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1、鉛暴露對豬免疫功能影響【】目的探討飼料中添加不同劑量鉛對豬免疫功能的影響。方法將24頭14~17kg仔豬隨機分為4組,用正常飼料和分別添加5,15,45mg/kg(分別為低、中、高劑量組,均按含鉛量計)醋酸鉛的飼料對其進行90d攻毒飼養(yǎng)試驗。測定豬血液中白細胞數量(、igg、iga)、和補體(c3,c4)含量,并使用四甲基偶氮噻唑鹽(mtt)法檢測血液中t淋巴細胞活力。結果低劑量組t淋巴細胞活力降低29.3%,與對照組比較差異有統計學意義(p0.05);中劑量組iga含量下降0.12g/l,t淋巴細胞活力降低25.2%,與對照組比較差異均有統計學意義(p0.05);高劑量
2、組的白細胞(、igg、iga、c3含量分別下降4.3×109,1.48,0.13,0.14,0.31g/l,t淋巴細胞活力下降37.4%,與對照組比較差異均有統計學意義(p0.05)。結論飼料中含鉛量達到5mg/kg時影響豬免疫功能,高于45mg/kg時可導致豬免疫力顯著降低【關鍵詞】鉛;飼料;豬;免疫功能effectofleadexposureonimmunefunctioninpigsin,guoboli,etal.collegeofveterinarymedicine,northmunefunctionofpigs.methodstlydividedintofou
3、rgroupsandalfeedsandfeedsg/kg(log/kg(mediumdose),45mg/kg(highdose),respectively.thenumberof,iggiga,c3,c4levelinserumeasuredandtlymphocyteactivityinedbymttmethod.resultstlymphocyteactivityinlophocyteactivityinthemediumdosegroupdecreasedby0.12g/land25.2%,respectively,pared,iggigaandc3inhi
4、ghdosegroupdecreasedby4.3×109/l,1.48g/l,0.13g/l,0.14g/l,0.31g/l,respectively.munityofpigscouldbeaffectedbyleadinfeedg/kg,andcouldbesignincantlydereasedg/kg.keymunefunction近年來,伴隨飼料工業(yè)的發(fā)展,為滿足畜禽快速生長需要,我國畜牧業(yè)生產過程中存在盲目向飼料中添加過多微量元素的現象,導致飼料中鉛超標的情況時有發(fā)生,對畜禽健康和食品安全造成潛在的危害〔1〕。.133229.有研究表明,長期低劑量鉛暴露可以抑
5、制t淋巴細胞的增殖和分化〔2,3〕,并導致血清中免疫球蛋白igm,igg含量降低〔4〕。本研究觀察飼料中添加不同劑量鉛對豬免疫機能的影響,找出飼料中鉛含量與豬免疫毒性的劑量-效應關系,為國家制定飼料中鉛含量限量標準提供理論依據。1材料與方法1.1材料與儀器健康商品仔豬24頭,雌雄各半(陜西楊陵上河豬場),體重14~17kg;醋酸鉛(純西安化學試劑廠);胎牛血清培養(yǎng)液(dmem)(美國gibco公司);植物凝集素(ppha-p)(美國sigma公司);二甲基亞砜(dmso,美國sigma公司);豬淋巴細胞分離液(天津灝洋生物制品科技責任公司);標準胎牛血清(天津灝洋生物制品
6、科技責任公司);xd811l生化分析儀(上海迅達醫(yī)療儀器有限公司);ca500三分類血液分析儀(日本埃爾瑪公司);ckx41倒置顯微鏡(日本olympus公司);mco-15ac二氧化碳培養(yǎng)箱(日本sanyo公司);dg5030多孔酶標測定儀(國營華東電子管廠)。1.2分組與染毒24頭豬隨機分為4組,每組6頭,分別為對照組和低、中、高劑量組(飼料中分別添加鉛5.0,15.0,45.0mg/kg)。正常飼料適應性飼養(yǎng)10d后,攻毒飼養(yǎng)持續(xù)90d。1.3血液中白細胞數量分析采用乙二胺四乙酸鈉(edta-na)真空采采取豬血管抗凝血,血液分析儀測定全血中白細胞數量。1.4t淋巴
7、細胞活力測定采用t淋巴細胞轉化試驗測定t淋巴細胞轉化率。于豬前腔靜脈采取無菌抗凝血,經豬淋巴細胞分離液分離出淋巴細胞,顯微鏡下稀釋至5×106個/ml,加入含pha-p的dmem培養(yǎng)藏100μl(pha-p終濃度為9μg/ml),co2培養(yǎng)箱孵育68h,之后加入四甲基偶氮噻唑藍(mtt5mg/ml)10μl,繼續(xù)孵育4h,加入100μldmso,輕微振蕩10min,利用酶標儀在490nm波長下測定其吸光度(a)值。用加pha-p孔的吸光度值減去不加pha-p孔的吸光度值代表淋巴細胞的活力。1.5免疫球蛋白(igm,igg,lg