地膽草腋芽莖段的離體培養(yǎng)研究

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1、地膽草腋芽莖段的離體培養(yǎng)研究地膽草腋芽莖段的離體培養(yǎng)研究摘要為了探索地膽草組織培養(yǎng)的方法，試驗(yàn)以無菌的地膽草腋芽莖段為外植體，研究6-BA和NAA不同激索水平配比對地膽草芽的誘導(dǎo)和繼代增殖的影響。結(jié)果表明，適宜于地膽草芽誘導(dǎo)分化的培養(yǎng)基配方為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0mg/L,繁殖系數(shù)為2.6倍,適宜于地膽草芽繼代增值的培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0mg/L,繁殖系數(shù)為2.3倍。關(guān)鍵詞地膽草；腑芽莖段；離體培養(yǎng)中圖分類號R282.71文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號1007-5739(2014)07-0098-02StudyonStemSegmentWithA

2、xillaryBudCultureofElephantopusscaberL.invitroCHENGJing1GAOHong-hua1*GUXiao-chuan1ZHENGDing-hua1YUShu-hua2ZHANGYi-shan2FANGao-Jun1WANGXiu-quan1ZHANGZhi-yang1LIYan1(1RubberResearchInstitute,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences,DanzhouHainan571737；2ChineseAcademyofTropicalAgr

3、iculturalSciences)AbstractToexploretheeffectsofdifferenttimeofhormonescombinationandconcentrationsinvitrocultureofElephantopusscaberL.,usingsterileElephantopusscaberL.stemwithaxillarybudasexplants,effectofinductionandmulitiplicationofElephantopusscaberL.indifferentlevelsofhormone6~

4、BAandNAAratiowasstudied.TheresultsshowedthatthebettersuitableforshootinduetionofexplantswascultureofMS+6-BA1.5mg/L+NAA0mg/L,propagationcoefficientwas2.6times,andthebettersuitableforsecondarycultureofexplantswasculturemediumofMS+6-BA0mg/L,propagationcoefficientwas2.3times?KeywordsEl

5、ephantopusscaberL；axillarybud；cultureinvitro菊科地膽草屬植物地膽草(ElephantopusscaberL.)為我國長江以南，尤其是華南地區(qū)常用的民間藥物。港澳地區(qū)習(xí)稱土蒲公英、地膽頭。臺灣民間乂稱燈豎朽、丁茄芋，多用于治療胃病、肝炎、腎炎、支氣管炎等［1］。西南地區(qū)少數(shù)民族民間亦喜用此藥用植物，如《中國民族藥志》記載傣、苗、瑤、壯、黎、侗、景頗、拉枯、基諾、布依族人民用此藥治療牙痛、痢疾等病。東南亞國家傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中均有使用此種植物不同部位治療發(fā)熱、咳嗽、關(guān)節(jié)炎、水腫等的記載。南美洲的巴西民間認(rèn)為它具有利尿、抗炎

6、功效，非洲的尼H利亞、馬達(dá)加斯加土著人則用此藥作解熱劑，治療痢疾、關(guān)節(jié)炎等疾?。?］。因其較高的藥用價(jià)值，冃前在民間應(yīng)用廣泛，其中在廣東、海南和港澳臺地區(qū)作為藥用食材，使用非常普遍，但由于長期進(jìn)行營養(yǎng)繁殖,不僅用種量大，擴(kuò)繁速度慢，還因連續(xù)種植使病毒不斷積累導(dǎo)致種性退化，使其種植面積和數(shù)量逐年下降，嚴(yán)重影響了質(zhì)量和產(chǎn)量的提高［3-4］o本文利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)建立地膽草離體再生體系，為加快地膽草種苗繁殖速度，提供一定的理論依據(jù)［5-6］o1材料與方法1.1試驗(yàn)材料1.1.1材料處理。12月待地膽草種了全部成熟、果盤變干以后，用剪刀剪取果盤，進(jìn)行收集。將收集好

7、的果盤放在5mm篩孔的篩了上用手進(jìn)行揉搓，使種子和果盤分離，然后再用2mm篩孔的篩子，將更純凈的種了篩出。將收集好的種了裝入密封袋中，排掉空氣密封好，放在黑暗干燥的實(shí)驗(yàn)柜中保存待用。外植體的滅菌：取成熟飽滿的地膽草種子，用流動水沖洗10min,在超凈臺上用75%酒精浸泡1min,用0.1%升汞滅菌15min,無菌水漂洗5?7次,然后用解剖針剝開種了頂尖部位，接種在盛有MS培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中；將種了發(fā)芽的地膽草植株接種到盛有MS培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)50d左右。芽的誘導(dǎo)分化：將培養(yǎng)出來的地膽草無菌苗，切除葉片，用解剖刀將地膽草截取成2cm左右?guī)б秆康那o段（圖1）,

8、注意不能傷到芽點(diǎn)，放在無菌濾紙上吸干后接入含6-BA