法1.G
5、DM及GIGT的診斷方法（NDDG標準）◆1、50g葡萄糖負荷試驗篩查,＞7.8mmol/L為陽性者做糖耐量試驗(OGTT)?！?、OGTT試驗：抽血前禁食8～12h,75g葡萄糖溶300ml水中3～5min服完,查空腹及服糖后1、2、3h血糖。兩次≥5.8、10.6、9.2、8.1mmol/L者診斷為GDM；兩次空腹血糖≥5.8或糖篩≥10.6mmol/L,空腹血≥5.8mmol/L即診斷為GDM。◆OGTT4項中任何一項異常或第2小時≥6.7mmol/L診斷為GIGT。診斷標準2.T2DM的診斷標準（1999年WHO標準）◆糖
6、尿病癥狀+任意時間血漿葡萄糖水平≥11.1mmol/L或◆空腹血漿葡萄糖(FPG)水平≥7.0mmol/L或◆OGTT試驗中，2h-PG水平≥11.1mmol/L診斷標準全血DNA的提取PCR-RFLP、PCR-AFLP凝膠電泳分離收集標本PCR擴增目的片段基因型的判定數據處理實驗步驟計數資料：基因頻率及基因型頻率：計量資料：危險因素采用logistic回歸分析百分數描述（?X±S）描述，采用t檢驗Hardy-Weinberg平衡檢驗；卡方檢驗，P＜0.05統計學處理數據分析及處理：三、研究結果實驗數據及圖表：12型:404,37
7、2bp11型:372bp22型:404bpCAPN-1019位點多態(tài)性分析：CAPN-1043位點多態(tài)性分析：GG型:144bpAA型:121,23bpGA型:144,121,23bpCAPN-1063位點多態(tài)性分析：CT型:192,162,30bpTT型:192bpCC型:162,30bp相關危險因素分析：單因素logistic回歸分析結果相關危險因素分析：多因素logistic回歸分析結果 （GIGT組、GDM組與NGT組）相關危險因素分析：多因素logistic回歸分析結果 （T2DM組與NGT組）項目完成情況：主要考核指標
8、完成情況：①對7個可能相關的基因及其相關位點的多態(tài)性與妊娠期糖代謝異常的關系進行研究，明晰了它們與妊娠期糖代謝異常相關疾病的發(fā)生和發(fā)展之間的關系；②根據實驗室數據及統計結果，我們可以得出以下結論：可能與妊娠期糖代謝異常發(fā)病相關目的基因及其位點7個，
