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《同種移植激活的宿主樹突狀細(xì)胞能介導(dǎo)免疫耐受》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、同種移植激活的宿主樹突狀細(xì)胞能介導(dǎo)免疫耐受作者:許奇齊，李玫，王松霞，薛殷彤【摘要】目的依據(jù)T細(xì)胞的發(fā)育機制理論，誘導(dǎo)針對移植物特抗原的異性免疫耐受。方法先用致死劑量的γ射線，將受者的T細(xì)胞及干細(xì)胞去除，形成了一個不具干細(xì)胞、前T細(xì)胞和T細(xì)胞的受者模型，稱受者模型Ⅰ。同時經(jīng)同種皮膚移植制造正常的受者對供者器官的免疫排斥反應(yīng)的模型，稱模型Ⅱ。從模型Ⅱ中經(jīng)免疫磁珠分選取得被供者抗原所激活的、具有抗原提呈功能的樹突狀細(xì)胞，與正常的事先準(zhǔn)備好的受者骨髓細(xì)胞在體外混合后回輸至受者模型Ⅰ中。受者Ⅰ完成免疫造血功能重建后，再對其行同種皮膚移
2、植。分5組，分別觀察移植皮片的存活時間，并常規(guī)病理組織切片和流式細(xì)胞分析檢測。結(jié)果由T細(xì)胞發(fā)育的上游誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性的免疫移植耐受，比較對照組，實驗組皮片存活時間顯著延長（P＜0.005），流式細(xì)胞分析和病理組織學(xué)分析差異也有顯著性。結(jié)論在所建立的模型和系統(tǒng)中，能誘導(dǎo)移植物特異性的免疫耐受，也進(jìn)一步驗證了胸腺的陰性選擇理論?！娟P(guān)鍵詞】樹突狀細(xì)胞；移植；耐受；胸腺；T細(xì)胞發(fā)育Inductionoftransplantationtoleranceicselectioniscriticalforthematurationofbonem
3、arroicmedullaandisnormallymediatedbybonemarroacrophages.Immunodominantallopeptide-pulsedhostdendriticcellscansuccessfullyinducetransplantationtolerance.MethodsHostdendriticcellsarroarroarromunosuppression，transfusionofdonorantigensactivateddendriticcellscanprolongsk
4、inallograftsurvivalmarkedly.【Keyent；dendriticcells；transplantation；tolerance；thymus器官移植在人造組織、器官成功應(yīng)用之前仍然是挽救某些不可逆病變的最優(yōu)的治療手段。而造成移植手段失敗的主要原因是由于移植后的排斥反應(yīng)造成［1］。發(fā)展更為精細(xì)的組織配型以及大量新的免疫抑制藥物的開發(fā)與應(yīng)用是目前國內(nèi)外對付排斥反應(yīng)的手段。但是，移植供體的局限性必將導(dǎo)致HLA配型的局限性；而免疫抑制劑的毒性和副作用又限制了其長期和大量的應(yīng)用［2，3］。因此，如何克服免疫排斥
5、反應(yīng)目前仍然是國內(nèi)外外科學(xué)家和醫(yī)生急于探討和急需解決的課題。誘導(dǎo)移植受體對供體器官產(chǎn)生特異性免疫耐受可以避免長期應(yīng)用免疫抑制藥物所引起的非特異性免疫抑制及其他毒副作用，被認(rèn)為是防止器官移植排斥的理想方法［4～6］?！ 。约?xì)胞，是介導(dǎo)細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)的核心細(xì)胞，也是排斥反應(yīng)中的核心細(xì)胞。如果能使Ｔ細(xì)胞對于移植供體產(chǎn)生免疫耐受，將成為解決排斥反應(yīng)的有效方法。但是，由于外周ＴＣＲ?guī)斓呢S富內(nèi)涵，以及供體組織器官的抗原多樣性，使得誘發(fā)外周Ｔ細(xì)胞對于移植產(chǎn)生耐受的方案具有相當(dāng)?shù)碾y度，至今在國內(nèi)外的解決辦法也就是應(yīng)用一些T細(xì)胞的抑制劑。為
6、此，我們設(shè)計新的技術(shù)路線，要尋求出一種方法，既能誘導(dǎo)出T細(xì)胞對供體組織器官的耐受，而又能保持T細(xì)胞的正常免疫功能，以期待得到解決此問題的理想方案。眾所周知，外周不同的Ｔ細(xì)胞和TCR都是源于相同的骨髓來源的前T細(xì)胞，其多樣性是在胸腺發(fā)育過程中通過TCR基因重排而產(chǎn)生的，而其自身免疫耐受主要是產(chǎn)生于T細(xì)胞在胸腺發(fā)育過程中的陰性選擇，通過陰性選擇，克隆清除自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞，這是中樞耐受的主要機制之一［7，8］；最新的研究還發(fā)現(xiàn)，非刪除性的耐受在中樞耐受中也有著極其重要的作用，主要包括CD4+、CD8+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞Treg的作用［
7、5，6］；S.F.Olua-Aldrich，Inc公司。Dynabeads○R小鼠panT(Thy1.2)磁珠標(biāo)記的抗體購自Dynal，Inc.公司。PE標(biāo)記抗小鼠CD4抗體，F(xiàn)ITC標(biāo)記抗小鼠CD8抗體由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部免疫學(xué)系提供。DMEM和PBS由北京大學(xué)人民醫(yī)院提供。1.3激活并分選宿主樹突狀細(xì)胞為激活宿主樹突狀細(xì)胞（DCs），在分選細(xì)胞前的第１０天，給BALB/c宿主動物行同種異體皮膚移植，皮片供者為C57BL/6鼠。然后于收獲細(xì)胞的當(dāng)天處死這些BALB/c宿主動物，取它們的脾臟，通過HISTOPAQUE○R-1083
8、小鼠淋巴細(xì)胞分層液離心分層收獲單核細(xì)胞，再使用Dynabeads○R小鼠panT(Thy1.2)磁珠抗體通過陰性分選去除小鼠Thy1.2陽性的細(xì)胞，最終得到含激活DCs的小鼠脾細(xì)胞，用DMEM調(diào)整細(xì)胞濃度到3.0×107cells/ml。1.4宿主骨髓細(xì)胞分選用１ｍｌ注射器使
