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1、苯酚硫酸比色法測(cè)定紅毛五加皮多糖的含量論文鐘世紅,衛(wèi)瑩芳,古銳,黃小雪,謝武超,楊湘【摘要】目的建立紅毛五加皮多糖的含量測(cè)定方法,對(duì)不同產(chǎn)地樣品進(jìn)行測(cè)定。方法采用苯酚-硫酸比色法。結(jié)果葡萄糖的線性范圍為24.05~54.11μg/ml,平均加樣回收率為97.80%.freelinethecontentofpolysaccharidesincortexacanthopanacisgiraldiifromdifferentregions.MethodsPhenol-sulfuricacidcolorimetryinethecontentofpolysaccharides.Result
2、sThelinearrangeofglucosel.Theaveragerecoveryethodisrapid,accurateandcanbeusedforthequantitycontrolofA.GiraldiiHarms.Thepolysaccharidescontentofbarkshouldnotbeloisvaluableinsomedegree.Keyetry 苯酚硫酸比色法測(cè)定紅毛五加皮多糖的含量論文鐘世紅,衛(wèi)瑩芳,古銳,黃小雪,謝武超,楊湘【摘要】目的建立紅毛五加皮多糖的含量測(cè)定方法,對(duì)不同產(chǎn)地樣品進(jìn)行測(cè)定。方法采用苯酚-硫酸比色法。結(jié)果葡萄糖的線性范圍為
3、24.05~54.11μg/ml,平均加樣回收率為97.80%.freelinethecontentofpolysaccharidesincortexacanthopanacisgiraldiifromdifferentregions.MethodsPhenol-sulfuricacidcolorimetryinethecontentofpolysaccharides.ResultsThelinearrangeofglucosel.Theaveragerecoveryethodisrapid,accurateandcanbeusedforthequantitycontrolofA.
4、GiraldiiHarms.Thepolysaccharidescontentofbarkshouldnotbeloisvaluableinsomedegree.Keyetry紅毛五加皮為四川地區(qū)的習(xí)用藥材和岷江上游羌民族特色藥材,收載于《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》1987年版,具有祛風(fēng)濕、強(qiáng)筋骨、利關(guān)節(jié)之功效。作為紅毛五加中的一類主要有效成分,紅毛五加多糖(AGP)已被廣泛證實(shí)具有提高免疫[1]、抗腫瘤[2]、抗病毒[3]等藥理活性。因此,多糖含量是評(píng)價(jià)紅毛五加皮質(zhì)量的重要指標(biāo)。本研究建立了以苯酚-硫酸比色法測(cè)定紅毛五加皮中多糖的方法,并對(duì)不同產(chǎn)地樣品進(jìn)行了含量測(cè)定,以期為該藥材的質(zhì)量控
5、制提供科學(xué)依據(jù)。1儀器與試藥1.1儀器UV1102紫外/可見分光光度計(jì)(上海天美),電子天平(SartoriusBS224S北京)。1.2試藥試劑D-葡萄糖對(duì)照品(分析純,成都市科龍化工試劑廠)。4%苯酚為182℃餾分加蒸餾水配制而成,乙醇、丙酮等試劑均為分析純。水為蒸餾水。1.3樣品自采或購(gòu)買,經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)衛(wèi)瑩芳教授鑒定為紅毛五加AcanthopanaxgiraldiiHarms的干燥莖皮及木心。樣品均粉碎為中粉。2方法與結(jié)果2.1紅毛五加多糖的提取與精制稱取紅毛五加莖皮粉末60g,置索氏提取器中,依次用石油醚(60~90℃)、乙醚、80%乙醇回流提取至無色(各約8h)。殘?jiān)?/p>
6、揮干乙醇,每次加水800ml回流提取1h,共提取4次,趁熱過濾,合并濾液,減壓濃縮至約200ml。加95%乙醇使含醇量為80%,攪勻,冰箱中靜置過夜,抽濾得粗多糖。加水配成1%粗多糖溶液,Sevage法脫蛋白[4]。加入30%H2O2脫色[5]。所得溶液減壓濃縮至約200ml,加入95%乙醇使溶液含醇量為80%,攪勻,冰箱中靜置過夜,抽濾得下層多糖。以無水乙醇、丙酮、乙醚依次洗滌多糖,60℃真空干燥,得黃白色的紅毛五加精多糖粉末。2.2供試品溶液制備方法考察稱取紅毛五加莖皮粉末約1.0g,共4份,精密稱定,置索氏提取器中,加入80%乙醇回流提取至無色。殘?jiān)鼡]干乙醇,每次加水適量回流
7、提取30min,其中2份提取3次,另2份提取4次,抽濾,合并濾液置500ml容量瓶中,加蒸餾水稀釋至刻度。分別精密吸取各供試品溶液0.8ml,各加入1.2ml蒸餾水、4%苯酚溶液1.0ml,搖勻,加入濃硫酸5.0ml,40℃水浴加熱15min,置冰水中冷卻5min,于487nm測(cè)定吸光度。結(jié)果無明顯差異。遂確定供試品溶液的制備方法為:精密稱取樣品粉末約1.0g,置索氏提取器中,加入80%乙醇回流提取至無色。殘?jiān)鼡]干乙醇,加水適量回流提取3次,30min/次,抽濾,合并