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1、RadionuclideTracingTechnique放射性核素示蹤技術(shù)核醫(yī)學(xué)教研室孫俊杰2021/7/281Introduction概述放射性核素示蹤技術(shù)是核醫(yī)學(xué)診斷與研究的方法學(xué)基礎(chǔ)。核醫(yī)學(xué)任何診斷技術(shù)和方法都是建立在示蹤技術(shù)的基礎(chǔ)之上的。沒(méi)有示蹤原理就沒(méi)有核醫(yī)學(xué)。2021/7/282什么是示蹤技術(shù)?Whatistracingtechnique?什么是示蹤?什么是放射性核素示蹤技術(shù)?2021/7/2831923年Hevesy212Pb→植物不同部位鉛含量32P→磷在生物體內(nèi)代謝1952年Hershey32P、35S→DNA遺傳信息1959年Berson
2、、Yalow→RIAMeselson、Stahl→DNA半保留復(fù)制RNA-DNA逆轉(zhuǎn)錄、遺傳的三聯(lián)密碼、細(xì)胞周期、微量物質(zhì)測(cè)量等均離不開(kāi)示蹤技術(shù)。2021/7/284第一節(jié)核素示蹤原理與特點(diǎn)2021/7/285為什么用放射性核素作為示蹤劑?2021/7/28635S32P35S32P子代分離蛋白質(zhì)外殼及DNA內(nèi)核,并測(cè)量放射性蛋白質(zhì)外殼無(wú)放射性,DNA上有放射性!DNA是遺傳物質(zhì)!2021/7/287一、示蹤原理(Principle)1、示蹤劑與被示蹤物有同一性(同一性)放射性核素或標(biāo)記化合物(示蹤劑)與相對(duì)應(yīng)的同位素和化合物(被示蹤物)具有相同的化學(xué)和生物
3、學(xué)特性,同樣參與轉(zhuǎn)化過(guò)程,因此基本上能夠反映被研究物質(zhì)的行為。被標(biāo)記的物質(zhì)也能代表非標(biāo)記物的行為。2021/7/2882、示蹤劑與被測(cè)物質(zhì)的可區(qū)別性(可測(cè)性)放射性核素能自發(fā)地放射出射線。利用高靈敏度的儀器可對(duì)示蹤劑進(jìn)行精確的定量、定位、定性探測(cè)。動(dòng)態(tài)觀察各種物質(zhì)在生物體內(nèi)的量變規(guī)律。一、示蹤原理(Principle)2021/7/289二、核素示蹤實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)靈敏度高:標(biāo)記物比放高,化學(xué)量小,作超微量分析可達(dá)ng~pg。特異性強(qiáng):每一種檢測(cè)項(xiàng)目,都有專(zhuān)一的標(biāo)記物。方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確性好:核射線的測(cè)量受外界、pH、溫度等條件影響小。符合生理?xiàng)l件:體內(nèi)核醫(yī)學(xué)的各種檢
4、查,不干擾機(jī)體內(nèi)環(huán)境,對(duì)細(xì)胞代謝無(wú)損傷。定性、定量、定位檢測(cè)和研究:除超微量分析外,與電鏡結(jié)合能進(jìn)行亞細(xì)胞水平的定位分析。2021/7/2810三、基本類(lèi)型1、整體示蹤2、離體示蹤3、雙(多)標(biāo)記示蹤2021/7/2811四、示蹤實(shí)驗(yàn)方法學(xué)1、選擇合適示蹤劑2、選擇合適測(cè)定方法3、示蹤劑量的估算4、示蹤劑的引入途徑5、放射性樣品的制備6、數(shù)據(jù)采集2021/7/28121、選擇合適的示蹤劑(1)射線類(lèi)型(2)半衰期(3)放化純度(4)衰變產(chǎn)物的毒性(5)比活度(6)核素標(biāo)記位置2021/7/28132、選擇合適的測(cè)定方法根據(jù)射線類(lèi)型采用不同的測(cè)定方法β射線多用
5、液閃測(cè)量,γ射線多采固體閃爍測(cè)量,而α射線由于其發(fā)射體核素多有毒,故不常采用。此外,還可以采用放射自顯影、動(dòng)物用SPECT/PET來(lái)進(jìn)行測(cè)量。2021/7/28143、示蹤劑的估算示蹤劑用量最好是通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。原始比活度的可根據(jù)下式計(jì)算:ACE/D>2BA:原始比活度C:原始放射性示蹤劑用量E:儀器的探測(cè)效率D:稀釋倍數(shù)B:儀器的本底2021/7/2815例:靜脈注射示蹤劑,被觀察組織攝取該示蹤劑的量約占總量的1%,擬10天后取樣,在此期間示蹤劑從該組織中消失約為攝入量的90%,取樣約占該組織的10%,儀器測(cè)量效率為50%,本底為125cpm。計(jì)算:最少
6、放射性dpm:125×2÷50%=500dpm取樣時(shí)該組織的總dpm:500÷10%=5000dpm初始時(shí)該組織的總dpm:5000÷(1-90%)÷1%=5×106dpm初始引入的示蹤劑用量:5×106÷60=83.8KBq2021/7/28164、示蹤劑的引入途徑5、放射性樣品的制備6、數(shù)據(jù)采集2021/7/2817第二節(jié)相關(guān)核素示蹤技術(shù)一、核素稀釋法二、物質(zhì)轉(zhuǎn)化示蹤技術(shù)三、物質(zhì)吸收、分布、排泄四、細(xì)胞動(dòng)力學(xué)五、核素示蹤動(dòng)力學(xué)2021/7/2818一、核素稀釋法1、基本原理根據(jù)化學(xué)物質(zhì)稀釋前后質(zhì)量相等的原理,即已知比活度為S1、質(zhì)量為m1的標(biāo)記物和質(zhì)量為
7、m2的同一種化學(xué)形態(tài)的非標(biāo)記物均勻混合時(shí),標(biāo)記分子被非標(biāo)記物稀釋?zhuān)旌衔锏谋然疃萐2比S1低,混合前后總放射性相等。即:S2(m1+m2)=S1m1若m2>>m1,則:S2m2=S1m12021/7/2819如分析對(duì)象為液體,以及稀釋前后物質(zhì)在深液中的濃度基本不變,則可用放射性濃度(如dpm/ml)代替放射性比活度,用稀釋前后的v代替質(zhì)量m,則上式可寫(xiě)成:C2(v1+v2)=C1v1若C2>>C1,則:C2v2=C1v12021/7/28202、正稀釋法用已知量的標(biāo)記物為示蹤劑來(lái)測(cè)定未知量的非標(biāo)記物的稀釋法稱為核素正稀釋法。求m2(v2)2021/7/282
8、1例1:用放射性濃度為3×106cpm/ml的125