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《廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《葡萄中白藜蘆醇含量的測定液相色譜法》》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、ICSDB45廣西壯族自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)DB45/TXXXXX—2012葡萄中白藜蘆醇含量的測定液相色譜法TestingresveratrolofgrapeLiquidchromatographyanalysis（征求意見稿）2012-XX-XX發(fā)布2012-XX-XX實(shí)施廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB45/XXXXX—2012前言本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)GB/T1.1-2009要求進(jìn)行編寫。本標(biāo)準(zhǔn)由廣西大型儀器協(xié)作共用管理委員會辦公室提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由廣西壯族自治區(qū)分析測試研究中心起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：周琳、陳秋虹、莫建光。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。3DB45/XXXXX—
2、2012葡萄中白藜蘆醇含量的測定液相色譜法1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了液相色譜法測定白藜蘆醇含量的方法原理，使用儀器與設(shè)備、測定方法及結(jié)果計(jì)算。本標(biāo)準(zhǔn)適用于葡萄中白藜蘆醇含量的測定。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T603化學(xué)試劑試驗(yàn)方法中所用制劑及制品的制備GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法JY/T024高效液相色譜法通則3 方法原理葡萄采用勻漿后加無水硫酸鈉干燥處理，葡萄中的白藜蘆醇經(jīng)乙酸乙酯提取，旋轉(zhuǎn)蒸干，
3、用甲醇定容，高效液相色譜儀測定，根據(jù)保留時(shí)間和峰面積進(jìn)行定性和定量。4 試劑和材料4.1 一般規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時(shí)，均指分析純試劑和GB/T6682-2008中規(guī)定的三級水；流動相用水應(yīng)符合GB/T6682中一級水的規(guī)定。所述溶液如未指明溶劑，均系水溶液；所用制劑和制品按GB/T603配制。4.2 試劑4.2.1 乙腈：色譜純。4.2.2 甲醇：分析純。4.2.3 乙酸乙酯：分析純。4.2.4 無水硫酸鈉：分析純。4.2.5 乙酸：分析純。4.2.6 乙酸溶液0.1％（V/V）：量取1mL冰醋酸，加水至1000mL。。4.2.7 白藜蘆
4、醇標(biāo)準(zhǔn)品（分子式C14H12O3）：含量≥99％。4.3 白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)溶液精密稱取白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品10.0mg于10mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。制成1.00mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)工作液臨用前配置，用甲醇稀釋至20.0μg/mL。3DB45/XXXXX—20121 儀器與設(shè)備1.1 液相色譜儀帶紫外檢測器，其靈敏度及穩(wěn)定性符合JY/T024-1996第6章要求。1.2 液相色譜工作站或色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)。1.3 微量進(jìn)樣器：25μL或100μL。1.4 均質(zhì)分散器。1.5 恒溫振蕩器。1.6 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器1.7 分析天平：感量0.0001g
5、。2 測定步驟2.1 提取取新鮮葡萄用分散器攪成勻漿，精確稱取樣品5.0000g（精確至0.0001g），加入無水硫酸鈉研磨至干燥均勻分散，置磨口三角瓶中用乙酸乙酯50mL在40℃恒溫下振搖提取30min，反復(fù)提取三次。合并乙酸乙酯提取液，減壓蒸干，用甲醇溶解殘留物，至5mL棕色量瓶定容。搖勻，濾過，濾液用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。分別取供試品溶液與白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)工作液（4.3）各20μL注入液相色譜儀。2.2 液相色譜條件2.2.1 色譜柱：C18(4.6mm×250mm，5μm)：或性能相當(dāng)?shù)纳V柱。2.2.2 柱溫：25℃。2.
6、2.3 流動相：取0.1％（V/V）乙酸溶液750mL加入250mL乙腈2.2.4 流動相流速：1.0mL/min。2.2.5 檢測波長：306nm。2.2.6 檢測靈敏度：1AUFS。2.3 測定 外標(biāo)法分析測定。分別吸取10μL標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液上機(jī)進(jìn)行色譜分析。標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品重復(fù)進(jìn)樣，所得峰面積（或峰高）平均偏差小于3%。2.4 液相色譜圖（見圖1）3 結(jié)果計(jì)算和表達(dá)3.1 計(jì)算公式試樣中白藜蘆醇的含量X，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)毫克每百克（mg/100g）表示，按照公式（1）計(jì)算：.......................................（1）
7、式中：V——試樣溶液定容體積，mL；As——試樣溶液對應(yīng)的色譜峰面積響應(yīng)值；3DB45/XXXXX—2012Asd——白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)的色譜峰面積響應(yīng)值；ρ——白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的含量，μg/mL；m——試樣的質(zhì)量，g。1.1 結(jié)果表示平行測定結(jié)果用算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。2 重復(fù)性在重復(fù)條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的相對偏差不得超過算術(shù)平均值的10%。圖1、白藜蘆醇HPLC色譜圖3
