淡竹葉中總黃酮提取工藝研究

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1、淡竹葉中總黃酮提取工藝研究【摘要】目的用正交試驗(yàn)法優(yōu)選淡竹葉中總黃酮的提取工藝。方法以20g原藥材的總黃酮提取量為評(píng)價(jià)指標(biāo),選擇乙醇用量(倍)、提取時(shí)間(h)、提取次數(shù)(次)為考察因素,采用正交試驗(yàn)法L9(34)確定醇提取淡竹葉中總黃酮的最佳工藝。結(jié)果最佳提取工藝條件為75%乙醇18倍量提取1.0h,共提取1次,乙醇用量為顯著影響因素。結(jié)論首次進(jìn)行了淡竹葉總黃酮正交提取工藝的研究,結(jié)果比較可靠?!娟P(guān)鍵詞】淡竹葉;總黃酮;正交試驗(yàn)Abstract:ObjectiveTostudytheoptimumethanolextractionprocessoftotalflavonoids

2、inLophatherungracileBrongn.MethodsTheextractionoftotalflavonoidsentindex.Ethanolvolumnextractingtimeandtimesumethanolextractionprocessumethanolextractingprocessconditionsinantinfluencingfactor.ConclusionThisoptimumextradionprocessoftotalflavonoidsinLophatherumgracleBrongnisreliable.Keygracil

3、eBrongn;totalflavonoids;orthogonaldesign淡竹葉為禾本科多年生草本植物淡竹葉(LophatherumgracileBrongn.)的干燥莖葉,主產(chǎn)于河南、安徽、江蘇、浙江、福建、廣東、廣西等地。該藥味甘、淡、寒,歸心、胃、小腸經(jīng),具有清熱除煩、利尿的功效,多用于熱病煩渴、口舌生瘡、小便赤色淋痛等癥[1]。淡竹葉中含有的黃酮類化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖等多種生理活性[2],因而有效地開(kāi)發(fā)和利用淡竹葉中黃酮類化學(xué)成分具有重要意義。筆者選擇總黃酮提取量[3]為評(píng)價(jià)指標(biāo),利用L9(34)正交試驗(yàn),篩選醇提取淡竹葉中總黃酮的工藝條件,可為新

4、藥研究和充分利用淡竹葉藥材資源提供參考依據(jù)?! ?儀器、試劑與材料HH-S型水浴鍋(鞏義市英峪華儀器廠);RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠);SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵(鞏義市英峪華儀器廠);754型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司);AY220電子天平(島津);DZF-6050真空干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)。對(duì)照品蘆丁購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)為0080-9705;淡竹葉產(chǎn)地為浙江,加工單位為安徽豐原銅陵中藥飲片有限公司,經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室吳啟南教授鑒定,粉碎后備用。醫(yī)用酒精;甲醇AR級(jí);蒸餾水;其余所用試劑均為分析純。  2方

5、法與結(jié)果  2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取在105℃干燥下的蘆丁對(duì)照品0.0200g,置100mL容量瓶中,加適量甲醇溶解,定容至刻度,搖勻,即得對(duì)照品溶液(每1mL中含無(wú)水蘆丁0.2mg)?! 【芪∩鲜鰧?duì)照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL,分別置25mL容量瓶中,各加水至6.0mL,加5%亞硝酸鈉溶液1mL,混勻,放置6min,加10%硝酸鋁溶液1mL,搖勻,放置6min,加4%氫氧化鈉試液10mL,再加水至刻度,搖勻,放置15min,進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描,在510nm處均有最大吸收。以510nm得的吸收度A對(duì)濃度C回歸,以吸光度為縱坐標(biāo)、濃度為橫

6、坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程為A=3.8657C-0.0525(r=0.9994)。在8~48μg/mL的范圍內(nèi),濃度與吸收度有良好的線性關(guān)系。  2.2總黃酮提取量的測(cè)定按2.3.3項(xiàng)下方法制備樣品。精密稱定一定量的干燥品,用甲醇定容至25mL容量瓶中,再精密吸取3mL,置25mL容量瓶中,照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法,自“加水至6.0mL”起,依法測(cè)定吸光度。按照2005版《中國(guó)藥典》(一部)[4]規(guī)定的方法測(cè)定?! ?.3醇提工藝條件的選擇  2.3.1醇提濃度的選擇  將浙江產(chǎn)淡竹葉藥材粉碎,稱取20g/份,共3份,加15倍量的50%乙醇,回流提取2h(85℃),3份提

7、取液分別進(jìn)行抽濾,將濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮(80℃,0.08Mpa),濃縮液在水浴鍋上蒸至成稠膏狀,再放置真空干燥箱中(80℃,0.08Mpa),24h后取出,取少量醇浸膏測(cè)定總黃酮提取量。同法測(cè)定60%、75%、95%醇提液的總黃酮提取量(見(jiàn)表1)。結(jié)果表明,以20g原藥材中總黃酮提取量為考察指標(biāo),75%醇提液得到的總黃酮量最多,故采用75%乙醇提取的工藝。表1醇提濃度的選擇(略)  2.3.2提取工藝的正交試驗(yàn)  按照上述單因素考察結(jié)果,按表2中的因素水平進(jìn)行正交試驗(yàn)。表2因素水平表(略

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