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《黃芩莖葉總黃酮對(duì)原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、黃芩莖葉總黃酮對(duì)原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用論文李素婷，楊鶴梅，周曉慧【關(guān)鍵詞】黃芩莖葉總黃酮；,,肝細(xì)胞；,,原代培養(yǎng)；,,保護(hù)作用；,,機(jī)制摘要：目的研究黃芩莖葉總黃酮（SSTF）對(duì)原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用及其機(jī)理。方法采用胰蛋白酶消化、分離大鼠肝細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)，用H2O2和CCl4體外誘導(dǎo)肝細(xì)胞損傷，同時(shí)加以不同濃度的SSTF對(duì)肝細(xì)胞保護(hù)，檢測培養(yǎng)液中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）活性、肝細(xì)胞內(nèi)丙二醛（MDA）含量和谷胱甘肽過氧化物酶（GSHpx）活性，MTT法測定肝細(xì)胞增殖活性。結(jié)果與模型組比較，SSTF明顯抑制H2O2和CCl4引起的肝細(xì)
2、胞培養(yǎng)液中ALT活性的升高.freelofScutellariabaicalensisStem-leafTotalFlavonoidonPrimaryCulturedRatHepatocytesInjuredbyH2O2orCCl4Abstract：ObjectiveTostudytheprotectiveeffectandpossiblemechanismofScutellariabaicalensisstem-leaftotalflavonoid(SSTF)onprimaryrathepatocyesinjuredbyH2O2orCCl4.MethodsPr
3、imaryhepatocytesaryculturedhepatocytes.Thecontentsofmalondialdehyde(MDA)andactivityofglutathionperoxidase(GSH-px)inhepatocytesandtheactivityofALTinculturalsupernatantinedbygeneralmethods,theviabilitiesofhepatocyteseasuredbyMTT.Resultsparedodelgroup,SSTFcouldrestoreremarkablyALTleveli
4、nsupermatantofculturalhepatocytes,decreaseMDAcontentandelevateGSHpxactivityofhepatocytes,.freelaryrathepatocyesinjuredbyH2O2orCCl4.Thesemightbeassociatedarycultured;Protectiveeffect;Mechanism.黃芩莖葉總黃酮（Scutellariabaicalensisstem-leaftotalflavonoid，SSTF）是承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所從唇型科植物黃芩的莖葉部分提取的有效成分，整
5、體實(shí)驗(yàn)已證實(shí)SSTF具有抗炎、抗氧化、抗動(dòng)脈粥樣硬化及保肝等作用［1～4］。為進(jìn)一步研究SSTF保肝作用及其機(jī)制，本文采用胰蛋白酶消化法分離肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，用CCl4和H2O2體外誘導(dǎo)肝細(xì)胞氧化損傷模型，在細(xì)胞水平上證實(shí)SSTF對(duì)肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制，為進(jìn)一步闡明SSTF的藥理作用及中藥新藥的研發(fā)和應(yīng)用提供可靠依據(jù)。1材料與方法1.1藥品與試劑SSTF（含總黃酮73%）：承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所提供，臨用前以蒸餾水配制，用飽和碳酸氫鈉調(diào)pH=7.6；Hanks液高壓滅菌，4℃保存；0.80gL-1胰蛋白酶：用Hanks液溶解，過濾除菌，調(diào)pH7.2，
6、分裝,-30℃保存；1%PVP：北京華美公司提供；基礎(chǔ)培養(yǎng)液：RPMI1640培養(yǎng)基10.0g，用超凈水900ml溶解，5.6%NaHCO3調(diào)pH至7.2，定溶到1000ml，過濾除菌，臨用前每80ml，加入新生小牛血清20ml，青霉素100μgml-1，鏈霉素100μgml-1，胰島素5μgml-1；MTT：SIGMA公司；ALT，MDA，GSH-Px測定試劑盒：南京建成生物工程研究所。1.2動(dòng)物2~3d齡SD大鼠乳鼠，雌雄不限，清潔級(jí)，承德醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理中心提供。1.3儀器CO2培養(yǎng)箱（TaibaiLNA122D日本），MD100半自動(dòng)生化分析儀（美國B
7、ayer公司），721DA含量和GSH-PX活性，MTT比色法測定96孔板中肝細(xì)胞的存活率。1.6SSTF對(duì)CCl4誘導(dǎo)肝細(xì)胞損傷的影響設(shè)CCl4損傷模型組、SSTF(50，100，200mgL-1)3個(gè)劑量保護(hù)組、正常對(duì)照組，每組設(shè)8個(gè)復(fù)孔。肝細(xì)胞培養(yǎng)24h后換液，模型組和SSTF組加入CCl4(二甲基亞楓配制)，終濃度為10mmolL-1，同時(shí)SSTF組加入不同濃度的SSTF，正常對(duì)照組加不含血清的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)6h，收集24孔板中培養(yǎng)上清液檢測ALT活性，MTT比色法測定96孔板中肝細(xì)胞的存活率。1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以(±s)表示，用SPSS計(jì)算機(jī)軟件進(jìn)
8、行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,組間比較采
