降鈣素原(pct)檢測及臨床意義

降鈣素原(pct)檢測及臨床意義

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1、降鈣素原(PCT)檢測及臨床意義一、概述:PCT是無激素活性的降鈣素前肽物質(zhì),由116個(gè)氨基酸組成,分子量為13KD的糖蛋白。PCT的半衰期為25-30小時(shí),在體外穩(wěn)定性很好。健康人血漿PCT含量極低.PCT選擇性地對(duì)系統(tǒng)性細(xì)菌感染、真菌感染及寄生蟲感染有反應(yīng),而對(duì)無菌性炎癥和病毒感染無反應(yīng)或僅有輕度反應(yīng)。許多學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),全身性細(xì)菌、真菌和寄生蟲感染時(shí),PCT水平異常增高,增高的程度與感染的嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān),在全身性細(xì)菌感染和膿毒癥輔助鑒別診斷、預(yù)后判斷、療效觀察等方面有很高的臨床價(jià)值。PCT水平的監(jiān)測,對(duì)于嚴(yán)重威脅生命的感染性疾病過程

2、和跟蹤治療方案是很有用的,PCT濃度的升高標(biāo)志著炎癥反應(yīng)正在進(jìn)行中,使用足夠的抗生素、炎癥灶清除術(shù)治療等,PCT值下降,證明治療方案正確,預(yù)后良好,反之改變治療方案。PCT為所有不知病因的炎癥性疾病的鑒別診斷提供幫助與支持,如細(xì)菌性與毒素性的急性成人呼吸窘迫綜合癥(ARDS)的鑒別;膽源性與毒素性胰腺炎的鑒別;細(xì)菌性與病毒性腦膜炎的鑒別;微生物誘導(dǎo)的發(fā)熱與非細(xì)菌性發(fā)熱的鑒別,特別是發(fā)熱待查(FOU)的診斷,病毒感染或自身免疫失調(diào)與免疫抑制條件下的急性細(xì)菌感染的鑒別,發(fā)熱的病因的鑒別,如在腫瘤患者中被腫瘤溶解物或化療誘導(dǎo)與細(xì)菌、真菌或其他感染

3、病因區(qū)別,早期診斷新生兒和嬰兒全身性細(xì)菌感染與敗血癥引起的急性發(fā)熱;術(shù)后常規(guī),包括術(shù)后感染預(yù)警及用藥監(jiān)測,術(shù)后切除感染灶(如腹膜炎、軟組織感染)后的治療指導(dǎo),監(jiān)測腹膜炎、吻合口漏和無典型腹部癥狀的疾病過程;器官移植后的監(jiān)測,移植前排除急性細(xì)菌或其他感染,鑒別急性器官排斥、急性病毒、細(xì)菌與真菌感染;長期在ICU的患者及長期機(jī)械通氣患者的監(jiān)測,監(jiān)測疾病過程及指導(dǎo)治療;監(jiān)測高?;颊?,早期獲得有關(guān)并發(fā)癥和內(nèi)環(huán)境衰退的信息。許多臨床研究證明,PCT在不同醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)υ\斷和指導(dǎo)治療有很高的價(jià)值,與目前所應(yīng)用的診斷指標(biāo)相比,PCT在鑒別診斷和控制感染及嚴(yán)重

4、炎癥方面提供了額外的信息。隨著臨床實(shí)踐性研究的不斷深入,臨床數(shù)據(jù)的不斷積累,PCT作為一個(gè)全身性細(xì)菌感染和膿毒癥輔助和鑒別診斷的常規(guī)指標(biāo)將成為共識(shí),并將得到廣泛的應(yīng)用。二、PCT分子生物學(xué)結(jié)構(gòu):PCT來自定位于第11號(hào)染色體上(11P15,4)單拷貝基因(與降鈣素基因相關(guān)肽為同一基因)。該基因由2800個(gè)堿基對(duì)組成,含6個(gè)外顯子和5個(gè)內(nèi)含子,基因全長約7.6Kb。轉(zhuǎn)錄后經(jīng)特定剪輯產(chǎn)生PCTmRNA,再翻譯成降鈣素原前體(Pre-PCT),在高爾基復(fù)合體及分泌囊中,經(jīng)一系列水解酶作用最終形成PCT氨基酸多肽(aminoPCT),降鈣素(CT)

5、及羧基端21個(gè)氨基多肽(CT:CCP-1)。三、血清PCT來源及可能的生物學(xué)機(jī)制正常條件下人血清PCT含量極低,約2.5pg/ml(運(yùn)用高效液相色譜分析),而成熟CT含量約6.3pg/ml。髓質(zhì)甲狀腺腫瘤或其他神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤患者血清PCT及其組分均增高,組分相對(duì)含量也發(fā)生變化。在一些非甲狀腺損傷如慢性腎衰、吸入性燒傷、急性細(xì)菌感染、中風(fēng)、敗血癥等患者血清PCT及其組分也均增高,有些甚至成倍的上升,而CT略微升高,說明除甲狀腺髓質(zhì)細(xì)胞分泌貯存PCT外,仍有其他細(xì)胞具有這些功能。血清PCT升高的可能的生物學(xué)機(jī)制:靶細(xì)胞(PBMCs等)在LPS各

6、種敗血癥相關(guān)因子作用下應(yīng)急分泌PCT,這種應(yīng)急分泌超過細(xì)胞后轉(zhuǎn)錄過程(由Pro-CT分解為aminoPCT、CT、CT:CCP-1)或后轉(zhuǎn)換過程缺少必需的水解酶,從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)所觀察到的PCT成倍增長,而CT水平不變或稍增高。四、檢測方法及正常參考值范圍目前除了費(fèi)時(shí)不易自動(dòng)化的凝膠層析法及高效液相色譜分析法,檢測PCT較特異與敏感的分析方法有:雙抗夾心免疫化學(xué)發(fā)光法(雙抗夾心法)和放射免疫分析法(RIA)。雙抗夾心法運(yùn)用雙單克隆抗體,其一作為捕獲抗體直接結(jié)合PCT96-106氨基酸殘基即未成熟CT:CCP-1部分,另一作為示蹤抗體直接結(jié)合PC

7、T70-76氨基酸殘基,即未成熟CT分子,人工合成的PCT作為標(biāo)準(zhǔn)。該方法比較特異無交叉反應(yīng),其檢測最低為10pg·ml-1l,標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為10-60pg·ml-1。批內(nèi)、批間變異系數(shù)分別為7℅和8℅。該法已有商品試劑,所需時(shí)間較短,易自動(dòng)化,但該法不能檢測到正常人血清中PCT。RIA使用一種對(duì)人工合成的aminoPCT特異的多克隆抗體RIB7。RIB7直接作用PCT的aminoPCT部分,故RIA既能檢測游離的PCT,又能檢測結(jié)合型的PCT,也可檢測降鈣素基因相關(guān)前體(Pro-CGRP),此法可信的敏感度為4pg·ml-1。線性范圍

8、10-77pg·ml-1,50℅的結(jié)合游離比為140pg·ml-1,該法能檢測正常人血清PCT,故較雙抗夾心法敏感,另一優(yōu)點(diǎn)是RIA與患者病程呈現(xiàn)正相關(guān)(r=0.47,p=0.0

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