最新檢驗(yàn)核醫(yī)學(xué)(核素示蹤技術(shù))課件ppt.ppt

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1、檢驗(yàn)核醫(yī)學(xué)(核素示蹤技術(shù))核素示蹤的原理與設(shè)計(jì)核素示蹤的原理一、根據(jù)同位素核素化學(xué)性質(zhì)相同的原理二、根據(jù)同位素核素物理性質(zhì)不同的原理1放射性核素的可測性測β、γ等2穩(wěn)定性核素的可測性(1)測穩(wěn)定性核素的“原子百分超”(2)活化分析核素化學(xué)核素核子數(shù)目在自然界中的核素名稱符號(hào)符號(hào)A=P+N百分?jǐn)?shù)(%)穩(wěn)定性氫H11H1=1+099.9844穩(wěn)定氘D21H2=1+10.0156穩(wěn)定氚T31H3=1+2極少不穩(wěn)定四、核素示蹤實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)1靈敏度高2精確定位3方法簡單4符合生理?xiàng)l件缺點(diǎn)1輻射生物效應(yīng)22H有物理毒性3穩(wěn)定核

2、素測量儀器昂貴核素稀釋法基本原理化學(xué)物質(zhì)在稀釋前后質(zhì)量不變。一定比活度的放射性核素或標(biāo)記物與其非標(biāo)記化合物均勻混合后,混合物的放射性活度不變但比活度下降。設(shè):稀釋前標(biāo)記物質(zhì)量m1,比活度s1加入非標(biāo)記物質(zhì)量m2,稀釋后標(biāo)記物比活度s2則:s1m1=s2(m1+m2)若:m2>>m1上式簡化為:s1m1=s2m2單位:m(mmol,mg),s(dpm/mmol,mg)基本方法1正稀釋法用已知量標(biāo)記物測定未知量非標(biāo)記物應(yīng)用一:體外標(biāo)本定量已知s1,m1,混合后測定s2,求m2m2=(s1-s2)m1/s2應(yīng)用二:體內(nèi)組分

3、容量測定已知V1,C1,混合后測定C2,求V2V2=(C1-C2)V1/C2單位:V(ml),C(dpm/ml)2反稀釋法用已知量非標(biāo)記物測定未知量標(biāo)記物(1)標(biāo)本中有多種標(biāo)記物應(yīng)用一:藥代動(dòng)力學(xué)研究,s1已知。已知s1,m2,混合后測定s2,求m1m1=s2m2/(s1-s2)應(yīng)用二:雙稀釋法,s1未知。取雙份等量待測標(biāo)記物(A相同)分別加入不同量的非標(biāo)記物混合。已知m2,m3,混合后測定s2,s3,求m1s2(m1+m2)=s3(m1+m3)m1=(s3m3-s2m2)/(s2-s3)(2)標(biāo)本中只有一種標(biāo)記物先

4、測定待測標(biāo)記物的放射性活度,再加入非標(biāo)記物混合。已知A,m2,混合后測定s2,求m1,s1A=s2(m1+m2)m1=(A/s2)-m2A=s1m1,s1=A/m1建立核素稀釋法的條件1正確選用標(biāo)記化合物(1)標(biāo)記化合物與待測物應(yīng)具有完全相同的化學(xué)性質(zhì)(2)標(biāo)記原子應(yīng)在化合物的穩(wěn)定位置上(3)標(biāo)記物必須無毒性(4)標(biāo)記物應(yīng)有足夠高的化學(xué)純度和放化純度2保證準(zhǔn)確的稀釋度3建立可靠的樣品分離和純化方法物質(zhì)轉(zhuǎn)化示蹤技術(shù)參入實(shí)驗(yàn)方法研究生物體系中化合物A與B是否前身物與產(chǎn)物關(guān)系A(chǔ)→B前身物產(chǎn)物方法:1A→?A2引入體內(nèi)3分離

5、出?B4測量放射性測量,化學(xué)量測量常用離體參入實(shí)驗(yàn)法,包括組織切片、組織勻漿、游離細(xì)胞、亞細(xì)胞顆?;驘o細(xì)胞酶系統(tǒng)等參入實(shí)驗(yàn)參數(shù):1參入百分率=B總放射性(cpm)/A總放射性(cpm)2相對(duì)比活度(參入率)=B比活度/A比活度3百萬細(xì)胞放射性計(jì)數(shù)(cpm/106cell)刺激指數(shù)=刺激組(cpm)/對(duì)照組(cpm)應(yīng)用:3H-TdR參入實(shí)驗(yàn):從3H-TdR參入DNA的量作為細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力(增殖速度)的指標(biāo),比較正常、病理狀態(tài)以及外界干預(yù)等情況注意:1參入時(shí)間,S期參入量大2收集細(xì)胞用過濾法(玻璃纖維濾膜、微孔濾膜)放射

6、自顯影術(shù)概念放射性核素所產(chǎn)生的射線直接作用于感光材料,使其產(chǎn)生潛影,經(jīng)顯影、定影處理而得到與放射性核素所在部位、強(qiáng)度一致的由銀顆粒組成的影像。這種利用感光材料檢查、記錄和測量放射性示蹤劑在生物體內(nèi)位置和數(shù)量的方法,稱為放射自顯影術(shù),所得到的圖像,稱為放射自顯影像。放射自顯影術(shù)和放射自顯影像可簡稱為自顯影(ARG)。特點(diǎn)1具有累積成像的效應(yīng),靈敏度高。2液體核乳膠及3H標(biāo)記物應(yīng)用,分辨率可達(dá)光鏡1μm,電鏡0.1μm3圖像逼真直觀,定位準(zhǔn)確。宏觀自顯影整體分布光鏡自顯影組織或細(xì)胞內(nèi)的分布電鏡自顯影細(xì)胞亞顯微(超微)結(jié)構(gòu)

7、的定位4在保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整下研究生物大分子。5可以把形態(tài)結(jié)構(gòu)與放射性物質(zhì)的行徑動(dòng)態(tài)過程(功能)有機(jī)結(jié)合。放射自顯影的原理(1)AgBr(明膠)+β→Ag+Br+e-(2)e-+Ag+→Ag(3)Ag??????Ag→nAg(4)經(jīng)顯影、定影處理顯示出影像負(fù)片光學(xué)攝影被照物明,反射光線強(qiáng),底片黑度高被照物暗,反射光線弱,底片黑度低正片放射自顯影核射線強(qiáng),自顯影像黑度高核射線弱,自顯影像黑度低實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制備與滅菌微生物與發(fā)酵工藝玲噴劃婁初病韋呻站弓蝎酸而茬熾省吟弗伶底大肯翌渺霉嘻辱目嘴鍬沖峙實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)

8、五培養(yǎng)基的制與滅菌一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)會(huì)一般培養(yǎng)基的制備原理、方法。2.掌握培養(yǎng)基及器皿的滅菌方法。恭雕兇匠忿傍灘蚜梁猴這廓眶操墮門寓弘溯尊哉矽拓軟胺枕盧劣勝饅噴比實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌培養(yǎng)基是根據(jù)微生物生長繁殖的營養(yǎng)需要,用人工方法配制而成的基質(zhì),其中含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽及各種生長因子。培養(yǎng)基可為微生物的生長提供能源

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