姜黃素對神經(jīng)病理性痛大鼠脊髓背角cfos表達(dá)的影響

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1、姜黃素對神經(jīng)病理性痛大鼠脊髓背角cfos表達(dá)的影響【關(guān)鍵詞】姜黃素；cfos；神經(jīng)病理性痛；脊髓；大鼠　　Abstract：［objective］Toinvestigatetheeffectsofcurcuminonthebehaviorofchronicconstrictiveinjury(CCI)ratsandthecfosexpressioninspinalcorddorsalhorn.［Methods］108maleSDratslydividedinto4groups:Controlgroup(treatedoperationg

2、roup;Solventcontrastgroup;Curcumintreatedgroup.ThermalechanicalinedbyHargreave’sthermalradiationapparatusandvonFrey’smethodofmicrofilament，respectively.Thetimecourseofexpressionofcfosmunohistochemicalanalysis.［Results］Curcumincouldsignificantlyattenuatetheactivationofcfos

3、inducedbyCCIandsimultaneouslyamelioratethermalandmechanicalhyperalgesiainducedbyCCI.［Conclusion］ThisstudyshoincouldattenuatetheactivationofcfostoamelioratetheCCIinducedneuropathicpain.　　Keyin;cfos;neuralgia;spinalcord;rat　　神經(jīng)病理性痛主要表現(xiàn)為痛覺過敏（包括熱痛敏和機(jī)械痛敏兩種類型），由于其機(jī)制復(fù)雜，現(xiàn)有的疼痛治療方

4、法均無顯著療效，給患者帶來了極大的痛苦，因而成為疼痛學(xué)研究的熱點(diǎn)。有研究表明，細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶和JNK參與了神經(jīng)病理性痛的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)［1］。姜黃素具有痛經(jīng)止痛的作用，又是一抗炎、抗腫瘤藥物,同時(shí)又可抑制JNK［2］。本研究通過動態(tài)觀察姜黃素腹腔注射后對CCI模型大鼠的行為學(xué)及脊髓背角原癌基因cfos表達(dá)的變化，旨在探討姜黃素對于神經(jīng)病理性痛的作用及其可能機(jī)制。　　1材料與方法　　1.1實(shí)驗(yàn)動物及試劑雄性SD大鼠，體重200～280g，由溫州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供［實(shí)驗(yàn)動物使用許可證編號：SYXK(浙2005-0061)］。兔抗cfosIg

5、G多抗（產(chǎn)品標(biāo)號：sc52），為美國SantaCruz公司產(chǎn)品，姜黃素購自美國Sigma公司。姜黃素用二甲基亞砜溶解配置成30、100、300mg/kg貯存液，避光于4℃冰箱保存?！　?.2模型制備神經(jīng)病理性痛模型參照Bent和Xie方法［3］建立CCI模型。1%戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注射麻醉。在大腿中點(diǎn)通過股二頭肌鈍性分離并暴露坐骨神經(jīng)，接近三股分叉處，游離神經(jīng)約7mm，松松結(jié)扎4道(4.0鉻腸線)，結(jié)扎強(qiáng)度以引起小腿肌肉輕度顫動為宜，相隔lmm，受影響神經(jīng)長4～5mm，縫合肌肉皮膚。假手術(shù)組大鼠僅暴露坐骨神經(jīng)不進(jìn)行結(jié)扎?！　?.3

6、實(shí)驗(yàn)分組雄性SD大鼠108只，隨機(jī)分為6組，每組6只。實(shí)驗(yàn)對照組（Con），不給予任何藥物；假手術(shù)組（Sham），大鼠游離右側(cè)坐骨神經(jīng)但不結(jié)扎；溶劑對照組(SC)，腹腔注射二甲基亞砜；姜黃素組（Cur30）、（Cur100）、（Cur300）分別術(shù)后每天腹腔注射30、100、300mg/kg的姜黃素?！　?.4行為學(xué)測定坐骨神經(jīng)松扎前連續(xù)測定大鼠縮足行為2d,然后從造模后d1、d3、d5、d7、d10、d14分別采用熱輻射法（熱痛覺過敏）［4］和vonFrey細(xì)絲法（機(jī)械性痛覺過敏）［5］測定熱刺激縮足反射潛伏期（Tin后用一系列標(biāo)準(zhǔn)化的纖維

7、絲vonFrey(美國Stoelting公司產(chǎn)品)刺激后肢足底中部,如大鼠在刺激時(shí)間內(nèi)或移開vonFrey纖維絲時(shí)出現(xiàn)快速縮足或舔足反應(yīng)為陽性反應(yīng),每次間隔30s,以15g為上限熱輻射法即按Hargreaves方法，將大鼠置于底為3mm厚玻璃板的有機(jī)玻璃箱(22cm×12cm×22cm)中,使其適應(yīng)30min后用熱輻射刺激儀(50m光斑照射大鼠足底,記錄從照射開始至大鼠出現(xiàn)抬腿回避時(shí)間即為Tin,取平均值為Tg/kg麻醉下,經(jīng)主動脈灌注生理鹽水100mL,繼而灌注4%多聚甲醛400ml，制作SD大鼠L4-5脊髓、背根神經(jīng)節(jié)石蠟切片，54℃恒溫

8、水浴展開，晾干備用。60℃烤片至石蠟溶解，二甲苯梯度酒精脫蠟?？乖邏簾嵝迯?fù)，枸櫞酸修復(fù)液（pH6.0）煮至微沸，放入切片，噴氣10min，離開熱源自來水流水冷卻。