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1、黃芪藥材指紋圖譜的研究進(jìn)展【摘要】黃芪是常用中藥，制定科學(xué)可靠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)意義重大。文章簡(jiǎn)要概述了黃芪藥材指紋圖譜的研究方法為黃芪藥材的質(zhì)量控制提供了依據(jù)?！娟P(guān)鍵詞】黃芪指紋圖譜黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astraglusmembranaceus(Fisch)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge的干燥根。春、秋二季采挖，除去須根及根頭,曬干.甘、溫,歸肺、脾經(jīng)。具補(bǔ)氣固表、利尿托毒、排濃、斂瘡生肌的作用。臨床用于氣虛乏力，食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水
2、腫，癰疽難潰，久潰不斂，血虛痿黃，內(nèi)熱消渴；慢性腎炎蛋白尿、糖尿?。?］等癥。黃芪為常用中藥，每年需求量約600萬(wàn)kg［2］。黃芪的化學(xué)成分主要有黃酮類、皂苷類和多糖等［3］。長(zhǎng)期以來(lái)對(duì)黃芪的質(zhì)量控制，人們僅以黃芪甲苷的含量作為黃芪及其復(fù)方制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，傳統(tǒng)的方法通常是薄層法,近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，高效液相色譜法已越來(lái)越廣泛的應(yīng)用于質(zhì)量控制中。但僅僅測(cè)定一個(gè)、兩個(gè)單一成分無(wú)法完整表現(xiàn)中藥材的全面情況。指紋圖譜方法的出現(xiàn)為全面可靠的保證黃芪藥材及其制劑的質(zhì)量提供了可靠保證。所謂中藥指紋圖譜是指某種(或某產(chǎn)地)中藥材或中成藥進(jìn)行適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段得到
3、的、能夠標(biāo)示該中藥材或中成藥特性的某類或數(shù)類成分的色譜或光譜的圖譜，它具有特征性和穩(wěn)定性［4］。利用色譜技術(shù)進(jìn)行指紋圖譜分析的中藥材，因生長(zhǎng)年限、生長(zhǎng)環(huán)境的變化而可能產(chǎn)生個(gè)體間較為明顯的差異，但個(gè)體間必然有群體共有的相似性［5］。因此,整體性和模糊性是其基本特點(diǎn)。整體性是指比較完整的反應(yīng)藥材的面貌，模糊性強(qiáng)調(diào)樣品之間的相似程度。近年來(lái)對(duì)黃芪藥材指紋圖譜的研究包括色譜法、光譜法以及其他方法。這里以介紹色譜法為主?，F(xiàn)介紹如下?！ ?色譜法 1.1HPLC指紋圖譜研究黃際薇等［6］ 采用剪碎黃芪藥材30.00g，甲醇浸泡過(guò)夜，超聲提取10min，過(guò)濾，回收甲醇至干，殘?jiān)?/p>
4、水10ml溶解后，以水飽和的正丁醇提取3次，20ml/次，合并正丁醇提取液、回收至干，甲醇溶解定容至5ml。使用黃芪甲苷做對(duì)照品。使用DAD檢測(cè)器。色譜條件為乙腈∶水(30∶70)二元梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)203nm；分析時(shí)間：60min。結(jié)果表明不同來(lái)源的黃芪藥材所含黃芪甲苷等成分均得到很好的分離，找到共有峰13個(gè)，其HPLC指紋圖譜基本一致，共有峰面積之和均大于各總峰面積的90%，但其共有峰面積的比值有一定差異。胡芳弟等［7］采用稱取藥材粉末2.5g，用甲醇超聲提取3次(30，30，30ml)，30min/次，蒸干甲醇，殘?jiān)?0ml水溶解，再用正丁醇提取4次(40，4
5、0，20，20ml)，分取正丁醇層、回收至干，殘?jiān)眉状汲暼芙?，定容?ml。使用毛蕊異黃酮和芒炳花素做對(duì)照品。使用DAD檢測(cè)器。色譜條件為A相水，B相乙腈；梯度洗脫B相含量在80min內(nèi)從4%變化至100%；檢測(cè)波長(zhǎng)254nm。結(jié)果找到26個(gè)共有峰，12批樣品相似度符合要求。賈曉斌等［8］取藥材粗粉2g，加甲醇50ml，回流提取2次，2h/次，合并甲醇液，回收甲醇，殘?jiān)訜崴?0ml溶解，用等量水飽和正丁醇提取5次，合并正丁醇液，用等量氨試液洗滌1次，棄去氨試液，正丁醇液水浴蒸干，殘?jiān)?0%乙腈溶解至5ml，離心，過(guò)濾，取濾液1ml，加參照物溶液1ml，既得。使用
6、人參皂苷做對(duì)照品。使用VSD指紋圖譜研究徐青等［10］分別建立了HPLC/DAD和HPLC/MSD圖譜。使用PAD檢測(cè)器，質(zhì)譜儀。色譜條件為流動(dòng)相：甲醇-水-異丙醇；檢測(cè)波長(zhǎng)203nm。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用條件為大氣壓化學(xué)電離(APCI)接口和離子源；氣化溫度400℃；加熱毛細(xì)管溫度250℃；夾套氣壓414kPa；輔助氣壓10AU；質(zhì)量掃描范圍100～1199u；掃描速率l.5S。以梯度洗脫及低波長(zhǎng)檢測(cè)得到的液相色譜圖，可應(yīng)用于不同產(chǎn)地黃芪藥材的指紋圖譜比較。紫外和質(zhì)譜兩種檢測(cè)器可對(duì)不同特性化臺(tái)物的檢測(cè)進(jìn)行互補(bǔ)，獲得相對(duì)充分的指紋圖譜信息。李翔等(第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文
7、《黃芪藥材色譜指紋圖譜的研究》2005)測(cè)定了黃芪藥材HPLC/MSD指紋圖譜。使用ELSD檢測(cè)器。色譜條件為流動(dòng)相：A相為乙腈，B相為水，梯度洗脫，A相在75min內(nèi)由5%變化至85%；柱后分流比8∶2。質(zhì)譜條件為離子源：大氣壓電離-電噴霧電離(API-ESI)；檢測(cè)模式：負(fù)離子；掃描范圍：m/z200～1000；干燥氣(N2)流速：9.0L·min-1；霧化氣壓力：30psi；干燥氣溫度：350℃；裂解電壓：110V；毛細(xì)管電壓：3500V。黃芪藥材HPLC-MS總離子流色譜指紋圖譜具有較好的穩(wěn)定性、精密度和重復(fù)性，相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)
