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1、第二十八章食品功能性成分的測定本章要點(diǎn)1.低聚糖的測定方法2.大豆異黃酮的測定方法3.總皂苷的測定方法4.褪黑素的測定方法5.肉堿的測定方法6.免疫球蛋白IgG的測定方法7.EPA和DHA的測定方法8.超氧化物歧化酶的測定方法9.總谷胱甘肽（GSH）含量的測定方法10.大蒜辣素含量的測定方法11.核苷酸含量的測定方法12.糖精含量的測定方法13.?；撬岷康臏y定方法14.甘草苷含量的測定方法15.膳食纖維含量的測定方法16.枸杞子多糖含量的測定方法17.香菇多糖的測定方法18.磷脂含量的測定方法19.花生四烯酸含量的測定方法2
2、0.β-胡蘿卜素含量的測定方法21.維生素E和胡蘿卡素含量的測定方法22.微量硒含量的測定方法23.有機(jī)鍺含量的測定方法24.茶多酚含量的測定方法25.兒茶素含量的測定方法43第一節(jié)低聚糖——低聚果糖和異麥芽低聚糖的測定方法(高效液相色譜法)本方法適用功能性食品中低聚糖的檢測。一、方法提要低聚糖各組分用高效液相色譜法分離并定量測定，以乙腈、水作流動相在碳水化合物分析柱上糖的分離順序是先單糖后雙糖，先低聚后多聚，以示差折射檢測器檢測。低聚糖的檢測有外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法，但由于功能性食品一般只需報告低聚糖的總量，故可用廠家提供的基料作對
3、照樣，在相同的分離條件下以面積比值法求出樣品中低聚糖含量。二、儀器1.高效液相色譜儀：WatersHPLC，510泵，410示差折射檢測器，數(shù)據(jù)處理裝置。2.超聲波振蕩器。3.微孔過濾器(濾膜0.45μm)。三、試劑1.乙腈(色譜純)。2.水（三蒸水并經(jīng)Milli-Q超純處理）。3.低聚糖對照品：低聚糖難得純品，故可用廠家提供的基料。為對照品。低聚果糖（Fructooligosaccharide）：國產(chǎn)：一般含蔗果三糖（GF2）、蔗果四糖（GF3）、蔗果五糖（GF4）。液狀基料：含量約＞35%。固狀基料：含量約＞50%。進(jìn)口：
4、從蔗果三糖（GF2）至蔗果七糖（GF6）有液狀、固狀，30%～96%多種規(guī)格。異麥芽低聚糖：有液狀、固狀，一般含量＞50%。4.對照樣品溶液根據(jù)保健食品所強(qiáng)化的品種，準(zhǔn)確稱取低聚果糖或異麥芽低聚糖基料分別于100mL的容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，配成低聚果糖約5～10mg/mL或異麥芽低聚糖約5～10mg/mL的對照樣品溶液。四、測定步驟1.樣品處理（1）膠囊、片劑、顆粒、沖劑、粉劑（不含蛋白質(zhì)）的樣品43用精度0.000lg的分析天平準(zhǔn)確稱取已均勻的樣品(由于低聚糖原料含量不一，樣品中的強(qiáng)化量也不同，所以樣品的稱量應(yīng)控制
5、在使低聚糖最終的進(jìn)樣濃度約5～10mg/mL為宜)，于100mL容量瓶中，加水約80mL于超聲波振蕩器中振蕩提取30min，加水至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜過濾后直接這樣測定。（1）奶制品（含蛋白質(zhì)）的樣品準(zhǔn)確吸取50mL于小燒杯中，加25mL無水乙醇，加熱使蛋白質(zhì)沉淀，過濾，濾液經(jīng)濃縮并用水定容至25mL刻度。（2）飲料或口服液樣品準(zhǔn)確吸取一定量的樣品，加水稀釋，定容至一定體積使低聚糖的最終進(jìn)樣濃度約5～10mg/mL。（3）果凍或布丁類樣品果凍類樣品先均勻攪碎，稱量，加適量水并加熱至60℃左右助溶．并于超聲波振蕩器中振
6、蕩提取，然后用水稀釋至一定體積。布丁類樣品可按奶制品處理。2.色譜分離條件色譜柱：Waters碳水化合物分析柱3.9mm×300mm。柱溫：35℃。流動相：乙腈+水（75+25）。流速：1～2mL/min。檢測器靈敏度：16X。進(jìn)樣量：10～25μL。3.樣品測定取樣品處理液和對照品溶液各10～25μL注入高效液相色譜儀進(jìn)行分離。以對照品峰的保留時間定性，以其峰面積計(jì)算出樣液中被測物質(zhì)的含量。低聚糖的分離順序?yàn)椋旱途酃牵汗?葡萄糖、蔗糖、蔗果三糖（GF2）……蔗果七糖（GF6）異麥芽低聚糖：葡萄糖、麥芽糖、異麥芽糖、潘糖（
7、pentose）、異麥芽三糖、異麥芽四糖、異麥芽四糖以上。五、結(jié)果計(jì)算1.低聚糖占總糖的百分含量因?yàn)楦鹘M分均為同系物，所以可用面積歸一法計(jì)算低聚糖各組分總面積值及各組分占固形物（總糖）的百分含量。低聚果糖占總糖%=式中Sl——果糖+葡萄糖的峰面積；S2——蔗糖的峰面積；S3+……S7——蔗果三糖（GF2）……蔗果七糖（GF6）的峰面積。43異麥芽低聚糖占總糖%=式中Sl——葡萄糖的峰面積；S2——麥芽糖的峰面積；S3+……S7——異麥芽糖、潘糖、異麥芽三糖、異麥芽四糖、異麥芽四糖以上的峰面積。注：以上數(shù)值均可在積分儀中直接讀出
8、。2.低聚糖在樣品中的百分含量低聚糖%=式中S——樣品中各低聚糖組分的峰面積總和；S1——對照樣品溶液中各低聚糖組分的峰面積總和；m1——對照樣品質(zhì)量（g）；c——對照樣品中各低聚糖組分占固形物（總糖）實(shí)測的百分含量；①此項(xiàng)由結(jié)果計(jì)算5（1）求出。②如對照樣品為液體基料還應(yīng)乘
