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1、柑桔皮總黃酮的提取及鑒別論文黃鎖義，羅燕，張婧萱，王三艷，陸輝宇【關鍵詞】柑桔皮；,,總黃酮；,,提??；,,鑒別摘要：目的為充分利用柑桔植物資源，避免資源的浪費，探討柑桔皮中總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用純物理的工藝流程和分光光度法從柑桔皮中提取黃酮類物質，對所提取的黃酮類物質進行驗證。結果測得柑桔皮樣品中總黃酮的含量C=4.49%。回收率為98.0%.freelOrangePeelAbstract：ObjectiveInordertomakeuseoftheresourcesoforangepeel,avoidingetr
2、ytointroducethemethodoftheorangepeel,andchecktheflavanonethelotusrhizome.ResultsBythismethodgettingthecontentsofthetotalflavanoneoforangepeelisC=4.49%andrateoftherecoveryis98.0%.ConclusionUsingthistextethodstogettheouteandpurityoftheflavanoneareallveryhigh.Thismetho
3、dispurelyphysicalprocess,andhasnochemicalchangeandpollution.Itisidealtoin，1500r/min。并進行加熱濃縮（加熱溫度在85℃左右）。濃縮冷卻后加入等體積95%乙醇，放入冰箱內2h。用高速離心機進行分離15min，1500r/min。過濾得濾液濾渣，棄去濾渣。對濾液進行蒸發(fā)濃縮（加熱溫度在85℃左右）。待乙醇蒸發(fā)完后，將濃液置于真空干燥箱中干燥成疏松固體，粉碎得終產物。1.3定量實驗-總黃酮的含量測定1.3.1實驗原理采用硝酸鋁比色法。黃酮類物質是以2-
4、苯基并吡喃酮為母核的多羥基化合物，可與糖苷類物質遇堿變成明顯黃色，其機制是黃酮類物質在堿性條件下其苯吡喃酮的1，2碳之間的C-O鍵打開成查耳酮的檢測方法常用分光光度計法或液相色譜法。分光光度法以用黃酮與鋁離子在堿性與亞硝酸存在條件下形成黃酮的鋁絡合物，生成穩(wěn)定的黃色。黃色的深淺與黃酮含量呈一定的比例關系，可以蘆丁(標準樣)作對照，于500nm［3］波長處比色定量測定。1.3.2標準曲線的制備①標準溶液的制備：精密稱取蘆丁對照品200mg，置于100ml容量瓶中，加入95％乙醇溶液并稀釋至刻度，搖勻。精密稱取10ml置于100m
5、l容量瓶中，加入95%乙醇使成100ml,搖勻即得（每毫升含有無水蘆丁0.2mg）②標準曲線的制備：精密吸取對照溶液0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，12.0ml分置于50ml容量瓶中，各加95%乙醇12ml，加5%亞硝酸鈉溶液2.0ml，混勻，放置6min，再加10%硝酸鋁溶液2.0ml，放置6min，加5%氫氧化鈉溶液20ml，最后用95%乙醇稀釋至刻度，搖勻，以第一瓶為空白溶液，用UV755B紫外可見分光光度計，在500nm上測定吸光度。結果見表1。表1分光光度法測定吸光度結果（略）根據上表得一回歸方程：A=1.2
6、433C0.0081，r=0.9991,n=5，其中截距0.0081，斜率為1.2433。1.3.3提取物含量的測定精密稱定提取物1.5000g，置索氏提取器中，加95%乙醇回流至無色（6~8h），將提取液置于燒杯中，水浴加熱濃縮至干，再用熱水洗滌3次，將洗液移至分液漏斗中，并加無水正丁醇液萃取3到5次，每次10ml,.freell容量瓶中，再加95%乙醇至刻度，搖勻。精密取10ml于50ml容量瓶中加95%乙醇至刻度，搖勻，按標準曲線的制備操作測定吸光度，A=0.328。1.3.4顏色反應紫外光下呈色反應：取該樣品溶液點在濾
7、紙上，在可見光下呈淡黃色，在紫外光下呈淡藍色并有熒光斑點。濃氨水反應：取該樣品溶液點在濾紙上，將濾紙在氨水上方熏0.5min，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃褐色熒光斑點。三氯化鋁反應：取樣品溶液點在濾紙上，滴加１％三氯化鋁乙醇溶液，吹干。在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈黃色熒光斑點。乙酸鎂反應：取樣品溶液點在濾紙上，滴加1%乙酸鎂甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黃色斑點。鹽酸鎂粉反應：取乙醇提取液1ml于試管中加鎂粉，再加入濃的鹽酸數(shù)滴（1次加入），在泡沫處呈紫紅色。1.3.5紙層析取樣品溶液10μl點在濾紙上。用正丁醇∶醋酸∶水
8、=4∶1∶5為展開劑，上行展開5h，取出晾干。噴1%氯化鋁乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可見熒光斑點。2結果A=0.328，根據回歸方程：A=1.2433C-0.0081，計算樣品中總黃酮的含量C=4.49%?；厥諏嶒灒壕芊Q提取物1.5000g，加入蘆丁對照品1.0000g，
