檢驗核醫(yī)學(xué)核素示蹤技術(shù)

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1、檢驗核醫(yī)學(xué)第四章放射性核素示蹤技術(shù)核素示蹤的原理與設(shè)計核素示蹤的原理一、根據(jù)同位素核素化學(xué)性質(zhì)相同的原理二、根據(jù)同位素核素物理性質(zhì)不同的原理1放射性核素的可測性測β、γ等2穩(wěn)定性核素的可測性(1)測穩(wěn)定性核素的“原子百分超”(2)活化分析核素化學(xué)核素核子數(shù)目在自然界中的核素名稱符號符號A=P+N百分?jǐn)?shù)(%)穩(wěn)定性氫H11H1=1+099.9844穩(wěn)定氘D21H2=1+10.0156穩(wěn)定氚T31H3=1+2極少不穩(wěn)定核素示蹤實驗設(shè)計一、依據(jù)1實驗?zāi)康?1)功能分布、代謝、細胞周期(2)形態(tài)2實驗周期二、核素或其標(biāo)記物的選

2、擇1放射性核素(1)射線的種類β、γ、β+γ、K-EC源(2)射線的能量適中，不能太低(據(jù)測量儀器)(3)半衰期(T1/2、Tp)據(jù)實驗周期、Tb、Te(4)放射化學(xué)純度>95%(5)放射性比活度盡可能高，靈敏度高放射性核素或其標(biāo)記物的原始用量ACEACE最?。骸?B，最好：——≥10BDD2穩(wěn)定性核素或其標(biāo)記物考慮“原子百分超”3核素的理化性質(zhì)(1)核素本身不是化學(xué)毒劑如7533As2O3(2)核素本身不是物理毒劑如21H4核素的生物半衰期Tb、有效半衰期TeTp+TbTe=————Tp×Tb5核素的標(biāo)記位置分布

3、、排泄：穩(wěn)定位置代謝轉(zhuǎn)化：可能的代謝位置6標(biāo)記物最好是實驗示蹤物的最佳前身如TdR是DNA的最佳前身，UdR是RNA的最佳前身三、測量儀器的選擇1放射性核素的測量儀器(1)γ放射性核素：AG-M計數(shù)器B正比計數(shù)器C半導(dǎo)體計數(shù)器D固體閃爍計數(shù)器(2)硬β放射性核素：云母窗鐘罩型G-M計數(shù)器32P在水中用液體閃爍計數(shù)器測量(3)軟β放射性核素：3H,14C,35S液體閃爍計數(shù)器測量(4)放射自顯影技術(shù)：宏觀、光鏡、電鏡自顯影2穩(wěn)定性核素的測量儀器(1)質(zhì)譜儀(2)色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(3)核磁共振譜儀(4)活化分析四、核素示蹤

4、實驗的特點優(yōu)點1靈敏度高2精確定位3方法簡單4符合生理條件缺點1輻射生物效應(yīng)22H有物理毒性3穩(wěn)定核素測量儀器昂貴核素稀釋法基本原理化學(xué)物質(zhì)在稀釋前后質(zhì)量不變。一定比活度的放射性核素或標(biāo)記物與其非標(biāo)記化合物均勻混合后，混合物的放射性活度不變但比活度下降。設(shè)：稀釋前標(biāo)記物質(zhì)量m1，比活度s1加入非標(biāo)記物質(zhì)量m2，稀釋后標(biāo)記物比活度s2則：s1m1=s2（m1+m2）若：m2>>m1上式簡化為：s1m1=s2m2單位：m（mmol，mg），s（dpm/mmol，mg）基本方法1正稀釋法用已知量標(biāo)記物測定未知量非標(biāo)記物應(yīng)用一

5、：體外標(biāo)本定量已知s1，m1，混合后測定s2，求m2m2=（s1-s2）m1/s2應(yīng)用二：體內(nèi)組分容量測定已知V1，C1，混合后測定C2，求V2V2=（C1-C2）V1/C2單位：V（ml），C（dpm/ml）2反稀釋法用已知量非標(biāo)記物測定未知量標(biāo)記物（1）標(biāo)本中有多種標(biāo)記物應(yīng)用一：藥代動力學(xué)研究，s1已知。已知s1，m2，混合后測定s2，求m1m1=s2m2/（s1-s2）應(yīng)用二：雙稀釋法，s1未知。取雙份等量待測標(biāo)記物（A相同）分別加入不同量的非標(biāo)記物混合。已知m2，m3，混合后測定s2，s3，求m1s2（m1+m

6、2）=s3（m1+m3）m1=（s3m3-s2m2）/（s2-s3）（2）標(biāo)本中只有一種標(biāo)記物先測定待測標(biāo)記物的放射性活度，再加入非標(biāo)記物混合。已知A，m2，混合后測定s2，求m1，s1A=s2（m1+m2）m1=（A/s2）-m2A=s1m1，s1=A/m1建立核素稀釋法的條件1正確選用標(biāo)記化合物（1）標(biāo)記化合物與待測物應(yīng)具有完全相同的化學(xué)性質(zhì)（2）標(biāo)記原子應(yīng)在化合物的穩(wěn)定位置上（3）標(biāo)記物必須無毒性（4）標(biāo)記物應(yīng)有足夠高的化學(xué)純度和放化純度2保證準(zhǔn)確的稀釋度3建立可靠的樣品分離和純化方法物質(zhì)轉(zhuǎn)化示蹤技術(shù)參入實驗方法

7、研究生物體系中化合物A與B是否前身物與產(chǎn)物關(guān)系A(chǔ)→B前身物產(chǎn)物方法：1A→?A2引入體內(nèi)3分離出?B4測量放射性測量，化學(xué)量測量常用離體參入實驗法，包括組織切片、組織勻漿、游離細胞、亞細胞顆?；驘o細胞酶系統(tǒng)等參入實驗參數(shù)：1參入百分率＝B總放射性(cpm)/A總放射性(cpm)2相對比活度(參入率)＝B比活度/A比活度3百萬細胞放射性計數(shù)(cpm/106cell)刺激指數(shù)＝刺激組(cpm)/對照組(cpm)應(yīng)用：3H－TdR參入實驗：從3H－TdR參入DNA的量作為細胞轉(zhuǎn)化能力（增殖速度）的指標(biāo)，比較正常、病理狀態(tài)以及

8、外界干預(yù)等情況注意：1參入時間，S期參入量大2收集細胞用過濾法（玻璃纖維濾膜、微孔濾膜）放射自顯影術(shù)概念放射性核素所產(chǎn)生的射線直接作用于感光材料，使其產(chǎn)生潛影，經(jīng)顯影、定影處理而得到與放射性核素所在部位、強度一致的由銀顆粒組成的影像。這種利用感光材料檢查、記錄和測量放射性示蹤劑在生物體內(nèi)位置和數(shù)量的方法，稱為放射自顯影術(shù)，所得到的