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《現(xiàn)代生物技術(shù)在食品檢驗中的應(yīng)用》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、現(xiàn)代生物技術(shù)在食品檢驗中的應(yīng)用摘要:本文對在食品檢驗中應(yīng)用的幾種典型的現(xiàn)代生物技術(shù)進行了綜述。主要包括免疫技術(shù)、酶技術(shù)、核酸探針技術(shù)、多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)、基因芯片技術(shù)和免疫傳感器技術(shù)在食品基本成分、食品添加劑、食品中污染物質(zhì)、生物活性物質(zhì)及微生物等的檢測中的應(yīng)用。 關(guān)鍵詞:現(xiàn)代生物檢測技術(shù)食品檢驗 1.現(xiàn)代生物技術(shù)在食品檢驗中應(yīng)用的意義 食品檢驗檢測對于保障食品安全、促進食品生產(chǎn)水平都起著及其重要的作用。長期以來獲得廣泛應(yīng)用的物理、化學(xué)、儀器等檢測方法,由于存在某些局限,已不能滿足現(xiàn)代食品檢測的
2、需要,隨著生物技術(shù)的發(fā)展,人們已逐步認識到生物技術(shù)在食品檢驗中的重要作用及其意義?! ∩锛夹g(shù)檢測方法以自身獨特優(yōu)勢在食品檢驗中顯示出巨大的應(yīng)用潛力,其應(yīng)用幾乎涉及到了食品檢驗的各個方面,包括食品的品質(zhì)評價、質(zhì)量監(jiān)督、生產(chǎn)過程的質(zhì)量監(jiān)控及食品科學(xué)研究?! ∩锛夹g(shù)檢測方法不僅具有特異的生物識別功能、極高的選擇性,而且它可與現(xiàn)代的物理化學(xué)方法相結(jié)合,產(chǎn)生一些簡單、結(jié)果精確、靈敏、專一、微量和快速、成本低廉的檢測方法,因此其在食品檢驗中占有越來越重要的地位?! ?.在食品檢驗中應(yīng)用的幾種生物檢測技術(shù)
3、2.1免疫法 免疫法是最靈敏的生物檢測方法,具有高特異性和高靈敏性(靈敏度可達1ppb,1ppm)、操作簡便、再現(xiàn)性好,應(yīng)用前景看好。用免疫法可進行蛋白質(zhì)檢測,由于不同蛋白質(zhì)的物理、化學(xué)性質(zhì)差別極小,只能通過各種免疫方法或標記探針法加以區(qū)別?! ?.1.1熒光抗體法 將熒光抗體溶液滴加于固定的標本上,一定時間后用緩沖液沖洗,若有相應(yīng)抗原存在,即與熒光抗體結(jié)合,在熒光顯微鏡下即可看到發(fā)熒光的抗體復(fù)合物。熒光抗體法在微生物污染鑒定中經(jīng)常使用,最常用于沙門氏菌的檢測?! ?.1.2放射免疫法 靈敏度高,
4、但操作相對復(fù)雜,放射免疫法同位素半衰期短,保存及操作不便。目前應(yīng)用情況受到限制?! ?.1.3酶聯(lián)免疫吸附法 是一種基本的酶免疫檢測方法,其選擇性好、靈敏度高、快速、易操作、結(jié)果判斷客觀準確、實用性強。酶免疫法和其他免疫法一樣,都是以抗體和抗原的特異性結(jié)合為基礎(chǔ)的。以酶或輔酶為標記物,標記抗原或抗體,用酶促反應(yīng)的放大作用來顯示初級免疫學(xué)反應(yīng)。 酶聯(lián)免疫吸附法除可檢測食品中的毒素、殘留農(nóng)藥及微生物外還可用于營養(yǎng)素的測定?! ?.1.4凝集反應(yīng)法 當有電解質(zhì)存在時,顆粒狀的抗原與其特異性的抗體結(jié)合并生
5、成可見凝集塊的反應(yīng)稱為凝集反應(yīng),有直接反應(yīng)和間接反應(yīng)法。利用凝集反應(yīng)可測定抗體的效價,也可用于細菌、病毒等的分類?! ?.1.5沉淀反應(yīng)法 沉淀反應(yīng)法常見的是一種瓊脂擴散試驗。單向擴散是利用不同抗原抗體在瓊脂中不同的擴散速度而會在瓊脂中出現(xiàn)幾條相互分離的沉淀帶。雙向擴散則是利用抗原抗體都向中間層———瓊脂擴散而形成沉淀帶,根據(jù)分離沉淀帶的數(shù)量可確定抗原抗體種類?! ?.1.6免疫擴散法 利用蛋白質(zhì)在半固體基質(zhì)上的擴散作用,使抗原和抗體在濃度比例合適的部位產(chǎn)生沉淀帶或沉淀環(huán),從而檢測蛋白質(zhì)。如血清中I
6、gG、IgA、IgM含量的測定?! ?.1.7免疫電泳法 免疫電泳法是將電泳和瓊脂擴散沉淀反應(yīng)相結(jié)合的一種方法,即先將血清或蛋白質(zhì)抗原在瓊脂凝膠中進行電泳。帶電的蛋白質(zhì)抗原向負極移動,加入抗血清后,不同區(qū)點的抗原再與抗體進行沉淀,當相應(yīng)抗原抗體接觸,在適當比例下形成弧形沉淀帶,根據(jù)沉淀帶的位置對蛋白質(zhì)的各組分進行檢測。如免疫球蛋白含量的測定?! ?.2酶檢測法 酶檢測法就是用酶來測定某些用一般化學(xué)方法難于檢測的食品成分的含量或測定食品中某些特殊酶的活性或含量。其最大特點就是特異性強。所以常用于分析結(jié)
7、構(gòu)和物理化學(xué)性質(zhì)比較相近的同類物質(zhì)的分別鑒定。如測定食品中殘存有機農(nóng)藥的含量、微生物污染或了解食品的制備、保存情況。 酶檢測法的樣品一般不需要進行很復(fù)雜的預(yù)處理,由于酶的催化效率很高,反應(yīng)條件溫和,酶檢測法的檢測速度也比較快。常用的有以下方法: 2.2.1終點測定法 在以待測物質(zhì)為底物的酶反應(yīng)中,如果使底物能夠接近完全地轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物,而且底物或產(chǎn)物又具有某種特征性質(zhì),通過直接測定轉(zhuǎn)化前后底物的減少量、產(chǎn)物的增加量或輔酶的變化等就可以定量待測物質(zhì)?! ?.2.2動力學(xué)測定法 在反應(yīng)體系中精確加入一定
8、數(shù)量的酶,測定反應(yīng)物或產(chǎn)物變化的速度。測定的參數(shù)可以是吸光度、熒光度、pH值等?! ?.2.3多酶偶聯(lián)測定法 當被測定的底物或反應(yīng)產(chǎn)物沒有易于檢測的物理化學(xué)手段時,可采用兩種或兩種以上的酶進行連續(xù)式或平行式的偶聯(lián)反應(yīng),使底物通過兩步或多步反應(yīng),轉(zhuǎn)化為易于檢測的產(chǎn)物,從而測定待測物質(zhì)的含量。例如葡萄糖的定量測定?! ?.2.4利用輔酶作用或抑制劑作用測定法 如果待測物質(zhì)可作為某種酶專一的輔酶或抑制劑,則這種物質(zhì)的濃度和將其作為輔酶或抑制劑