黃芩莖葉總黃酮對(duì)大鼠氣囊滑膜炎抗炎作用機(jī)制的研究

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1、黃芩莖葉總黃酮對(duì)大鼠氣囊滑膜炎抗炎作用機(jī)制的研究【摘要】研究黃芩莖葉總黃酮的抗炎機(jī)制。方法：制作大鼠氣囊滑膜炎模型，測(cè)定各組大鼠炎性滲出物中蛋白質(zhì)總量。采用酶聯(lián)免疫分析方法，定量檢測(cè)白三烯（LTB4）的生成量。結(jié)果：黃芩莖葉總黃酮組可明顯抑制炎性滲出物中蛋白質(zhì)及LTB4的生成。結(jié)論：黃芩莖葉總黃酮的抗炎作用機(jī)制與抑制5脂氧合酶活性有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】黃芩莖葉總黃酮抗炎蛋白質(zhì)總量白三烯B4AbstractObjective:Tostudythemechanismoftheantiaerocystarthro

2、meningitiseffectoftotalflavonoidsofBaicalSkullcapStemandLeaf.Methods:RatmodelofaerocystarthromeningitisadeandthetotalprotEinsandleukotrieneB4intheratinflammatoryexudatesusingenzymelinkedimmunoassayined.Results:TotalflavonoidsofBaicalSkullcapStemandLeafco

3、uldeffectivelyinhibittheformationofLTB4inpolymorphonuclearleucocytes.Conclusion:Itsantiinflammatoryactionmightberesultedfromitsinhibitionof5lipoxygenase.Ｋｅｙ?。鳎铮颍洌髏otalflavonoidsofBaicalSkullcapStemandLeaf;antiinflammatoryaction;totalprotEInamount;leuko

4、trieneB4承德的野生黃芩因?yàn)橘|(zhì)地堅(jiān)實(shí)，顏色純正，成為中藥材的優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品。以其根入藥，中醫(yī)認(rèn)為黃芩味苦性寒，入肺、心、膽、大腸經(jīng)，有清熱燥濕、瀉火解毒、安胎的功能。從黃芩莖葉中提取的黃芩莖葉總黃酮，實(shí)驗(yàn)研究已經(jīng)證實(shí)它具有很強(qiáng)的抗炎作用[1]，本試驗(yàn)將進(jìn)一步對(duì)其抗炎機(jī)制進(jìn)行探討，以期為黃芩莖葉總黃酮的開(kāi)發(fā)利用提供試驗(yàn)依據(jù)。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康雄性A高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)。1．4實(shí)驗(yàn)方法[2]隨機(jī)將大鼠分成3組，對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組1（小劑量黃芩莖葉總黃酮）、實(shí)驗(yàn)組2（大劑量黃芩莖葉總黃酮）。于實(shí)驗(yàn)第1天在

5、各組大鼠背部皮下注射經(jīng)過(guò)濾器過(guò)濾的空氣20ml，使大鼠背部形成氣囊，待第3天在原氣囊處再注射經(jīng)過(guò)濾器過(guò)濾的空氣20ml，同時(shí)于當(dāng)天各組大鼠開(kāi)始腹腔注射給藥，實(shí)驗(yàn)組1給予黃芩莖葉總黃酮60mg／kg,實(shí)驗(yàn)組2給予黃芩莖葉總黃酮180mg／kg，對(duì)照組給予緩沖液，連續(xù)給藥3d。實(shí)驗(yàn)第6天在各組大鼠背部皮下注射經(jīng)過(guò)濾器過(guò)濾的空氣l0ml后，再在氣囊內(nèi)注射2％甲醛1.5ml致炎。在致炎24h后的急性炎癥期，將大鼠斷頭處死，用Hank's液1ml灌洗氣囊，收集灌洗液，離心3000r/min，分別收集上清液，供各項(xiàng)指

6、標(biāo)測(cè)定。滲出液中蛋白質(zhì)測(cè)定應(yīng)用日立7170全自動(dòng)生化分析儀。LTB4測(cè)定用酶免試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，各組比較采用方差檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有顯著性。2結(jié)果滲出液中蛋白質(zhì)和LTB4測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。表1氣囊滑膜炎大鼠模型炎性滲出物中炎癥物質(zhì)含量注：1)與實(shí)驗(yàn)組2比較，P＜0.05，2）與對(duì)照組比較，P＜0.013討論機(jī)體損傷、感染和自身免疫性疾病等均程度不等地伴有急慢性炎癥過(guò)程，炎癥是機(jī)體清除異物和自身傷亡細(xì)胞的一種防御反應(yīng)。研究認(rèn)為，在

7、炎癥反應(yīng)遞質(zhì)中花生四烯酸(arachidonicacid,AA)的氧化旁路起著關(guān)鍵作用。這條旁路經(jīng)環(huán)氧酶和5脂氧酶兩條途徑分別代謝產(chǎn)生的產(chǎn)物即前列腺素(PGs)、白三烯(LTs)等炎癥遞質(zhì)[3]。其中前列腺素E2(PGE2)可增加血管通透性，LTB4可致白細(xì)胞趨化、聚集、脫顆粒和產(chǎn)生超氧陰離子，引起和加重炎癥反應(yīng)。經(jīng)典的非甾體抗炎藥物如阿司匹林主要抑制環(huán)氧酶途徑，能有效阻斷花生四烯酸5脂氧合酶途徑代謝的抑制藥尚不多見(jiàn)。本研究觀察黃芩莖葉總黃酮對(duì)大鼠氣囊滑膜炎的抗炎作用，結(jié)果表明：（1）黃芩莖葉總黃酮可

8、降低毛細(xì)血管通透性，血管內(nèi)的蛋白質(zhì)成分向組織內(nèi)滲出減少；中性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞在組織中聚集減少；組胺、緩激肽增加血管通透性的物質(zhì)減少,有利于炎癥中血管通透性恢復(fù)正常。（2）通過(guò)比較可看出，黃芩莖葉總黃酮的抗炎效果與劑量大小有關(guān)，其作用具有劑量依賴性。故黃芩莖葉總黃酮具有很強(qiáng)的抗炎作用。LTB4可激活中性白細(xì)胞的多種反應(yīng)，其中包括加速炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，并可促進(jìn)中性白細(xì)胞在微血管內(nèi)皮粘著，進(jìn)而滲出血管，協(xié)同其它趨化因子使炎癥反應(yīng)擴(kuò)