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1、紫外分光光度法測定長白楤木根、莖、葉中總黃酮含量作者:寧德利阮洪生韓承偉黃金仁殷奎德【摘要】 目的對長白楤木根、莖、葉中所含總黃酮的含量進(jìn)行測定。方法采用紫外分光光度法于360nm波長處測定。結(jié)果總黃酮在4.08~32.64μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,其回歸方程為:A=0.0183C+0.0127,R2=0.9992;平均加樣回收率為100.63%(RSD=1.93%)。結(jié)論該方法簡便、準(zhǔn)確,可用于長白楤木的質(zhì)量控制?!娟P(guān)鍵詞】長白楤木;紫外分光光度法;總黃酮 Abstract:ObjectiveToestablishamethod
2、forthedeterminationofthetotalflavonoidsinroots,stalksandleavesofAraliacontinentalisKitaginedbyspectrophotometricmethodat360nmplesizeshol,andthecurveethodiseasyandaccurate,andcanbeusedforqualitycontrolofAraliacontinentalisKitagetricmethod;Totalflavonoids 長白楤木Araliacontine
3、ntalisKitagal/g藥材左右,濃縮液加2倍量水稀釋,靜置24h。抽濾除去不溶性物質(zhì),濾液再次濃縮后加水至一定體積,即得長白楤木樣品溶液[4]。 2.2對照品溶液的制備精密稱取蘆丁對照品10.2mg,置于50ml容量瓶中,加入95%乙醇定容至刻度,超聲溶解5min,配成0.204mg/ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液,冷藏保存?zhèn)溆?。 ?.3測定波長選擇稀釋到一定濃度的對照品和樣品溶液分別加10%AlCl3溶液1ml,以95%乙醇定容,搖勻,顯色30min。在200~600nm波長范圍內(nèi)紫外掃描。發(fā)現(xiàn)360nm處出現(xiàn)最大吸收波長,實(shí)驗(yàn)中選擇測定波
4、長為360nm?! ?.4線性關(guān)系考察精密吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液0,0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5,4ml于25ml容量瓶中,分別加入10%AlCl3溶液1ml,95%乙醇定溶至刻度,搖勻。顯色30min后于紫外分光光度計(jì)下測定吸收值,以吸光度為縱坐標(biāo),蘆丁對照品溶液的濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果以吸光度A對濃度C作最小二乘法回歸,標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:A=0.0183C+0.0127,R2=0.9992,線性范圍為4.08~32.64μg/ml?! ?.5穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取2ml樣品液于25ml容量瓶中加10%AlCl3溶液1ml,用9
5、5%乙醇定容至刻度,于室溫條件下每隔10min測定1次吸光值,結(jié)果發(fā)現(xiàn)供試品溶液放置30min后顯色完全,且在1h內(nèi)穩(wěn)定,RSD=2.13%?! ?.6精密度實(shí)驗(yàn)配制一定濃度樣品溶液測定吸光度,連續(xù)測定5次其RSD=1.25%,說明儀器精密度良好?! ?.7加樣回收率實(shí)驗(yàn)分別精密量取已知總黃酮含量的提取溶液5份,分別加入一定量的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品,按上述操作方法進(jìn)行,用紫外法測得吸光度,得出總黃酮含量,根據(jù)回收率公式計(jì)算出加樣回收率。結(jié)果見表1。結(jié)果表明,本方法具有良好的加樣回收率?! ”?加樣回收率實(shí)驗(yàn)(略) 2.8樣品溶液中總黃酮的含量測定
6、按“2.2”項(xiàng)方法分別制備1年生、2年生、3年生、5年生根莖葉樣品溶液分別取適量樣品溶液于25ml容量瓶中加入10%AlCl3溶液1ml,以95%乙醇定容搖勻,室溫顯色30min,在紫外分光光度計(jì)下測定吸光值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算結(jié)果見表2?! ”?長白楤木總黃酮含量測定結(jié)果(略) 表2可知隨著生長時(shí)間的增加,長白楤木中總黃酮含量有所增加。其中根、莖中總黃酮含量以3年生最多,生長時(shí)間不同有所波動(dòng),葉中總黃酮含量隨生長時(shí)間增長而增加,平均含量中3年生的長白楤木總黃酮含量最多。因此,長白楤木根、莖、葉最佳采收時(shí)間應(yīng)為其生長3年和5年時(shí)?! ?/p>
7、3結(jié)論 關(guān)于長白楤木成分分析的研究目前僅有關(guān)于多糖的有關(guān)報(bào)道,而關(guān)于其黃酮的含量測定一直未見報(bào)道。本文所采用的方法測定結(jié)果表明的葉中總黃酮含量最多,為開發(fā)利用黃酮類藥物和保健品植物資源提供理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)采用紫外-分光光度法測定長白楤木中總黃酮的含量,精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性良好,加樣回收率合格,為長白楤木中總黃酮的含量測定提供了一種簡便可行的方法,為長白楤木的質(zhì)量控制提供了評價(jià)手段?!緟⒖?/p>