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1、超聲波提取榕樹葉（小葉）總黃酮及鑒別 關(guān)鍵詞：超聲波提??；榕樹葉；總黃酮；鑒別 TheTotalFlavanoneofBanyanLeaves（Flocculus）ExtractionandtheIdentificationbyUltrasonicakeuseoftheresourcesofbanyanleaves,avoidbanyanleavesetrytoextractandchecktheflavanoneofbanyanleaves.ResultsThecontentofthetotalflavanoneofbany
2、anleavesg/mlandtherateofrecoveryethodisapurelyphysicalprocessandhasnotanypollution.Itisanidealent;Banyanleaves;Totalflavanone;Identification 榕樹(banyan)是桑科榕屬無花果類植物，全世界有800多種，主要分布在熱帶、亞熱帶地區(qū)。小葉榕為桑科植物榕樹的葉,異名落地金線。我國榕屬植物約100種，是熱帶雨林中的關(guān)鍵種類，主要分布在福建、廣東、廣西、海南、臺(tái)灣和浙江等地。研究表明［1］：榕樹葉
3、含三萜苷、黃酮苷、酸性樹脂、鞣質(zhì)等，其中黃酮類和萜內(nèi)酯類等有效成分對治療冠心病、老年性癡呆、腦血栓、神經(jīng)系統(tǒng)疾病和消除自由基、抑菌、抗癌等方面有顯著效果，無毒副作用，并以此開發(fā)出多種藥品和保健食品。當(dāng)前國內(nèi)外對于榕樹葉中黃酮類化合物的研究還相對缺乏。目前有用水、石油醚、乙醇分別從榕樹葉中提取黃酮類化合物的報(bào)道［1］，但是，這幾種方法提取的時(shí)間長、工藝復(fù)雜、提取效率較低。近年來，超聲技術(shù)應(yīng)用于提取植物中的生物堿、苷類、生物活性物質(zhì)、動(dòng)物組織漿的毒質(zhì)等研究已有報(bào)道［2,3］，表明其具有耗能低、效率高、不破壞有效成分的特點(diǎn)。很多研究表明
4、，利用超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈振動(dòng)、高的加速度、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)、攪拌作用等，可加速植物材料中的有效成分進(jìn)入溶劑，從而增加有效成分的提取率，縮短提取時(shí)間，并且還可避免高溫對提取成分的影響［3］。但超聲技術(shù)應(yīng)用于提取榕樹葉中黃酮類物質(zhì)的研究尚未見報(bào)道，本文報(bào)道用超聲波提取小榕樹葉總黃酮及鑒別?！ ?儀器與試劑 1.1儀器KQ5200DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；UV755B紫外可見分光光度計(jì)（上海分析儀器總廠）；ZFI型三用紫外分析儀(上海顧村光電儀器廠)；SHBIII循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）。 1
5、.2試劑95%乙醇AR；亞硝酸鈉AR；硝酸鋁AR；氫氧化鈉AR；三氯化鋁AR；鹽酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；正丁醇AR；鎂粉AR；乙酸鎂AR；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（中國藥品生物制品檢定所）；榕樹葉（小葉榕）采自右江民族醫(yī)學(xué)院校園內(nèi)?！ ?方法與結(jié)果 2.1總黃酮成分提取取新鮮榕葉，烘干，粉碎。稱取榕樹葉粉末約6g，加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾。濾渣再加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩5~7ml為止，放置100ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液。
6、 2.2測定方法依據(jù)以蘆丁為對照品測定榕樹葉中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時(shí)控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡(luò)合物，在可見光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰?！ ?.3定量實(shí)驗(yàn)總黃酮的含量測定 2.3.1波長的選擇取樣品液適量，在0.30ml5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經(jīng)硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在420~700nm波長范圍測定絡(luò)合物的吸光度，絡(luò)合物于510nm波長處有最大吸收，故測定時(shí)選用此波長?！ ?.3.3提取物含量的測定精密吸取樣品液5.00ml，置50ml容量瓶，再精密吸取樣品液0.50ml，按標(biāo)準(zhǔn)曲線
7、的制備方法測定吸光度A=0.105，根據(jù)回歸方程：A=6.9671×103+8.4181C，計(jì)算樣品中總黃酮的含量C=2.660mg/ml?！ ?.3.4回收實(shí)驗(yàn)精密量取樣品液1.00ml，加入標(biāo)準(zhǔn)蘆丁對照品2.00ml（0.10mg/ml），同前樣品測定方法操作測定吸光度，求出回收率為100.2%?！ ”?紫外可見分光光度計(jì)測定蘆丁對照液吸光度（略） 根據(jù)上表得回歸方程：A=6.9671×103+8.4181C，r=0.9999 2.4定性實(shí)驗(yàn)總黃酮的鑒別 2.4.1顏色反應(yīng)紫外光下呈色反應(yīng)：取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，在可見
8、光下呈灰黃色，在紫外光下呈灰褐色并有熒光斑點(diǎn)。濃氨水反應(yīng)：取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，將濾紙?jiān)诎彼戏窖?.5min，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃褐色熒光斑點(diǎn)。三氯化鋁反應(yīng)：取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，滴加１％三氯化鋁乙醇溶液，吹干。在可見光下呈灰黃色，
