洋蔥總黃酮的提取及鑒別

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1、洋蔥總黃酮的提取及鑒別作者:黃鎖義覃成箭姚小敏梁宇【關(guān)鍵詞】洋蔥摘要:目的為充分利用洋蔥植物資源,避免資源的浪費(fèi),探討洋蔥總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用純物理的工藝流程過程和紫外線分光光度法從洋蔥中提取黃酮類物質(zhì),對所提取的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行驗證。結(jié)果測得樣品中總黃酮的含量C=4.84%?;厥章蕿?9.4%,其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過程,無任何化學(xué)變化及污染,是提取洋蔥黃酮類物質(zhì)的有效途徑。關(guān)鍵詞:洋蔥;總黃酮;提??;鑒別ExtractionandDistinguishingoftheT

2、otalFlavonefromOnionAbstract:ObjectivEinordertomakeuseoftheresourcesofonion,avoidetrytoextractandchecktheflavoneofonion.ResultsBythismethodgettingthecontentsofthetotalflavoneofonionis4.84%andtherateofrecoveryis99.4%ethodisapurephysicalprocess,andhasnota

3、nychemicalchangeandpollution.Itisanidealin,1500r/min。并進(jìn)行加熱濃縮(加熱溫度在85℃左右)。濃縮冷卻后加入等體積95%乙醇,放入冰箱內(nèi)2h。用高速離心機(jī)進(jìn)行分離15min,1500r/min。過濾得濾液濾渣,棄去濾渣。對濾液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮(加熱溫度在85℃左右)。待乙醇蒸發(fā)完后,將濃液置于真空干燥箱中干燥成疏松固體,粉碎得終產(chǎn)物。1.3總黃酮的含量測定1.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備①對照品溶液的制備:精密稱取蘆丁對照品200mg,置于100ml容量瓶中,加

4、入95%乙醇溶液并稀釋至刻度,搖勻。精密稱取10ml置于100ml容量瓶中,加入95%乙醇使成100ml,搖勻即得(每1ml含有無水蘆丁0.2mg)②標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:精密吸取對照品溶液0.0,2.0,4.0,6.0,8.0,12.0ml分置于50ml容量瓶中,各加95%乙醇12ml,加10%硝酸鈉溶液2.0ml,混勻,放置6min,再加10%硝酸鈉溶液2.0ml,混勻,放置6min,加5%氫氧化鈉溶液20ml,最后用95%乙醇稀釋至刻度,搖勻,以第1瓶為空白溶液,用UV-755B紫外分光光度計,在50

5、0nm[3]上測定吸光度。結(jié)果見表1。表1紫外線分光光度計測定吸光度C/mg・ml-1(略)1.3.2提取物含量的測定精密稱定提取物1.5000g,置索氏提取器中,加95%乙醇回流至無色(6~8h),將提取液置于燒杯中,沸水浴加熱濃縮至干,再用熱水洗滌3次,將洗液移至分液漏斗中,并加無水正丁醇液萃取3~5次,10ml/次。合并萃取液于燒杯中,沸水浴蒸干,再加95%乙醇使其溶解,并移于50ml容量瓶中,再加95%乙醇至刻度,搖勻。精密量取10ml于50ml容量瓶中,加95%乙醇至刻度,搖勻

6、,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備操作測定吸光度,A=0.353。1.3.3顏色反應(yīng)①紫外光下呈色反應(yīng):取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上,在可見光下呈灰黃色,在紫外光下呈灰褐色并有熒光斑點(diǎn)。②濃氨水反應(yīng):取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上,將濾紙在氨水上方熏30s,立即在紫外光下觀察,呈極明顯的黃褐色熒光斑點(diǎn)。③三氯化鋁反應(yīng):取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上,滴加1%三氯化鋁乙醇溶液,吹干。在可見光下呈灰黃色,在紫外光下呈黃色熒光斑點(diǎn)。④乙酸鎂反應(yīng):取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上,滴加1%乙酸鎂甲醇溶液,吹干,紫外光下呈黃色斑點(diǎn)。⑤鹽酸鎂粉反應(yīng):取乙醇提取液1

7、ml于試管中加鎂粉,再加入濃的鹽酸數(shù)滴(1次加入),在泡沫處呈紫紅色。1.3.4紙層析取樣品溶液10μl點(diǎn)在濾紙上。用正丁醇∶醋酸∶水=4∶1∶5為展開劑,上行展開5h,取出晾干。噴1%氯化鋁乙醇溶液。吹干后于紫外光下,可見熒光斑點(diǎn)。2結(jié)果A=0.353,根據(jù)回歸方程:A=1.2433C-0.0081,計算樣品中總黃酮的含C=4.84%?;厥諏嶒灒壕芊Q提取物1.5000g,加入蘆丁對照品1.0000g,同前樣品測定方法操作測定吸光度,求出回收率為99.4%。3討論實驗結(jié)果表明,本實驗方法工藝簡單,回

8、收率為99.4%,利用本文所提供的提取、純化方法而得到的黃酮類物質(zhì)其純度較高。此方法采用全物理過程,無任何化學(xué)變化及污染,且該方法操作簡單方便,是一條理想的提取黃酮類物質(zhì)的途徑。黃酮類化合物是一大類天然產(chǎn)物,廣泛存在于植物界,是許多中草藥的有效成分。在自然界中最常見的是黃酮和黃酮醇,其它包括雙氫黃(醇)、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等。天然來源的生物黃酮分子量小,能被人體迅速吸收,能通過血腦屏障,能進(jìn)入脂肪組織,進(jìn)而體現(xiàn)出如下功

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