柿葉總黃酮提取工藝的研究論文

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1、柿葉總黃酮提取工藝的研究論文.freelethodsＴｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｖｏｌｕｍｅｏｆａｌｃｏｈｏｌ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅａｎｄｆｒｅｑｕｅｎｃｙｗｅｒｅｓｙｓｔｅｍａｔｉｃａｌｌｙｓｔｕｄｉｅｄｂｙｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｅｓａｓｔｈｅｍａｒｋｅｒ．ResultsＴｈｅｍｏｒｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｗａｙｔｏｅｘｔｒａｃｔｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｅｓｗａｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗｉｔｈ２５ｔｉｍｅｓａｍｏｕｎｔｏｆ８０％ａｌｃｏｈｏｌｕｎｄｅｒｒｅｆｌｕｘｆｏｒ４ｔｉｍｅｓ．ConclusionＴｈｉｓｍｅｔｈｏｄｏｂｔａｉｎｓｍｏｒ

2、ｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ．Ｉｔｉｓｓｔａｂｌｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅ．Keywords:Ｐｅｒｓｉｍｍｏｎｌｅａｖｅｓ；Ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｅｓ；Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔ；Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓ柿樹是我國的重要經(jīng)濟樹種之一，柿葉為柿樹科落葉喬木植物柿DiospyroskakiＬ．ｆ．的新鮮或干燥葉片。國內(nèi)外研究表明..畢業(yè)，柿葉制劑、柿葉茶及柿葉提取物具有降壓、利尿、抑菌、止血、降脂、抑制癌瘤生長等多方面的生理活性?，F(xiàn)代研究表明，柿葉中的主要有效成分為黃酮類，大多以苷的形式存在［１］，其具有抗急性腦缺血損傷神經(jīng)保護作用，對心血管系統(tǒng)有增加冠脈流

3、量、降低血壓、降低心肌耗氧量、改善全身血液循環(huán)作用，能增加小鼠對窒息性缺氧的耐力，并對大鼠急性心肌缺血有一定的保護作用。此外，柿葉黃酮還有抗氧化清除自由基、抗過敏、保肝［2］、抗炎、抗菌、抗腫瘤等功能，在防治中老年人腦動脈硬化、預防腦血栓形成、防治老年人癡呆和其它神經(jīng)退行性疾病、皮膚抗衰老、美容等方面有廣泛的開發(fā)應(yīng)用前景［3］。為了有效利用柿葉所含的黃酮類物質(zhì)，本實驗以總黃酮含量為指標，采用正交實驗優(yōu)選了總黃酮最佳提取條件。1儀器與試藥１．１儀器ＵＶ－２２０１紫外可見分光光度計（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）；傾斜式高速萬能粉碎機（天津市泰斯特儀器有限公司）；ＰＢ２０３－Ｎ電子精密天平（Ｍ

4、ｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏ儀器上海有限公司）；ＡＪ１５０Ｌ電子精密天平（ＭｅｔｔｌｅｒｉｎＳｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）。１．２試藥實驗用藥材采自北京市昌平區(qū)，落葉晾干，經(jīng)鑒定為柿樹科柿屬柿DiospyrosKakiＬ．ｆ．；蘆丁對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：０８０－９３０３）；ＡｌＣｌ３·６Ｈ２Ｏ等均為分析純。2方法與結(jié)果２．１因素水平表乙醇作為提取溶劑，對乙醇濃度、溶劑量及提取次數(shù)和時間３種因素進行考察，每種因素分為３個水平，結(jié)果見表１。2.2供試品溶液的制備精密稱取柿葉最粗粉（１０～２２目之間）１ｇ共９份，按照表２Ｌ９（３４）正交實驗設(shè)計方案，用對應(yīng)濃度和體積的乙醇回流提

5、取相應(yīng)次數(shù)和時間。回流結(jié)束后合并提取液，放冷，抽濾，濾液轉(zhuǎn)移至１００ｍｌ或２００ｍｌ量瓶中，分別以其相應(yīng)的提取溶劑定容，過微孔濾膜（０．４５μｍ），作為供試品溶液。表1正交設(shè)計因素水平（略）表2L9（34）正交實驗設(shè)計及結(jié)果分析（略）2.3對照品溶液的制備精密稱取１２０℃干燥至恒重的蘆丁對照品０．０８２５ｇ于１００ｍｌ量瓶中，７０％乙醇超聲溶解，定容至刻度，得蘆丁標準液０．８２５ｍｇ·ｍｌ－１。2.4顯色試劑及測定波長的選擇Ａｌ（ＮＯ３）３－ＮａＮＯ２－ＮａＯＨ顯色法［４］：精密吸取蘆丁標準液０．５ｍｌ和供試液１＃、４＃、７＃各適量至２５ｍｌ量瓶中，分別加入５％ＮａＮＯ２１．０

6、ｍｌ，放置６ｍｉｎ，然后加入１０％Ａｌ（ＮＯ３）３１．０ｍｌ，混勻，放置６ｍｉｎ，再加入４．３％ＮａＯＨ１０ｍｌ，用７０％乙醇定容至刻度，放置１５ｍｉｎ。在１９０～７００ｎｍ范圍內(nèi)掃描測定吸收光譜。ＡｌＣｌ３顯色法［５］：精密吸取蘆丁標準液０．１ｍｌ和供試液１＃、４＃、７＃各適量至１０ｍｌ量瓶中，分別加入０．１ｍｏｌ／ＬＡｌＣｌ３·６Ｈ２Ｏ１．０ｍｌ，用５０％乙醇定容至刻度，搖勻，放置１５ｍｉｎ。在１９０～７００ｎｍ范圍內(nèi)掃描測定吸收光譜。比較上述兩種顯色法，用Ａｌ（ＮＯ３）３－ＮａＮＯ２－ＮａＯＨ顯色后，明顯生成紅色絮狀沉淀，此法不宜采用；而ＡｌＣｌ３顯色后，蘆丁標準液的λｍ

7、ａｘ＝４１０ｎｍ，３個樣品溶液的λｍａｘ＝４００～４１０ｎｍ，故選擇ＡｌＣｌ３顯色后４１０ｎｍ測定吸光度。2.5顯色穩(wěn)定性考察精密吸取蘆丁標準液０．３ｍｌ和供試液４＃１．０ｍｌ，依法顯色后放置不同時間，測定吸光度，結(jié)果見表３，吸光度RSD分別為０．２％和０．３％，可見蘆丁標準液和供試液４＃顯色后４ｈ內(nèi)基本穩(wěn)定。2.6線性關(guān)系考察取蘆丁標準液１．０ｍｌ置２５ｍｌ容量瓶中，用５０％乙醇定容至刻度，搖勻，分別?。保?，２．０，２．５，３．０，３．５，４．０ｍｌ置１０ｍｌ量瓶中，加入０．１ｍｏｌ／Ｌ