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《鐵皮石斛莖節(jié)離體培養(yǎng)的研究論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、鐵皮石斛莖節(jié)離體培養(yǎng)的研究論文【摘要】目的通過無菌莖段實現(xiàn)鐵皮石斛快速繁殖。方法將鐵皮石斛試管苗莖節(jié)接種于不同NAA濃度的MS培養(yǎng)基上誘導(dǎo)腋芽萌發(fā)，并在含不同激素配比和有機(jī)添加物的培養(yǎng)基上繼代和誘導(dǎo)生根。結(jié)果NAA0.4mg/L，6-BA5mg/L時鐵皮石斛腋芽萌發(fā)率達(dá)93.33%；NAA0.3mg/L，6-BA2mg/L時叢苗的生根率達(dá)96.67%，香蕉汁和土豆汁能夠顯著促進(jìn)叢生芽的增殖和壯苗生根。結(jié)論建立了適合鐵皮石斛莖段離體培養(yǎng)的快速繁殖體系?！娟P(guān)鍵詞】鐵皮石斛無菌莖節(jié)離體培養(yǎng)激素濃度有機(jī)添加物Abstract:ObjectiveTodeveloparapid
2、propagationofDendrobiumcandidumusingtheasepticnodalsegmentsofshoots.MethodsAxenicnodalsegmentsinatedonMurashigeandSkoog(MS)basalmediumsupplementedediumcontainingdifferentconcentrationhormonesandorganicsusbstance.Results93.33%oftheaxenicnodalsegmentsofDendrobiumcandidumgerminatedontheme
3、diumg/L,.freelg/Land96.67%ofexplantrootedonthemediumcontainingNAA0.3mg/L,6-BA2mg/L.Thegrootedbytheextractofbananaandpotato.ConclusionTheinvitropropagationofDendrobiumcandidumfromaxenicnodalsegmenthasbeenestablished.Keycandidum；Axenicnodalsegments；Invitropropagation；Concentrationofhormo
4、ne；Organicsusbstance石斛最早見于《山海經(jīng)》，藥用始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，其后，歷代諸家本草均予錄述。在《本草綱目》中被列為上品。至今石斛仍是中醫(yī)常用的滋陰清肺、生津止渴、養(yǎng)胃除煩之要藥.freelcandidum是現(xiàn)行版《中國藥典》收載的5種常用石斛之一，是石斛類藥材的上品。鐵皮石斛又名黑節(jié)草、鐵皮吊蘭、鐵皮蘭，屬蘭科石斛屬附生植物。加工后的鐵皮石斛又被稱為鐵皮楓斗，市場價格昂貴，是一種經(jīng)濟(jì)價值和醫(yī)用價值都很高的名貴中藥。然而由于近年來過度采伐、生態(tài)環(huán)境破壞等原因，鐵皮石斛野生資源日漸匱竭，而其對生境要求苛刻、自然繁殖率低等因素進(jìn)一步將鐵皮石斛推向
5、滅絕的邊緣，現(xiàn)在已被列為瀕危保護(hù)的中藥品種［10］。利用鐵皮石斛體外快繁是解決目前鐵皮石斛資源與需求矛盾的重要途徑。目前關(guān)于鐵皮石斛的研究主要集中在原球莖增殖、分化等方面［11,12］，以莖節(jié)為材料，實現(xiàn)鐵皮石斛體外快繁的研究尚鮮見報道。本研究擬通過無菌莖段的離體培養(yǎng)，建立適合鐵皮石斛的快速繁殖體系。1材料與方法1.1材料選擇與處理以本實驗室培養(yǎng)保存的生長旺盛、莖節(jié)粗壯的鐵皮石斛試管苗為材料，切成長度為1～1.5cm帶1～2個腋芽的小莖段。1.2腋芽萌發(fā)將無菌莖段接種于添加30g·L-1蔗糖、8.0g·L-1瓊脂、pH為5.6的MS培養(yǎng)基上。其中6-BA5mg·L-
6、1，并加入不同濃度的NAA（0～0.8mg·L-1）。培養(yǎng)溫度為25℃，光照強(qiáng)度為2000lux，光照時間為12h·d-1。定期觀察不同濃度生長素對鐵皮石斛腋芽萌發(fā)的作用。1.3叢生芽增殖將已萌發(fā)的腋芽接種于MS+30g·L-1蔗糖+NAA0.4mg·L-1+6-BA5mg·L-1，并添加200g·L-1的香蕉、土豆、西瓜、豆芽的增殖培養(yǎng)基上，并以不加天然添加物的培養(yǎng)基為對照，pH均為5.6，考察不同提取物對叢生芽增殖的影響。培養(yǎng)條件同上。1.4壯苗生根將生長健壯，株高為2cm左右的叢生苗接種于MS+30g·L-1蔗糖+8.0g·L-1瓊脂，激素濃度分別為NAA0.
7、1，0.3，0.5mg·L-1和6-BA2，4mg·L-1或MS+30g·L-1蔗糖+NAA0.3mg·L-1+6-BA2mg·L-1+8.0g·L-1瓊脂，添加200g·L-1不同提取物的生根培養(yǎng)基上，進(jìn)行誘導(dǎo)生根和壯苗試驗。培養(yǎng)條件同上。1.5統(tǒng)計試管苗生長狀況試管苗接種培養(yǎng)50d后，分別觀察統(tǒng)計芽誘導(dǎo)率、芽增殖數(shù)、株高、根誘導(dǎo)率、生根數(shù)、根長、植株健壯度及褐化程度。2結(jié)果2.1不同生長素濃度對莖段腋芽的誘導(dǎo)作用在6-BA為5mg·L-1時，不同濃度的NAA誘導(dǎo)莖段腋芽萌發(fā)的結(jié)果如表1所示。由表1可知NAA對鐵皮石斛莖段腋芽萌發(fā)的作用與其濃度有關(guān)。當(dāng)加入濃度
