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1、診斷劑量彩超對(duì)胎鼠腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響作者：段云友程顏苓曹鐵生田蓉【關(guān)鍵詞】彩色多普勒超聲關(guān)鍵詞：彩色多普勒超聲;胎鼠;神經(jīng)細(xì)胞;凋亡0引言二維超聲照射與動(dòng)物器官組織凋亡的研究已冇報(bào)道[1],但彩色多普勒超聲（彩超）對(duì)胚胎器官凋亡的研究未見報(bào)道，我們用診斷劑量彩超照射宮內(nèi)胎鼠，探討其對(duì)胎鼠中樞神經(jīng)元凋亡的影響.1材料和方法健康成熟雌性大鼠20只，受孕第18日接受超聲照射（美國Acuson公司Sequoia512型彩色超聲診斷儀，探頭頻率3.5MHz,）,按照射時(shí)間隨機(jī)分為4組，Omin（對(duì)照組）、lOmin,20min及30min,每組5只?對(duì)
2、照組進(jìn)行假照射，其余條件一律相同?輻照后24h剖宮取胎，斷頭取腦組織固定，常規(guī)石蠟包埋連續(xù)冠狀切片??在光鏡檢查的取材部位取皮質(zhì)，于20mL・L-l戊二醛屮4°C固泄，常規(guī)包埋，切片，染色，采用JIM-2000型透射電鏡觀察攝片?使用中國BOSTER公司提供TUNEL試劑盒染色.2結(jié)果2.1TUNEL標(biāo)記結(jié)果對(duì)照組及彩超照射lOmin組，胎鼠腦組織中凋亡的神經(jīng)元極少見，凋亡細(xì)胞百分率分別為(0?9±0?51)%和(1.4±0.40)%,兩者之間無顯著性差異(P>0.01);持續(xù)照射20min,腦皮質(zhì)表面的凋亡細(xì)胞百分率明顯增
3、多達(dá)(6.1±0?38)%,與對(duì)照組及l(fā)Omin組有顯著性差異(P<0.01)?照射時(shí)間延長至30min,凋亡細(xì)胞百分率繼續(xù)增加(8.3土0.44)%),與對(duì)照組、lOmin組及20min組均有顯著性差異(P<O.01).TUNEL陰性對(duì)照組無陽性細(xì)胞.2.2電鏡觀察結(jié)果照射30min組胎鼠腦神經(jīng)元體積縮小，胞質(zhì)內(nèi)有大量空泡，線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等基本正常，結(jié)構(gòu)完整清晰，細(xì)胞核呈高電子密度，染色體向核膜靠攏聚集成塊狀或環(huán)狀.3討論細(xì)胞凋亡是一種不同于細(xì)胞死亡的形態(tài)學(xué)改變，涉及到生命活動(dòng)的許多領(lǐng)域，目前已被認(rèn)為是神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中的正
4、常事件，并在神經(jīng)系統(tǒng)的成熟或疾病中可能有重要意義[2]?多種因素可誘導(dǎo)胎鼠神經(jīng)元凋亡[3]?我們利用彩超輻照孕18d的大鼠，24h后觀察胎鼠腦組織，發(fā)現(xiàn)照射20min以上可誘導(dǎo)皮層神經(jīng)元發(fā)生凋亡，并且隨輻照時(shí)間的延長，TUNEL標(biāo)記的陽性細(xì)胞數(shù)增多，說明診斷劑量的彩超照射一定時(shí)間后可誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡.TUNEL技術(shù)是根據(jù)凋亡細(xì)胞核內(nèi)DNA被切割后，裸露出游離的3'末端，應(yīng)用末端轉(zhuǎn)移酶將經(jīng)生物素標(biāo)記的dUTP連接到3'末端的原理，作為識(shí)別凋亡細(xì)胞的標(biāo)志[4].由于它會(huì)對(duì)一些細(xì)胞核出現(xiàn)非特異性標(biāo)記，因而形態(tài)學(xué)觀察仍是迄今為止判斷凋亡最經(jīng)典、最可靠的
5、方法[5]?我們利用TUNEL技術(shù)檢測(cè)到彩超誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡集屮于皮層，選取皮層細(xì)胞進(jìn)行電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)了典型的凋亡細(xì)胞改變，證實(shí)了彩超照射20min以上確實(shí)能誘導(dǎo)皮層神經(jīng)元發(fā)生凋亡.大腦的發(fā)育從最初形成到逐漸成熟要經(jīng)過神經(jīng)元的增生、分化、遷移、死亡等一系列過程，嚴(yán)格按照細(xì)胞內(nèi)固有的程序和外界環(huán)境各因素相互協(xié)調(diào)，從而形成其穩(wěn)定的精細(xì)結(jié)構(gòu)和功能，一旦受到干擾，就有可能引起結(jié)構(gòu)紊亂和功能障礙?胎齡16?18d的鼠腦細(xì)胞正處于遷移階段，對(duì)電離輻射具有較高的敏感性[6]?本實(shí)驗(yàn)證實(shí)此期對(duì)超聲照射亦較敏感?雖然目前對(duì)大腦發(fā)育中的遷移延遲與生物體發(fā)育畸形間的
6、關(guān)系尚無直接證據(jù)，但據(jù)推測(cè)二者冇一定的內(nèi)在聯(lián)系?實(shí)驗(yàn)及流行病學(xué)調(diào)查表明孕期接受超聲照射，仔鼠的神經(jīng)行為能力下降?這些現(xiàn)象與神經(jīng)元遷移階段受損有無關(guān)系,是否與細(xì)胞凋亡有關(guān)尚需深入研究.參考文獻(xiàn)：[1]杜聯(lián)芳，張青萍，劉望彭?診斷超聲與大鼠角膜細(xì)胞凋亡[J]?中國超聲醫(yī)學(xué)雜志，2000;16(9):645-647?[2]SastryPS,RaoKS?Apoptosisandnervoussystem[J].JNeu-rochem,2000;74(1):1-20.[3]HossainMM,NakayamaH,GotoN.Invitroinductio
7、nofapop-tosisofdevelopingbraincel1sby5~azacytidine[J]?IntJDevNeurosci,1996;14(1):11-17?[4]屮華病理學(xué)雜志編輯委員會(huì)?全國端粒酶、P53和細(xì)胞凋廣的研究及應(yīng)用研討會(huì)會(huì)議紀(jì)要[J]?中華病理學(xué)雜志，2000;29(1):9-11-2000.[5]鄭駿年，謝叔良?細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J]?國外醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)及檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè),1999;20(3):124-126._6]TaguchiYH,FushikiS,KinoshitaCetal.Effectsoflow
8、-doseX-irradiationonthedevelopmentofthemousecerebellarcortex[J]?JRadiatRes,
