資源描述：
《治療劑量高壓氧對胎鼠及新生鼠視網(wǎng)膜血管的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、治療劑量高壓氧對胎鼠及新生鼠視網(wǎng)膜血管的影響作者：王彥林，肖小敏，丁琦，王雪梨【摘要】目的:探討臨床治療劑量高壓氧（HBO）對胎鼠及新生鼠視網(wǎng)膜的影響.方法:SD新生大鼠，隨機分為實驗1～3組、對照組（常壓空氣組）及ROP模型組各5只，實驗1組于孕鼠分娩前單純予治療劑量的HBO5d（2ATA，800mL/LO2，1h）、實驗2組新生大鼠不僅予宮內(nèi)HBO，且出生后7d起繼續(xù)HBO5d、實驗3組僅予新生鼠7dHBO（2ATA，800mL/LO2，1h）連續(xù)5d；對照組置于常壓空氣中；ROP模型組第7
2、d常壓吸氧（800mL/L）5d，然后吸空氣.全部新生大鼠于17d制作視網(wǎng)膜組織切片，計數(shù)突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的細胞核數(shù)目及免疫組織化學方法測定血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）在視網(wǎng)膜的表達.結(jié)果:實驗1～3組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的細胞核數(shù)目與對照組相比，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）,ROP模型組與對照組及實驗1～3組相比，差異有統(tǒng)計學意義（37.9±6.1vs1.4±0.9,1.6±1.1,1.4±0.8,P<0.01）.實驗各組及對照組的VEGF的表達均以弱陽性為主，均弱于ROP模型組，
3、差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）.結(jié)論:臨床治療劑量高壓氧對胎鼠及新生鼠視網(wǎng)膜無影響.【關(guān)鍵詞】高壓氧；早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜?。谎軆?nèi)皮生長因子；視網(wǎng)膜血管；動物模型0引言近年來，高壓氧作為一種較新的治療手段走上了圍產(chǎn)科治療的舞臺，在胎兒生長受限、胎兒宮內(nèi)窘迫以及預(yù)防新生兒缺血缺氧性腦病等方面頗有療效［1-2］.然而治療劑量的HBO帶給組織器官的高氧濃度是否會引起胎兒尚未成熟的視網(wǎng)膜發(fā)生氧毒性損傷，導致新生兒發(fā)生早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病（retinopathyofprematurity,ROP）一直是國內(nèi)外
4、擔心的問題，目前大多數(shù)觀點認為HBO治療對視力無影響，但其結(jié)論多僅通過眼科隨訪獲得［1］.我們通過模擬臨床HBO對圍產(chǎn)兒的治療情況，通過計數(shù)突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的細胞核數(shù)目及VEGF的表達來探討治療劑量高壓氧對胎鼠及新生鼠視網(wǎng)膜的影響.1材料和方法1.1材料SD成年雌鼠40只，雄鼠20只，由廣東省動物實驗中心提供，按2∶1同籠.每天早晨檢查陰道涂片，用沾有生理鹽水的棉簽取陰道分泌物，涂抹到預(yù)先放有生理鹽水的載波片上，鏡檢發(fā)現(xiàn)精子，算為孕期的第零天.選擇受孕的20只孕鼠隨機分為實驗組（HBO組，n=1
5、0）和常壓空氣組（n=10）.醫(yī)用多人空氣加壓艙，型號NG280900，浙江寧波高壓氧艙總廠制造.1.2方法實驗組孕鼠于妊娠16d進入高壓氧艙內(nèi)，置于密閉塑料氣囊中，由測氧儀監(jiān)控氣囊內(nèi)氧濃度達800mL/L，氧艙壓力0.2MPa(表壓)，加壓10～15min，穩(wěn)壓期60min，緩慢減壓10～15min出艙，其后打開氣囊，暴露于正?？諝庵?，每天1次，連續(xù)5d.常壓空氣組孕鼠只置于常壓空氣中.全部孕鼠于21d分娩，HBO組母鼠所產(chǎn)新生存活大鼠隨機選擇10只分配到實驗1組（n=5）和實驗2組（n=5
6、）.常壓空氣組母鼠所產(chǎn)新生存活大鼠隨機選擇15只分配到實驗3組（n=5）、對照組（n=5）及ROP模型組（n=5），期間如有新生鼠死亡，則另外選取妊娠大鼠補充.實驗1,3組新生大鼠于出生7d起置于HBO下1h（2ATA，800mL/LO2），連續(xù)5d后置于常壓空氣中5d；實驗2組及對照組新生大鼠置于常壓空氣中.ROP模型組新生大鼠按Smith提供的方法建立ROP模型：將7d的大鼠先置800mL/LO2中飼養(yǎng)5d，然后在空氣中繼續(xù)飼養(yǎng).1.2.1視網(wǎng)膜血管計數(shù)將各組新生大鼠于出生17d頸椎脫臼處死
7、，各組5只10只共計50只眼，標記方向并編號，置于40g/L多聚甲醛中固定24h以上，常規(guī)脫水石蠟包埋，矢狀面平行視神經(jīng)連續(xù)6μm切面，每只眼均勻間斷抽取10個切面（有視神經(jīng)斷面的切面不計入在內(nèi)）雪夫高碘酸蘇木素染色，顯微鏡下計數(shù)突破內(nèi)界膜的血管內(nèi)皮細胞［3］.1.2.2視網(wǎng)膜VEGF表達的檢測從每組各隨機抽取20張未經(jīng)染色的6μm視網(wǎng)膜切片，采用EnVisionTM二步法，VEGF兔抗大鼠mAb由北京中山生物工程有限公司提供.VEGF兔抗大鼠mAb工作濃度為:1∶50.以細胞質(zhì)著淡黃色至棕褐
8、色顆粒為陽性細胞，陽性染色采用半定量分級，每張切片選取5個不重復(fù)的高倍視野（400倍）計算陽性細胞的平均數(shù)，陽性細胞≤25%為┼,26%～50%為,51%～74%為,≥75%為.統(tǒng)計學處理：采用方差分析及LSDt檢驗比較各組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的細胞核數(shù)目，VEGF的表達采用等級資料表示，利用秩和檢驗進行統(tǒng)計學分析.2結(jié)果2.1視網(wǎng)膜血管計數(shù)實驗1～3組新生鼠突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的血管內(nèi)皮細胞數(shù)目分別為1.4±0.9，1.6±1.1和1.4±0.8，與對照組1.2±0.9相比，差異無統(tǒng)計學意義（
