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1、榕樹葉總黃酮超聲提取工藝條件的研究陳洪濤，蔡丹昭，林立波【摘要】 目的為充分利用榕樹葉資源，研究超聲提取榕樹葉總黃酮的工藝條件。方法以總黃酮含量為考察指標(biāo)，采用正交設(shè)計(jì)的方法研究超聲波輔助提取榕樹葉總黃酮的工藝條件。結(jié)果影響榕樹葉總黃酮超聲提取效果的主次因素為：乙醇濃度>溶劑量>提取次數(shù)>超聲時(shí)間，榕樹葉總黃酮最佳提取工藝為16倍量70%乙醇超聲提取3次，40min/次。結(jié)論優(yōu)化的提取方法效率高，穩(wěn)定性好，提取總黃酮含量可達(dá)2.42%?！娟P(guān)鍵詞】榕樹葉總黃酮正交設(shè)計(jì)超聲波 Abstract：ObjectiveTostudyanextractiontechno
2、logyfortotalflavonefromleavesofFicusmicroearpaL.MethodsTheextractionconditionsoftotalflavonebyultrasoniceasuringthecontentofthetotalflavoneextract.ResultsThefactorsesandtimesumprocessoftheextractiontechnologyentandorthogonaldesignesextractionandfortyminuteseachtime.ConclusionTheoptimizedmetho
3、disstableandefficient,therateoftotalflavoneextractedisupto2.42%. KeyicrocarpaL.f.的葉，為廣西壯族民間常用藥，有清熱、解表、化濕、活血散瘀的功效，常用于治療流行性感冒、瘧疾、急性腸炎、跌打損傷等疾病。榕樹葉中主要含黃酮苷、香豆精等化學(xué)成分〔1〕。近年來對(duì)黃酮類化合物的藥理作用有較多研究，發(fā)現(xiàn)其具有抗心腦血管病、抗氧化、鎮(zhèn)痛、抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用〔2,3〕。研究表明可用超聲波提取榕樹葉總黃酮〔4〕，但未見對(duì)其提取條件優(yōu)化的研究。為進(jìn)一步研究榕樹葉總黃酮的功效，充分利用榕樹葉資源，本實(shí)驗(yàn)以總黃
4、酮含量為考察指標(biāo),采用正交實(shí)驗(yàn)的方法對(duì)超聲波輔助提取榕樹葉總黃酮的工藝條件進(jìn)行了研究?！ ?儀器與材料 1.1儀器SG3300H超聲波清洗器(上海冠特超聲儀器有限公司)；UV-2500分光光度計(jì)(日本島津)；SHBⅢ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)；ZFQ85A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海醫(yī)械專機(jī)廠)。 1.2試劑蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所)；榕樹葉（采自廣西藥用植物園）；95%乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉等皆為分析純。 2方法與結(jié)果 2.1榕樹葉總黃酮的提取取新鮮榕樹葉，烘干，粉碎，準(zhǔn)確稱取榕樹葉粉5g，置于250ml錐形瓶中，按要求加入一定量的提取劑，超聲
5、波提取一定時(shí)間，抽濾，減壓回收溶劑，定容于50ml容量瓶中,作為待測液。 2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密稱取干燥蘆丁對(duì)照品20mg，置100ml容量瓶中，60%乙醇溶解，定容，得標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照液（含無水蘆丁0.2000g/L）。分別精密移取蘆丁對(duì)照液0，1.5，2.5，3.5，4.5，5.5ml置25ml容量瓶中,分別加入50g/L亞硝酸鈉溶液0.75ml，搖勻，靜置6min；再加100g/L硝酸鋁溶液0.75ml，搖勻，靜置6min；再加40g/L氫氧化鈉溶液10ml，60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置15min，以第1瓶溶液為空白調(diào)零，取第3瓶溶液進(jìn)行全波長掃描，測得510nm處有最大吸收
6、，因此于510nm測各瓶溶液吸光度；以濃度（C）與吸光度（A）進(jìn)行線性回歸，得方程為：A=9.9754C-0.0035，r=0.9989?！ ?.3樣品含量測定取“2.1”項(xiàng)中待測液1ml于25ml容量瓶中，從分別加入50g/L亞硝酸鈉溶液起同“2.2”項(xiàng)下操作，510nm處測定吸光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算各樣品榕樹葉總黃酮含量。 總黃酮含量（%）=總黃酮量/干藥材量×100% 2.4單因素實(shí)驗(yàn)由于乙醇作為提取溶劑具有選擇性好,滲透性強(qiáng),浸出率較高的優(yōu)點(diǎn)，因此本實(shí)驗(yàn)選擇一定濃度的乙醇溶液作為提取劑，并分別考察了溶劑濃度、溶劑用量、浸泡時(shí)間、超聲波萃取時(shí)間及萃取次數(shù)等因素對(duì)提取率的
7、影響。 2.4.1溶劑浸泡時(shí)間對(duì)提取率的影響各取5g樣品，分別加入60%乙醇50ml，浸泡0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5h，超聲波提取30min，抽濾，定容至50ml，按“2.3”項(xiàng)下方法制備樣品，測510nm吸光度值，由回歸方程計(jì)算得各樣品總黃酮含量。結(jié)果見表1，圖1。從結(jié)果可見，樣品浸泡1h以上已達(dá)到浸泡完全，提取所得總黃酮含量基本一致。表1溶劑浸泡時(shí)間與總黃酮含量的關(guān)系（略） 2.4.2乙醇濃度對(duì)提取率的影響各取5g樣品，分別加入50ml不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇(
