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1、綿茵陳藥材高效液相色譜指紋圖譜研究論文王鳳云，江濱，曾元兒，張軍【摘要】目的建立綿茵陳藥材的HPLC指紋圖譜，為其質(zhì)量控制提供依據(jù)。方法采用反相高效液相色譜法，并進行相應(yīng)的方法學(xué)考察，對不同產(chǎn)地和批次綿茵陳藥材進行質(zhì)量評價。結(jié)果采用KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm）色譜柱.freelL·min-1，檢測波長327nm；該方法穩(wěn)定性、精密度、重復(fù)性良好,可用于綿茵陳藥材的指紋圖譜測定；不同批次的綿茵陳藥材在圖譜上存在一定的差異。結(jié)論該結(jié)果可為綿茵陳藥材的質(zhì)量控制提供依據(jù)?！娟P(guān)鍵詞】綿茵陳；高效液相色譜法；指紋圖譜
2、Abstract:ObjectiveToestablishHPLCfingerprintsofHerbaArtemisiaescopariaeandoffersomeinformationforthequalitycontrolofHerbaArtemisiaescopariae.MethodsandResultsThefingerprintsofHerbaartemisiaescopariaefromdifferenthabitatsandbatchesanceliquidchromatography.ThesampleasilC
3、18（250mm×4.6mm，5μm）columnundergradientelution.ThemobilephaseconsistedofacetonitrileandH2O(0.2%H3PO4)andthefloL·min-1.Thedetection.Thestability,accuracyandcredibilityofthismethodethodofferssomeinformationforthequalitycontrolofHerbaArtemisiaescopariae.Keyisiaescopariae;H
4、PLC;HPLC;fingerprints茵陳為菊科植物濱蒿ArtemisiascopariaERCK公司）；其他試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1品種鑒定指紋圖譜所用的不同批次綿茵陳藥材均購于廣州市藥材公司、廣州清平藥材市場、廣州致信藥業(yè)有限公司，其產(chǎn)地分別為江西（市售1）、山西（市售2）、山東（市售3）、安徽（市售4）、河南（市售5）、山西（市售6）、陜西（市售7）、山東（市售8）、寧夏（市售9）、安徽（市售10）。根據(jù)《中國藥典》2005版一部茵陳［性狀］項下的規(guī)定，與《中華人民共和國藥典中藥彩色圖譜集》、《新編中藥志》中照片
5、與描述，經(jīng)廣東藥學(xué)院中藥鑒定教研室劉基柱老師鑒定為菊科植物濱蒿ArtemisiascopariaisiacapillariesThunb春季采收的干燥幼苗。2.2供試品溶液的制備取本品粉末約0.5g，精密稱定，加入體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇100mL，置水浴上加熱回流1h，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣用體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶解，置25mL棕色量瓶中，加體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。2.3對照品溶液的制備取綠原酸對照品適量，精密稱定,置棕色量瓶中，加甲醇制成每1mL含40μg的溶液，即得。2.4色譜條件Krom
6、asilC18（250mm×4.6mm，5μm）色譜柱，流動相采用二元體系，流動相A為乙腈，流動相B為體積分?jǐn)?shù)為0.2％的磷酸水溶液，梯度洗脫程序：0min（5％A）,10min（10%A），45min（25％A）；柱溫35℃，流速1.0mL·min-1，檢測波長327nm。2.5指紋圖譜試驗的方法學(xué)驗證2.5.1綠原酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備取綠原酸對照品溶液（40.8μg/mL），分別進樣2、4、6、8、10、16、20μL，按照上述色譜條件進行測定，以綠原酸質(zhì)量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得回歸方程為：Y=2553.1X+2.8847,（
7、r=0.9999），表明綠原酸在0.0816～0.816μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.5.2穩(wěn)定性試驗取同一份供試品溶液，分別在0、1、2、4、8和12h進行檢測，直觀指紋圖譜全貌無明顯變化，經(jīng)中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件（國家藥典委員會2004A，以下同）計算，與對照圖譜比較，相似度均大于0.9，各共有峰相對峰面積和相對保留時間的RSD分別為1.41％、1.22％，表明在12h內(nèi)供試品溶液具有良好的穩(wěn)定性。2.5.3精密度試驗取同一份供試品溶液，連續(xù)進樣6次，進行檢測，直觀指紋圖譜全貌無明顯變化，經(jīng)相似度評價，相似度均大于0.9，
8、各共有峰相對峰面積和相對保留時間的RSD分別為0.42％、0.31％，表明該方法精密度良好。2.5.4重復(fù)性試驗取同一種藥材樣品6份，按照供試品溶液的制備和檢測方法進行檢測，直觀指紋圖譜全貌無明顯變化，經(jīng)相似度評價，相似度均大于0.9
