同種異體脂肪組織提取液對大鼠創(chuàng)面愈合的影響

同種異體脂肪組織提取液對大鼠創(chuàng)面愈合的影響

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1、同種異體脂肪組織提取液對大鼠創(chuàng)面愈合的影響 ?。坳P(guān)鍵詞]脂肪組織;組織提取物;皮膚損傷;傷口愈合  [ABSTRACT]ObjectiveToexploretheeffectsofhomologousadiposetissueextractsonlydividedintothreegroups,namelyadiposetissueextracts-treatedgroup,PBScontrolgroup,andblankcontrolgroup.Full-thicknessadeonthebackoftherats(tentonceaday.es,asarkeresofinjur

2、iesintheextracts-treatedgroupisgreoreobviouslyintheextracts-treatedgroupthanthoseinthetologousadiposetissueextractscanacceleratevelocityandimprovethequalityofol/L磷酸鹽緩沖液(PBS,pH7.2)進(jìn)行10倍稀釋,冰浴勻漿。在4℃條件下,以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心10min,吸取上清液,微孔濾膜過濾除菌,分裝-20℃凍存?! ?.2制備全層皮膚缺損創(chuàng)面L/kg體質(zhì)量。大鼠麻醉后,背部剃毛,用體積分?jǐn)?shù)0.75的乙醇常規(guī)消毒

3、。用直徑18mm的環(huán)鉆在大鼠脊柱兩側(cè)各壓出1個圓形印跡(2.54cm2),外科手術(shù)剪刀沿壓痕剪去全層皮膚(達(dá)深筋膜),即每只大鼠背部各制成2個圓形全層皮膚缺損創(chuàng)面,止血備用?! ?.3實(shí)驗(yàn)動物分組將上述18只大鼠隨機(jī)分成3組。脂肪組織提取液組:致傷后創(chuàng)面給予0.2mL同種異體脂肪組織提取液;基質(zhì)對照組:致傷后創(chuàng)面給予滅菌的PBS0.2mL;空白對照組:致傷后創(chuàng)面不給予任何制劑?! ?.4給藥方法將同種異體脂肪組織提取液和PBS分別吸入1mL無菌注射器內(nèi),每個創(chuàng)面滴注0.2mL,并涂布均勻。貼敷單層油紗布,然后用4層無菌紗布覆蓋,膠布固定。大鼠均單籠喂養(yǎng),自由進(jìn)食飲水,同種異體脂肪組

4、織提取液和PBS分別每天給予1次,至傷后14d結(jié)束?!   ?.5評價指標(biāo)及方法①大體觀察:直接觀察大鼠創(chuàng)面大小、形狀、肉芽組織生長、創(chuàng)緣新生表皮移行等情況。②創(chuàng)面面積:傷后0、3、7和14d用無菌透明載玻片覆蓋創(chuàng)面,用記號筆沿創(chuàng)面邊緣描繪出創(chuàng)面,再用平整厚度均勻的透明塑料膜復(fù)制并剪下該創(chuàng)面圖樣,以萬分之一電子分析天平(德國,SartorusA120S)測定透明塑料膜圖樣的質(zhì)量,并換算成相應(yīng)創(chuàng)面的面積(首先測定透明塑料膜單位面積的質(zhì)量,mg/cm2)[4]。③傷腔容積:傷后0、3和7d向傷腔內(nèi)滴注無菌生理鹽水,記錄滴至傷腔液面與創(chuàng)緣皮膚平行時的液量(mL)[4]。④組織學(xué)檢查:傷后

5、7、14d取各組創(chuàng)面組織,進(jìn)行組織學(xué)檢查。傷后7d注射致死劑量的速眠新處死大鼠9只,余者14d處死。切取整個創(chuàng)面,包括5mm無損傷的正常皮膚,切至筋膜,標(biāo)本放入100g/L甲醛溶液中固定。固定后從創(chuàng)面中心部位切開,取其中一半常規(guī)脫水、透明、石蠟包埋、切片,行蘇木精-伊紅(H-E)染色。用光學(xué)顯微鏡觀察創(chuàng)面肉芽組織生成和新生表皮生長情況?!   ?.6統(tǒng)計學(xué)分析用SPSS11.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,創(chuàng)面面積和傷腔容積均以x±s表示,組間比較采用方差分析?!   ?結(jié)果  2.1大體觀察傷后3d各組創(chuàng)面比致傷當(dāng)天略有縮小,呈橢圓形。傷腔均稍微變淺,肉芽組織增生均不明顯。脂肪組

6、織提取液組創(chuàng)面新鮮、易出血,創(chuàng)緣無新生表皮生長。兩個對照組創(chuàng)面略顯蒼白、不易出血,也未見明顯肉芽組織生長和新生表皮長出。傷后7d,各組創(chuàng)面明顯縮小,呈不規(guī)則橢圓形。以脂肪組織提取液組創(chuàng)面縮小更為明顯,肉芽組織明顯增多,傷腔已被肉芽組織填平,少數(shù)創(chuàng)面肉芽組織略高于創(chuàng)面,創(chuàng)緣新生表皮生長較明顯;兩個對照組肉芽組織和表皮生長較少,部分創(chuàng)面仍存在一定傷腔。到傷后14d各組創(chuàng)面進(jìn)一步縮小,脂肪組織提取液組創(chuàng)面多呈橢圓形,兩個對照組多呈長條形。脂肪組織提取液組創(chuàng)面肉芽組織基本與創(chuàng)面持平,表皮繼續(xù)增生逐漸覆蓋整個創(chuàng)面,兩個對照組則有部分殘留創(chuàng)面未愈。  表2傷后不同時間各組創(chuàng)面?zhèn)蝗莘e(略)  

7、與空白對照組、基質(zhì)對照組比較,F(xiàn)=8.67,*q=4.29、5.71,P<0.05  2.4組織學(xué)檢查切片經(jīng)H-E染色后,鏡下可見,傷后7d各組創(chuàng)面肉芽組織均有不同程度的生長和白細(xì)胞浸潤,創(chuàng)緣有新生表皮生成。脂肪組織提取液組創(chuàng)面肉芽組織增加較多,毛細(xì)血管和成纖維細(xì)胞更明顯,創(chuàng)緣新生表皮生長明顯增多?;|(zhì)對照組和空白對照組創(chuàng)面成纖維細(xì)胞和毛細(xì)血管較少,肉芽組織較薄,創(chuàng)緣僅有較少的新生表皮移行生長。傷后14d脂肪組織提取液組創(chuàng)面肉芽組織逐漸成熟,毛細(xì)血管減少,纖維細(xì)

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