柑桔皮總黃酮的提取及鑒別

柑桔皮總黃酮的提取及鑒別

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1、柑桔皮總黃酮的提取及鑒別黃鎖義,羅燕,張婧萱,王三艷,陸輝宇【關(guān)鍵詞】柑桔皮;,,總黃酮;,,提??;,,鑒別  摘要:目的為充分利用柑桔植物資源,避免資源的浪費(fèi),探討柑桔皮中總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用純物理的工藝流程和分光光度法從柑桔皮中提取黃酮類物質(zhì),對(duì)所提取的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果測(cè)得柑桔皮樣品中總黃酮的含量C=4.49%。回收率為98.0%,其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過程,無任何化學(xué)變化及污染,是提取柑桔皮黃酮類物質(zhì)的有效途徑?! £P(guān)鍵詞:柑桔皮;總黃酮;提??;鑒別  TheEx

2、tractionandDistinguishoftheTotalFlavanonefromOrangePeel  Abstract:ObjectiveInordertomakeuseoftheresourcesoforangepeel,avoidingetrytointroducethemethodoftheorangepeel,andchecktheflavanonethelotusrhizome.ResultsBythismethodgettingthecontentsofthetotalflavano

3、neoforangepeelisC=4.49%andrateoftherecoveryis98.0%.ConclusionUsingthistextethodstogettheouteandpurityoftheflavanoneareallveryhigh.Thismethodispurelyphysicalprocess,andhasnochemicalchangeandpollution.Itisidealtoin,1500r/min。并進(jìn)行加熱濃縮(加熱溫度在85℃左右)。濃縮冷卻后加入等體積95%

4、乙醇,放入冰箱內(nèi)2h。用高速離心機(jī)進(jìn)行分離15min,1500r/min。過濾得濾液濾渣,棄去濾渣。對(duì)濾液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮(加熱溫度在85℃左右)。待乙醇蒸發(fā)完后,將濃液置于真空干燥箱中干燥成疏松固體,粉碎得終產(chǎn)物。  1.3定量實(shí)驗(yàn)-總黃酮的含量測(cè)定  1.3.1實(shí)驗(yàn)原理采用硝酸鋁比色法。黃酮類物質(zhì)是以2-苯基并吡喃酮為母核的多羥基化合物,可與糖苷類物質(zhì)遇堿變成明顯黃色,其機(jī)制是黃酮類物質(zhì)在堿性條件下其苯吡喃酮的1,2碳之間的C-O鍵打開成查耳酮的檢測(cè)方法常用分光光度計(jì)法或液相色譜法。分光光度法以用黃酮與鋁離

5、子在堿性與亞硝酸存在條件下形成黃酮的鋁絡(luò)合物,生成穩(wěn)定的黃色。黃色的深淺與黃酮含量呈一定的比例關(guān)系,可以蘆丁(標(biāo)準(zhǔn)樣)作對(duì)照,于500nm〔3〕波長(zhǎng)處比色定量測(cè)定?! ?.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備①標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備:精密稱取蘆丁對(duì)照品200mg,置于100ml容量瓶中,加入95%乙醇溶液并稀釋至刻度,搖勻。精密稱取10ml置于100ml容量瓶中,加入95%乙醇使成100ml,搖勻即得(每毫升含有無水蘆丁0.2mg)②標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:精密吸取對(duì)照溶液0.0,2.0,4.0,6.0,8.0,12.0ml分置于50ml

6、容量瓶中,各加95%乙醇12ml,加5%亞硝酸鈉溶液2.0ml,混勻,放置6min,再加10%硝酸鋁溶液2.0ml,放置6min,加5%氫氧化鈉溶液20ml,最后用95%乙醇稀釋至刻度,搖勻,以第一瓶為空白溶液,用UV755B紫外可見分光光度計(jì),在500nm上測(cè)定吸光度。結(jié)果見表1?! ”?分光光度法測(cè)定吸光度結(jié)果(略)  根據(jù)上表得一回歸方程:A=1.2433C0.0081,r=0.9991,n=5,其中截距0.0081,斜率為1.2433?! ?.3.3提取物含量的測(cè)定精密稱定提取物1.5000g,置索

7、氏提取器中,加95%乙醇回流至無色(6~8h),將提取液置于燒杯中,水浴加熱濃縮至干,再用熱水洗滌3次,將洗液移至分液漏斗中,并加無水正丁醇液萃取3到5次,每次10ml,合并萃取液于燒杯中,水浴蒸干,再加95%乙醇使溶解,并移于50ml容量瓶中,再加95%乙醇至刻度,搖勻。精密取10ml于50ml容量瓶中加95%乙醇至刻度,搖勻,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備操作測(cè)定吸光度,A=0.328?! ?.3.4顏色反應(yīng)紫外光下呈色反應(yīng):取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上,在可見光下呈淡黃色,在紫外光下呈淡藍(lán)色并有熒光斑點(diǎn)。濃氨水反應(yīng):取該

8、樣品溶液點(diǎn)在濾紙上,將濾紙?jiān)诎彼戏窖?.5min,立即在紫外光下觀察,呈極明顯的黃褐色熒光斑點(diǎn)。三氯化鋁反應(yīng):取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上,滴加1%三氯化鋁乙醇溶液,吹干。在可見光下呈灰黃色,在紫外光下呈黃色熒光斑點(diǎn)。乙酸鎂反應(yīng):取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上,滴加1%乙酸鎂甲醇溶液,吹干,紫外光下呈黃色斑點(diǎn)。鹽酸鎂粉反應(yīng):取乙醇提取液1ml于試管中加鎂粉,再加入濃的鹽酸數(shù)滴(1次加入),在泡沫處呈紫紅色?! ?.3.5紙層析取

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