槲皮素抑制卵巢癌細(xì)胞生長的作用研究

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1、槲皮素抑制卵巢癌細(xì)胞生長的作用研究曾維誠張藝段承剛何濤劉佳佳【摘要】目的觀察槲皮素對卵巢癌細(xì)胞生長的影響，為尋找治療卵巢癌的新藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)、光鏡觀察及MTT法測定細(xì)胞活性等方法，對比卵巢癌細(xì)胞在槲皮素作用不同時(shí)間后的生長情況和細(xì)胞活性，探討槲皮素對卵巢癌細(xì)胞生長的影響。結(jié)果加入50μmol/L槲皮素后，卵巢癌細(xì)胞的生長受到明顯的抑制，且呈時(shí)間依賴性。結(jié)論槲皮素能夠抑制卵巢癌細(xì)胞的生長?！娟P(guān)鍵詞】槲皮素卵巢癌細(xì)胞抑制槲皮素（Quercetin,Que）是一類廣泛分布于被子植物的花葉部分的黃酮類化合物，研究發(fā)現(xiàn)槲皮素具

2、有擴(kuò)張冠脈、降血脂、清除自由基、抗炎、抗過敏、調(diào)節(jié)免疫及抗腫瘤的作用[1]。而卵巢癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，早期診斷困難，化療藥物治療副作用大、療效差，因此尋找價(jià)格低廉，副作用小，療效好的藥物成為卵巢癌治療的一個(gè)重要突破口。本實(shí)驗(yàn)擬通過觀察槲皮素對卵巢癌細(xì)胞株SKOV3生長的影響，為槲皮素應(yīng)用于卵巢癌的臨床治療提供實(shí)驗(yàn)資料和理論依據(jù)。1.材料和方法1.1試劑和器材卵巢癌細(xì)胞株由四川大學(xué)華西醫(yī)院婦產(chǎn)科惠贈；槲皮素購自Sigma公司；RPMI-1640，胎牛血清（FCS）購自Gibco公司；MTT購自北京華瑞生物公司。其它試劑均為國產(chǎn)分析

3、純。C-2323型CO2培養(yǎng)箱為美國Slshelab公司產(chǎn)品；MAXIMASC型超純水儀為英國EegaDemon公司產(chǎn)品；EXL-800型酶標(biāo)儀為美國BIO-TEK公司產(chǎn)品；XDS-1B型倒置相差顯微鏡為重慶光學(xué)儀器廠產(chǎn)品。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)將卵巢癌細(xì)胞株培養(yǎng)于含10％胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中，于37℃，CO2含量5％，濕度90％的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。至對數(shù)生長期時(shí)觀察細(xì)胞形態(tài)并離心收集細(xì)胞，待用。1.2.2細(xì)胞分組將上述細(xì)胞按5×104個(gè)細(xì)胞/ml的濃度重懸于RPMI-1640培養(yǎng)基中，接種于96孔培養(yǎng)板，并

4、將細(xì)胞隨機(jī)分為空白對照組（以生理鹽水代替槲皮素），槲皮素組（槲皮素終濃度為50μmol/L），每組設(shè)5個(gè)復(fù)孔，分別培養(yǎng)12h、24h、36h和48h。培養(yǎng)過程中采用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)并拍照。1.2.3細(xì)胞活性檢測依據(jù)2.2細(xì)胞活性檢測MTT法檢測細(xì)胞活性。槲皮素作用于卵巢癌細(xì)胞后，各組細(xì)胞的吸光度值（A值）隨時(shí)間的延長而逐漸降低，生長抑制率則逐漸升高，表明槲皮素對SKOV3的生長有抑制作用，且具有時(shí)間依賴性。3．討論卵巢癌是女性生殖器官常見的腫瘤之一，發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌而列居第三位。但因卵巢癌致死者，卻占各類婦科腫瘤

5、的首位，對婦女生命造成嚴(yán)重威脅。其原因在于卵巢癌臨床無癥狀，鑒別其組織類型及良、惡性困難，在治療上主要采用順鉑、阿霉素等化療藥物，這些藥物在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，也會影響正常細(xì)胞的代謝，因此尋找副作用小，療效好，價(jià)格低廉的藥物成為卵巢癌治療中的一個(gè)重要突破口。槲皮素是一種具有多種生物學(xué)活性的黃酮類化合物，廣泛分布于被子植物的花葉部分，資源豐富，無毒無味。研究發(fā)現(xiàn)槲皮素具有多種藥理作用，能抑制人肝癌細(xì)胞、人淋巴瘤細(xì)胞、人白血病細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞等多種腫瘤細(xì)胞的增殖生長[3]，但尚無槲皮素對卵巢癌細(xì)胞系作用的相關(guān)研究。本課題在前期研究的基礎(chǔ)上

6、[4]，用濃度為50μmol/L的槲皮素作用于卵巢癌細(xì)胞株，結(jié)果表明槲皮素對卵巢癌細(xì)胞株SKOV3的生長具有抑制作用，且其作用強(qiáng)度與作用時(shí)間成正比。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)，槲皮素可能通過以下作用機(jī)制發(fā)揮其抗癌作用[5、6]：1、通過抗氧化及清除自由基等機(jī)制抑制致癌、促癌劑；2、通過作用于腫瘤細(xì)胞中信號傳遞過程中的一些激酶發(fā)揮抗癌作用；3、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；4、抑制RNA聚合酶活性；5、影響細(xì)胞周期。槲皮素是否也通過上述機(jī)制抑制卵巢癌細(xì)胞的生長尚有待于在本實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)一步深入研究。本研究建立了槲皮素抑制卵巢癌細(xì)胞生長的細(xì)胞模型，為槲皮素應(yīng)用于卵巢

7、癌的臨床治療提供了實(shí)驗(yàn)資料和理論依據(jù)，通過深入研究和進(jìn)行相關(guān)臨床實(shí)驗(yàn)，有望為卵巢癌治療尋找一類新藥物。