番石榴葉總黃酮提取工藝研究

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1、番石榴葉總黃酮提取工藝研究【摘要】　　目的為充分利用番石榴葉資源，優(yōu)選番石榴葉總黃酮的最佳提取工藝。方法以總黃酮含量為考察指標，采用正交設(shè)計的方法研究提取番石榴葉總黃酮的工藝條件。結(jié)果影響番石榴葉總黃酮提取效果的主次因素為：乙醇濃度>回流時間>提取次數(shù)>溶劑用量。結(jié)論番石榴葉總黃酮最佳提取工藝為10倍量70%乙醇加熱回流提取兩次，2h/次?！娟P(guān)鍵詞】番石榴葉；總黃酮；正交設(shè)計　　Abstract：ObjectiveTostudyanextractiontechnologyfortotalflavonesfromleavesofPsidiumguajavaL

2、.MethodsTheextractionconditionsoftotalflavoneseasuringthecontentofthetotalflavonesextracted.ResultsThefactorsesandheatedtimes.ConclusionTheoptimumprocessoftheextractiontechnologyesextraction,te.　　KeyguajavaLeaves;Totallflavones;Orthogonaldesign　　番石榴葉為桃金娘科植物番石榴PsidiumguajavaL.的干燥葉及帶葉嫩莖，分布于華

3、南各地至四川西南部，含β-谷甾醇、榭皮素、番石榴苷、無色車菊素、番石榴酸等成分〔1〕。現(xiàn)代藥理研究表明，番石榴葉提取出的總黃酮苷及單黃酮苷具有降血糖的作用〔2〕；近年來對黃酮類化合物的藥理作用研究較多，發(fā)現(xiàn)其具有抗心腦血管病、抗氧化、鎮(zhèn)痛、抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用〔3，4〕。為了進一步研究番石榴葉總黃酮的功效，充分開發(fā)我國豐富的番石榴葉植物資源,我們以總黃酮含量為考察指標，對番石榴葉總黃酮提取工藝進行了研究?！　?材料與儀器　　1.1儀器722N型分光光度計（上海精密科學儀器有限公司）；SHBⅢ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)；ZFQ85A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海

4、醫(yī)械專機廠)；AL204電子天平（METTLERTOLEDO），Hl圓底燒瓶中，按要求加入一定量的提取劑，加熱回流提取一定時間，濾過，濾液減壓回收溶劑，真空干燥，稱重，得待測番石榴葉干膏?！　?.2總黃酮含量測定方法　　2.2.1測定波長的確定精密稱取干燥蘆丁對照品20mg，置100ml容量瓶中，60%乙醇溶解，定容，得標準對照液（含無水蘆丁0.2000g/L）。精密移取蘆丁對照液2.0ml置25ml容量瓶中，加入50g/L亞硝酸鈉溶液0.75ml，搖勻，靜置6min；再加100g/L硝酸鋁溶液0.75ml，搖勻，靜置6min；再加40g/L氫氧化鈉溶液10ml，60%乙醇

5、稀釋至刻度,搖勻，靜置10min，以60%乙醇調(diào)零，從200nm至600nm進行全波長掃描，測得500nm處有最大吸收，因此以500nm為測定波長?！　?.2.2標準曲線繪制分別精密移取蘆丁標準對照液0，1.5，2.5，3.5，4.5，5.5ml置25ml容量瓶中，按“2.2.1”項下“加入50g/L亞硝酸鈉溶液”起操作，以第一瓶溶液為空白調(diào)零，于500nm測各瓶溶液吸光度；以濃度（C）和吸光度（A）進行線性回歸，得方程為：A=9.9754C-0.0035；r=0.9989。　　2.2.3精密度實驗精密吸取蘆丁對照液2.0ml置25ml容量瓶中，按“2.2.1”項下操作，6

6、0%乙醇調(diào)零，于500nm測溶液吸光度，結(jié)果RSD為0.85%（n=6）?！　?.2.4穩(wěn)定性實驗將同一待測番石榴葉干膏按樣品總黃酮含量測定方法項下操作，分別于0，2，4，6，8h進行測定，結(jié)果RSD1.27%，表明各供試品溶液中總黃酮在測定的8h內(nèi)可保持穩(wěn)定。　　2.2.5重復(fù)性實驗將同一待測番石榴葉干膏按樣品總黃酮含量測定方法項下操作，平行測定6次，結(jié)果RSD為1.84%。　　2.2.6回收率實驗采用加樣回收法。精密稱取已知含量的樣品5份，分別加入精密稱定的對照品適量，按樣品總黃酮含量測定方法項下操作，測定吸光度并計算回收率，結(jié)果平均回收率為96.86%，RSD為0.8

7、2%。　　2.2.7番石榴葉樣品總黃酮含量測定精密稱取不同提取條件所得番石榴葉干膏12mg，置10ml容量瓶中，60%乙醇溶解，定容，精密移取5ml置25ml容量瓶中，按“2.2.1”項操作，60%乙醇調(diào)零，于500nm測溶液吸光度，根據(jù)回歸方程計算總黃酮濃度，并計算樣品總黃酮含量?！　】傸S酮量（mg）=總黃酮濃度×溶液體積×樣品干膏量/6　　總黃酮含量（%）=（總黃酮量/干藥材量）×100%　　2.3提取工藝研究由于乙醇作為提取溶劑具有選擇性好，滲透性強，浸出率較高的優(yōu)點，因此本實驗選擇一定濃度的乙醇溶液作為提取