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《反相高效液相色譜法測定半枝蓮中原兒茶酸的含量 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、反相高效液相色譜法測定半枝蓮中原兒茶酸的含量【摘要】目的建立半枝蓮藥材中原兒茶酸的含量測定方法。方法樣品用30％的乙醇回流提取，提取液濾過，以反相高效液相色譜(RP-HPLC)法測定。用DiamonsilTMC18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），以甲醇-0.05％磷酸為流動相，流速為1.0ml·min-1，檢測波長為258nm。結(jié)果原兒茶酸的保留時間約為7min，且與其它峰的分離度大于1.5。原兒茶酸的線性范圍為0.018～0.184μg（r=0.9998），最低檢測限為3ng，平均回收率和RSD分別為99.7%和0.27%。結(jié)論該方法簡便快速，結(jié)果準確可靠，可為半枝蓮藥材的質(zhì)
2、量評價提供有效手段。【關(guān)鍵詞】反相高效液相色譜法半枝蓮原兒茶酸含量測定 RP-HPLCDeterminationofProtocatechuicAcidinScutellariabarbara Abstract:ObjectiveToestablishamethodtodeterminethecontentofprotocatechuicacidinScutellariabarbara.MethodsThesampleinationofprotocatechuicacidinScutellariabarbata.ThechromatographicprocedureonsilTMC1
3、8asananalyticcolumnandamixtureof25volumeofmethanol,75volumeof0.05%phosphoricacidasamobilephaseataflol·min-1.Thedetection.ResultsThepeakofprotocatechuicacidappearedforabout7minutes.Resolutionofprotocatechuicacidorethan1.5anditslinearrangeinimumlimitofdetectionethodissensitiveandquickandcanbeusedfo
4、rthequalitycontrolofScutellariabarbara. KeypoonsilTMC18分析柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：甲醇-0.05%磷酸；流速：1.0ml·min-1；檢測波長：258nm；進樣量均為20μl；靈敏度：2.0AUFS。在以上色譜條件下，樣品中原兒茶酸與其它組分的色譜峰分離度良好。見圖1。 2.2供試品溶液的制備取本品粉末（過60目篩）約2g，精密稱定，置50ml圓底燒瓶中，精密加入30%乙醇25ml，稱定重量，回流1h。放冷，稱定重量，用30%乙醇補充減失的量，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得?！ ?.3對照品貯備液
5、的制備精密稱取原兒茶酸對照品適量，加甲醇制成每毫升含0.092mg的溶液，即得?！ ?.4標準曲線的繪制及線性范圍分別精密量取原兒茶酸對照品貯備液0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.0ml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，得不同濃度的對照品溶液。分別吸取20μl注入液相色譜儀，測定峰面積。以進樣量X（μg）為橫坐標，峰面積（×107）Y為縱坐標，繪制標準曲線，經(jīng)回歸處理得回歸方程為：Y＝4.0946X－0.0014，r＝0.9998（n＝6）。原兒茶酸在0.018～0.184μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好?！ ?.5穩(wěn)定性實驗分別于0，2，4，6，8，24h精密吸取
6、供試品溶液，進樣測定，按上述色譜條件測定峰面積。供試品溶液于24h內(nèi)，色譜峰面積無明顯變化，RSD為0.63%。結(jié)果表明在24h內(nèi)供試品溶液穩(wěn)定?！ ?.6精密度實驗精密吸取上述供試品溶液，連續(xù)進樣6次，按上述色譜條件測定峰面積。原兒茶酸峰面積的RSD為0.41%，表明該法的精密度良好?！ ?.7重復(fù)性實驗取同一批半枝蓮藥材粉末（過60目篩）約2g，共6份，精密稱定，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，按上述色譜條件測定，計算含量，其RSD為0.86%，表明該法重現(xiàn)性良好?！ ?.8最低檢測限實驗取上述對照品貯備液，逐步稀釋，進樣，直至信噪比S/N≥3，此時進樣量即為最低檢測限。原兒茶酸
7、的最低檢測限為3ng?！ ?.9回收率實驗取已知原兒茶酸含量為59.61μg·g-1的半枝蓮藥材粉末（過60目篩）約1g，共6份，精密稱定。分別精密量取上述原兒茶酸對照品儲備液0.7ml，加入上述6份藥材中，按“2.2”項下方法操作制備供試品溶液。測定其平均回收率為99.7%，RSD為0.27%?？梢姳痉椒ǖ臏蚀_度高，精密度好，方法可行?！ ?.10樣品測定取24批半枝蓮藥材粉末（過60目篩）約2g，精密稱定，按“2.2”項下制備供
